Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск

Оценка функциональной активности клеток невозможна без учета характера межклеточных взаимодействий [3]. В тоже время в научной литературе редко встречаются сведения о поведении фибробластов различных морфологических типов в смешанных культурах, которые представляют собой удобный инструмент для изучения не только процессов межклеточной кооперации, но и функциональной активности клеток. Актуальность проведения таких исследований объясняется распространением заболеваний соединительной ткани [1; 2].
Цель исследования заключалась в уточнении особенностей влияния перитонеальных макрофагов и лимфоцитов селезенки на изменение функциональной активности многоядерных и полиплоидных фибробластов. Концентрация посадки клеток в контрольных культурах составляла 100 тыс. фибробластов линии L929 в 1 мл взвеси. Аналогичным образом формировали экспериментальные группы культур, с той разницей, что через 24 часа после посадки клеток дополнительно вносили по 0,3 мл взвеси лимфоцитов селезенки, или по 0,3 мл взвеси перитонеальных клеток, выделенных от мышей линии BALB/c. Подсчитывали численность многоядерных, одноядерных и полиплоидных одноядерных фибробластов, имевших цитоплазматические отростки (что является одним из отражений функциональной активности клеток). Определяли среднее количество цитоплазматических отростков, принадлежавших клеткам, указанных типов. Результаты оценивали через 48 часов от начала инкубации.
При совместной инкубации культур фибробластов с перитонеальными клетками наблюдали возрастание количества цитоплазматических отростков у многоядерных и полиплоидных одноядерных фибробластов на 20,8 % и на 35,5 %, соответственно. В смешанных культурах фибробластов и лимфоцитов селезенки отмечали, что численность цитоплазматических отростков у полиплоидных фибробластов увеличивалась в среднем на 33,3 %. Инкубация фибробластов совместно с перитонеальными клетками и лимфоцитами селезенки индуцировала не значительное возрастание частоты встречаемости всех указанных морфологических типов клеток соединительной ткани, имевших цитоплазматические отростки.
Таким образом, наблюдали увеличение среднего количества цитоплазматических отростков у многоядерных и полиплоидных фибробластов, инкубируемых совместно с перитонеальными клетками. Следует отметить, что только у полиплоидных фибробластов возрастала численность цитоплазматических отростков в ответ на присутствие лимфоцитов селезенки. Логично предположить, что в культурах фибробластов присутствует определенное количество клеток, для которых характерна активная перестройка элементов цитоскелета, о чем косвенно свидетельствует возрастание средней численности цитоплазматических отростков, приходящихся на одну клетку и отсутствие значительного увеличения частоты встречаемости фибробластов с указанными признаками. Поскольку достоверных изменений уровней показателей у одноядерных клеток не наблюдали то, возможно, что эти клетки более резистентны к указанным изменениям условий инкубации. Предлагаемый метод культивирования фибробластов с перитонеальными макрофагами и лимфоцитами селезенки может быть использован для изучения процессов межклеточной кооперации и для определения особенностей изменения функциональной активности клеток соединительной ткани.
Список литературы:
1. Сигидин Я.А., Гусева Н.Г., Иванова М.М. Диффузные болезни соединительной ткани // М.: Медицина, 1994. - 544 с.
2. Adebajo A.O., Alegbeleye J.A. Cross cultural aspects of rehabilitation in rheumatic diseases // Curr. Opin. Rheumatol. - 2007. - V. 19. - № 2. - P. 163-167.
3. Kovanen P.T. Mast cell granule-mediated uptake of low density lipoproteins by macrophages: a novel carrier mechanism leading to the formation of foam cells // Ann. Med. - 1991. - № 5. - P. 551-559.