ГУ НИИ медицинской генетики СО РАМН, г. Томск
Лаборатория эволюционной генетики
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.
Актуальность: на сегодняшний день в мире одним из наиболее тяжелых осложнений беременности является гестоз, занимающий ведущее место в структуре материнской и пе-ринатальной заболеваемости и смертности. Частота встречаемости этой патологии в России составляет 6-20%. Несмотря на существование большого количества теорий развития гестоза (неврогенная, гормональная, почечная, плацентарная, иммунологическая, генетическая), многочисленных исследований механизмов развития заболевания и появление новых методов лечения, гестоз продолжает занимать ведущее место среди причин материнской и перинатальной заболеваемости и смертности [2]. На долю этой патологии приходится до 70% мертворождений и выкидышей, а величина перинатальных потерь при гестозе возрастает почти в 5 раз [1]. Ряд ученых придерживается мнения о возможной роли наследственной предрасположенности в возникновении данного заболевания [3]. Исходя из современных представлений о патогенезе гестоза, в качестве возможных генетических маркеров этой патологии можно выделить полиморфные варианты генов, ответственных за развитие гиперкоагуляции.
Цель: изучить влияние аллельных вариантов С677Т и A1298C гена метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR), маркера G20210A гена протромбина (FII), полиморфизма G1691A гена пятого фактора свертывающей системы крови (FV), мутации –675 4G/5G гена ингибитора активатора плазминогена (PA1-1)) в формировании гиперкоагуляции при гестозе.
Материал и методы: было обследовано 140 русских женщин с беременностью, осложненной гестозом. Контрольную группу составили 150 недавно родивших женщин русской национальности с физиологически протекавшей беременностью. Были изучены частоты следующих маркеров наследственной тромбофилии: аллельные варианты С677Т и A1298C гена метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR), маркер G20210A гена протромбина (FII), полиморфизм G1691A гена пятого фактора свертывающей системы крови (FV), мутация –675 4G/5G гена ингибитора активатора плазминогена (PA1-1).
У обследованных индивидуумов была выделена ДНК, амплифицированы интересующие полиморфные локусы (методом ПЦР) с последующим рестрикционным анализом с помощью специфических эндонуклеаз. Продукты амплификации и рестрикции анализировали с помощью электрофореза в 2-3%-м агарозном геле.
Результаты: при проведении сравнительного анализа полиморфизма C677T выявлено достоверное повышение частоты генотипа TT в группе женщин с гестозом (15 %) по сравнению с контрольной группой – 2% (χ²=8,39;p <0,05). При попарном сравнении исследуемых групп частоты аллелей по локусу C677T гена MTHFR значимо отличались в группе беременных с гестозом и в контрольной группе (χ²=13,89, р<0,05). Второй изученный маркер гена MTHFR – А1298С также показал статистически значимую ассоциацию с гестозом (при сравнении частот генотипов χ²=7,14, р <0,05): генотип 1298СС в группе больных гестозом встречался в 2 раза чаще (21%), чем в контрольной группе (10%). При анализе частот генотипов полиморфного варианта –675 4G/5G гена PA1-1 в группе беременных с гестозом генотип 4G/4G встречался в 1,7 раз (48%) чаще, чем в контроле (28%) (χ²=12,24, р<0,05). Сравнение частот аллеля 4G в исследуемых группах также выявило достоверно более высокие значения частоты данного аллеля в группе с гестозом (χ²=11,23, р<0,05). При сравнительном анализе частот генотипов и аллелей по полиморфизмам G1691A гена FV и G20210A гена FII значимых отличий не найдено.
Ген MTHFR у человека расположен на коротком плече первой хромосомы(1p36.3). Полиморфизм С677Т приводит к замене цитозина на тимидин в 4-ом экзоне, что приводит к замене аминокислотного остатка аланина на остаток валина в сайте связывания фолата и накоплению гомоцистеина в организме. Имеется выраженная тенденция к прямой зависимости частоты встречаемости маркера С677Т от тяжести гестоза. Наиболее часто он встречается при тяжелых формах гестоза (77,8%) и повторном гестозе (86,7%). У женщин с генотипом 677ТТ гена MTHFR достоверно повышен риск развития гестоза тяжелой степени при последующих беременностях (53,8%) [5]. Полиморфизм А1298С гена MTHFR приводит к замене глутамина на аланин в регулярном домене фермента, что сопровождается небольшим снижением его активности. Комбинаций гетерозиготности аллелей 677Т и 1298С сопровождаются снижением активности фермента, повышением гомоцистеина, снижением уровня фолата [4]. Высокий уровень ГЦ увеличивает риск атеросклероза, ишемических нарушений, болезни Альцгеймера, сосудистой патологии беременности, проявляющейся в виде гестоза: нефропатии, преэкламсии и экламсии.
Полиморфизм –675 4G/5G гена PA1-1 является одним из важнейших генов плазменного звена гемостаза. Протеин PAI-1 регулирует тканевый/урокиназный активаторы плазминогена. Носительство аллеля 4G приводит к повышенной экспрессии гена и увеличенному уровню PAI-1 в крови, снижению активности тромболитической системы, и возрастанию риска тромбообразования. Показано, что гомозиготная мутация –675 4G/4G является фактором риска для развития тромбозов и инфаркта миокарда.
Выводы: по результатам исследования аллельные варианты С677Т и А1298С гена MTHFR, а также 4G/5G-полиморфизм гена PA1-1 статистически значимо ассоциированы с гестозом в русской популяции г.Томска. Таким образом, полученные данные свидетельствуют об участии гипергомоцистеинемии и наследственной тромбофилии в развитии гестоза.
Список литературы:
1. Савельева, Г. М. Ефимов, В. С. Кашежева, А. З. Осложненное течение беременности и гипергомоцистеинемия /Г. М. Савельева, В. С. Ефимов, А. З. Кашежева // Акушерство и гинекология. – 2000. – №3. – С. 3–5.
2. Малышева, О. В. Мозговая, Е. В. Демин, Г. С. и др. Ассоциация полиморфных аллелей генов АСЕ и еNOS с развитием гестозов / О. В. Малышева, Е. В. Мозговая, Г. С. Демин // Мед. генетика. – 2003. – Т. –2. – №2. – С. 78–82.
3. Narayanan, S. McConnell, J. Little, J. et al. Associations between two common variants C677T and A1298C in the methylenetetrahydrofolate reductase gene and measures of folate metabolism and DNA stability in human lymphocytes in vivo / S. Narayanan, J. McConnell, J. Little // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prey – 2004. – V. - 13. – P. 1436–1443.
4. Frosst, P. Blom, H.J. Milos, R. Et al A candidate genetic risk factor for vascular disease: a common mutation in methylenetetrahydrofolate reducta / P. Frosst, H. J. Blom, R. Milos // Nature Genet. - 1995. - V. - 10. - P. 111 – 113.
5. Djordjevic, V. Rakicevis, L.J. Mikovic, D. Et al. Factor V Leiden, FII G20210A, MTHFR C677T mutation as risk factors for venous thrombosis during pregnancy and puerperium / V. Djordjevic, L. J. Rakicevis, D. Mikovic // Vojnosanit Pregl. – 2005. – V. - 62. – P. 201–205.
|
