|
Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск
Актуальность изучения аспектов образования многоядерных клеток макрофагального происхождения определяется их участием в развитии ряда патологических процессов [1]. В настоящее время известны многие морфофункциональные особенности этих полинуклеаров, что объясняется успешным применением комплекса современных методов исследования клеток [1]. В частности, важное значение имеет проведение иммуноцитохимического анализа, поскольку, ориентируясь на степень продукции ряда цитокинов или частоту встречаемости клеток с признаками экспрессии этих медиаторов можно судить об интенсивности формирования многоядерных макрофагов. Известно, например, что GM-CSF играет роль в регуляции процесса клеточного слияния [4], TNF-α относится к медиаторам, индуцирующим клеточную фузию [3], в то время как IL-1, наряду с отмеченными цитокинами, является хемотрактантом для макрофагов [2]. Влияние тех или иных цитокинов на образование полинуклеаров макрофагального происхождения во многом зависит от конкретных условий, детерминирующих настоящий процесс. Поэтому заметим, что имеются данные и об IL-4 индуцированном слиянии макрофагов [5].
Однако получение достоверной информации об участии многоядерных макрофагов в патологических реакциях невозможно также без учета прямых критериев оценки активности их образования. В связи с этим целесообразно выделить комплекс важнейших морфологических критериев, позволяющих исследователю составить четкие представления о напряженности процессов формирования полинуклеаров.
Не вызывает сомнения тот факт, что относительная численность многоядерных макрофагов является одним из основных показателей, дающих возможность судить об интенсивности образования этих клеток. Данный параметр наиболее значим при изучении процессов, затрагивающих в первую очередь клетки макрофагального происхождения, включая субпопуляцию их полинуклеарных производных. Тогда как определение абсолютного количества многоядерных макрофагов, присутствующих в ткани, например, при развитии очага хронического воспаления, или находящихся в составе клеточной культуры, может быть полезно для оценки степени участия этих форм в ряде межклеточных взаимодействий.
Не стоит забывать, что образование многоядерных макрофагов базируется на процессах клеточного слияния и амитотического деления ядер [1]. Поэтому путем определения относительной численности макрофагов, имеющих цитоморфологические признаки фузии и амитоза, можно установить степень участия этих реакций в образовании полинуклеаров. Доминирование того или иного процесса говорит о его значении в формировании многоядерных клеток.
На наш взгляд целесообразно использование такого производного показателя как фузио-амитотический индекс, который представляет собой отношение числа клеток с признаками фузии к числу клеток с признаками амитотического деления ядер. Отметим, что для макрофагов в интактной культуре перитонеальных клеток этот индекс всегда меньше единицы, поскольку при таких условиях чаще регистрируются макрофаги с признаками амитоза, чем с признаками фузии. Однако присутствие фузогенных факторов вызывает увеличение данного индекса, и он может превышать отмеченный уровень. Этот показатель демонстрирует, во сколько раз интенсивность одного из процессов формирования полинуклеаров превышает активность другого. Фузио-амитотический индекс (I) вычисляется по формуле: I = F / A, где F и А - это относительная численность клеток соответственно с признаками фузии и амитотического деления ядер.
Информативным параметром можно также считать относительное содержание полинуклеаров с определенным количеством ядер, что свидетельствует об активности образования конкретных форм многоядерных макрофагов, и имеет значение при исследовании клеток, принадлежащих к тому или иному классу ядерности. Данный параметр обычно сравнивают с показателем среднего содержания ядер в полинуклеаре.
Таким образом, основными показателями активности формирования многоядерных макрофагов следует считать: уровень продукции ряда цитокинов (IL-1, IL-4, GM-CSF, TNF-α) или частоту встречаемости клеток с признаками экспрессии этих медиаторов; абсолютную и относительную численность полинуклеаров; относительное количество макрофагов с цитоморфологическими признаками фузии и амитотического деления ядер; фузио-амитотический индекс; относительное содержание полинуклеаров, принадлежащих к конкретному классу ядерности; среднее содержание ядер в полинуклеаре.
Существуют и другие показатели оценки активности образования многоядерных макрофагов, но их использование оправдано при решении достаточно узких исследовательских задач, поэтому сейчас такие параметры не рассматривались. В то же время ряд вышеотмеченных морфологических показателей может применяться и при определении интенсивности формирования полинуклеаров другого происхождения, но при этом требуется учитывать специфику их образования за счет, возможно, других механизмов реализации указанного процесса. Адекватное использование отмеченных параметров для определения степени интенсивности и характера реакций формирования полинуклеаров позволяет получать информацию необходимую для решения актуальных вопросов, составляющих проблему изучения многоядерных макрофагов.
Список литературы:
1. Ильин Д.А. Многоядерные макрофаги. - Новосибирск: Наука, 2011. - 56 с.
2. Flad H.D., Grage-Griebenow E., Petersen F., Scheuerer B., Brandt E., Baran J., Pryjma J., Ernst M. The role of cytokines in monocyte apoptosis. // Pathobiology. - 1999. - V. 67. - № 5-6. - Р. 291-293.
3. Kim K., Lee S.H., Ha Kim J., Choi Y., Kim N. NFATc1 induces osteoclast fusion via up-regulation of Atp6v0d2 and the dendritic cell-specific transmembrane protein (DC-STAMP) // Mol. Endocrinol. - 2008. - V. 22. - № 1. - P. 176-185.
4. Lee M.S., Kim H.S., Yeon J.T., Choi S.W., Chun C.H., Kwak H.B., Oh J. GM-CSF regulates fusion of mononuclear osteoclasts into bone-resorbing osteoclasts by activating the Ras/ERK pathway // J. Immunol. - 2009. - V. 183. - № 5. - P. 3390-3399.
5. McNally A.K., DeFife K.M., Anderson J.M. Interleukin-4-induced macrophage fusion is prevented by inhibitors of mannose receptor activity // Am. J. Pathol. - 1996. - V. 149. - № 3. - P. 975-985.
|
