Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск

Амитоз имеет фундаментальное значение в реализации внутриклеточных процессов, поскольку наблюдается в клетках различной тканевой принадлежности [2; 4; 5; 14; 16], и отмечен в патологических и физиологических условиях [12], в том числе при повышении функциональной активности ткани [6]. Амитоз представляет собой стадийный процесс в ходе, которого последовательно происходят: растяжение ядра, инвагинация кариолеммы, и перетяжка ядра на части [7].
Однако большинство существующих на сегодняшний день описаний морфологических признаков и морфометрических критериев амитоза следует считать в достаточной степени субъективными. Их использование для оценки амитотической активности требует высокой квалификации исследователя, обладающего большим опытом в проведении подобного рода анализов. Это объясняется тем, что формирование ядерной перетяжки или отпочкование фрагмента ядра далеко не всегда приводит к амитотическому делению данной структуры, поскольку даже выраженное изменение ее формы может быть обратимым.
В тоже время соотношение видимой площади ядра к его периметру представляет собой именно тот показатель, который позволяет объективно прогнозировать вероятность реализации амитотического деления.
Достоверная оценка процессов морфогенеза невозможна без количественного анализа объектов. Для морфометрического анализа разработаны и активно применяются высокотехнологичные системы автоматического опознавания образов [3]. Потенциальные возможности компьютеризированного морфометрического анализа показаны в ряде экспериментальных [8; 11; 15] и клинических работ [9; 10; 13]. Этот метод с успехом используется для обеспечения цитологических исследований [10], поскольку дает источник объективной информации о состоянии клеточных структур [1].
На основании сопоставления таких наиболее часто встречающихся по нашим данным морфологических признаков амитотического деления ядер макрофагов, как образование ядерной перетяжки или отпочкование фрагмента ядра, с отмеченными морфометрическими показателями были получены результаты, о которых будет сказано ниже.
В своей работе мы использовали программный пакет Видео Тест – Морфо (версия 3.2), который предназначен для количественного анализа изображений на основе измерений яркостных, площадных и линейных параметров объектов, имеющих замкнутый контур.
Итак, если наблюдается формирование перетяжки ядра или отпочкование его фрагмента, то реализация амитоза несомненна только в том случае, если соотношение видимой площади ядра к его периметру составляет в среднем 20,8 и 19,7 единиц измерения, соответственно. Достаточно информативным показателем является и отклонение от эллипса по фактору формы. Данные параметр соответствует значениям 95 % для ядер с образующейся перетяжкой, и 93 % - для ядер с признаками отпочкования фрагмента. Меньшие значения данного показателя не позволяют надежно прогнозировать реализацию амитоза, а большие - могут свидетельствовать о наличии полиплоидных ядер.
Необходимо отметить, что отсутствие достоверных различий по уровню изменения соответствующих параметров у ядер с разной формой амитотического деления свидетельствует об отсутствии специфических отличий в морфометрических критериях данных форм амитоза.
Однако несомненным следует признать существование достоверных отличий по сравнению с параметрами ядер без амитотической активности, что делает эти признаки информативным инструментом детекции амитоза.
Указанные значения показателей сами по себе не могут быть единственными критериями амитотического деления ядра, а их использование целесообразно только при наличии отмеченных морфометрических признаков. Это ограничение объясняется тем, что данные уровни показателей могут наблюдаться и при ряде кариопатологических изменений.
Таким образом, предложенный способ прогнозирования амитотического деления ядра является достаточно объективным методом оценки, который целесообразно использовать при учете частоты встречаемости клеток с указанными признаками.

Список литературы:
1. Bani D., Nistri S., Quattrone S., Bigazzi M., Sacchi T.B. Relaxin causes changes of the liver. In vivo studies in rats. // Horm. Metab. Res. - 2001. - V. 33. - № 3. - P. 175-180.
2. Boll I.T. Origin of the early megakaryopoietic progenitor cell and further polyploidization in the thrombopoietic cell series. Phase-contrast observations of human bone marrow // Acta. Haematol. - 1981. - V. 66. - № 3. - P. 187-194.
3. Caruntu I.D. Highly effective techniques in computerized dental tissue morphometry. // J. Cell. Mol. Med. - 2002 - V. 6. - № 4. - P. 631-642.
4. Cotte C., Easty G.C., Neville A.M., Monaghan P. Preparation of highly purified cytotrophoblast from human placenta with subsequent modulation to form syncytiotrophoblast in monolayer cultures // In Vitro. - 1980. - V. 16. - № 8. - P. 639-646.
5. Gotzos V. In vitro culture of human peritoneal fluid cells // Acta. Anat. (Basel). - 1977. - V. 98. - № 3. - P. 281-294.
6. Kriesten K. Relative incidence of mitosis and binucleated cells, nuclear volume and nucleolar rate per nucleus in the mammary gland eipithelium of the mouse during differentiation in the gestational and lactation phase // Gegenbaurs. Morphol. Jahrb. - 1984. - V. 130. - № 2. - P. 307-314.
7. Kuhn E.M., Therman E., Susman B. Amitosis and endocycles in early cultured mouse trophoblast // Placenta. - 1991. - V. 12. - № 3. - P. 251-261.
8. Laitakari J., Harrison D., Stenback F. Morphometric characteristics of cell proliferation and p53 expression in development of experimentally induced respiratory tumors. // Anal. Quant. Cytol. Histol. - 2001. - V. 23. - № 4. - P.273-286.
9. Nemec E., Van de Putte S., Van Pachterbeke C., Vokaer R., Budel V., Deprez C., Kiss R., Decaestecker C. Ploidy and chromatin pattern analysis as an aid for cervical smear diagnosis. // Histol. Histopathol. - 2002. - V. 17. - № 2. - P. 403-409.
10. Ramos L., Hendriks J.C., Peelen P., Braat D.D., Wetzels A.M. Use of computerized karyometric image analysis for evaluation of human spermatozoa. // J. Androl. - 2002. - V. 23. - № 6. - P. 882-888.
11. Silva Junior A.N., Pinheiro A.L., Oliveira M.G., Weismann R., Ramalho L.M., Nicolau R.A. Computerized morphometric assessment of the effect of low-level laser therapy on bone repair: an experimental animal study. // J. Clin. Laser. Med. Surg. - 2002. - V.20 . - № 2. - P. 83-87.
12. Tang N., Li C., Xu J. Experimental study on regenerative capacity and form of corneal endothelial cells in the primate // Zhonghua Yan Ke Za Zhi. - 1998. - V. 34. - № 1. - P. 28-30.
13. Vizzotto L., Vertemati M., Gambacorta M., Sabatella G., Spina V., Minola E. Analysis of histological and immunohistochemical patterns of the liver in posthepatitic and alcoholic cirrhosis by computerized morphometry // Mod. Pathol. - 2002. - V. 15. - № 8. - P. 798-806.
14. Walen K.H. Budded karyoplasts from multinucleated fibroblast cells contain centrosomes and change their morphology to mitotic cells // Cell. Biol. Int. - 2005. - V. 29. - № 12. - P. 1057-1065.
15. Waly N., Gruffydd-Jones T.J., Stokes C.R., Day M.J. The distribution of leucocyte subsets in the small intestine of healthy cats. // J. Comp. Pathol. - 2001. - V. 124. - № 2-3. - P. 172-182.
16. Yang H., Zhang L., Zhao X.K. The growth and morphological characteristics of human and rabbit corneal endothelium in tissue culture // J. Tongji. Med. Univ. - 1991. - V. 11. - № 2. - P. 116-122.