Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Проблемы и перспективы современной науки» (выпуск 1), под редакцией проф., д.м.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Получение информации, необходимой для решения некоторых задач в биологии и медицине связано с определением особенностей межклеточных взаимодействий [2; 3]. Многие аспекты взаимоотношений иммунокомпетентных клеток с клетками соединительной ткани подробно изучены in vitro [1].
Однако вопросы, касающиеся формообразования и функционирования фибробластов в смешанных клеточных культурах, недостаточно освещены в современной литературе. Изучение этих процессов необходимо для разработки методов коррекции заболеваний соединительной ткани.
Целью исследования являлось определение особенностей формообразования и функционирования фибробластов в смешанных клеточных культурах. Задачи исследования состояли в определении митотической активности клеток, численности многоядерных фибробластов и частоты встречаемости микроядер.
Концентрация посадки клеток в контрольных культурах составляла 100 тыс. фибробластов мыши в 1 мл взвеси. Аналогичным образом формировали и экспериментальные группы, с той разницей, что через 24 часа после посадки клеток дополнительно вносили по 0,3 мл взвеси лимфоцитов селезенки, или по 0,3 мл взвеси перитонеальных клеток, полученных от мышей линии BALB/c. Либо в указанном объеме добавляли кондиционную среду, полученную в результате инкубации (в течение 24 часов) лимфоцитов селезенки или перитонеальных клеток, выделенных от животных этой же линии. Культуры клеток инкубировали при температуре 37 С. Результаты оценивали через 48 часов от начала инкубации.
Внесение в культуры фибробластов кондиционной среды, полученной при инкубации перитонеальных клеток, вызывало снижение численности одноядерных фибробластов, содержащих микроядра в 7 раз. В отношении многоядерных клеток подобная тенденция не наблюдалась. Показатели митотической активности фибробластов и частоты встречаемости многоядерных клеток не изменялись. Добавление кондиционной среды, полученной в результате инкубации лимфоцитов селезенки, не вызывало достоверного изменения указанных параметров. 
При совместной инкубации фибробластов с перитонеальными клетками и с лимфоцитами селезенки отмечали снижение активности формирования микроядер в одноядерных фибробластах в 6 и 4,5 раза, соответственно. Аналогичный показатель для многоядерных фибробластов в группе культур инкубируемых совместно с лимфоцитами селезенки уменьшался в 1,9 раза. Инкубация фибробластов совместно с перитонеальными клетками не вызывала достоверного изменения частоты встречаемости многоядерных фибробластов, содержащих микроядра.
Активность митотического процесса в группе культур фибробластов, инкубируемых совместно с перитонеальными клетками и с лимфоцитами селезенки, возрастала относительно контрольных значений в 2 и в 1,7 раза, соответственно. Достоверных изменений численности многоядерных фибробластов в зависимости от условий инкубации не наблюдали.
Таким образом, результаты исследования свидетельствуют о значительном снижении частоты встречаемости микроядер в фибробластах, вероятно в ответ на действие регуляторных факторов, синтезируемых иммунокомпетентными клетками. Кроме того, нельзя исключить эффекта прямого (контактного) межклеточного взаимодействия, обуславливающего включение ряда регуляторных механизмов, направленных на оптимизацию функционирования фибробластов. Логично предположить, что повышение митотической активности фибробластов было связано с влиянием перитонеальных клеток и лимфоцитов селезенки.
Полученная информация может быть использована при дальнейшем усовершенствовании методов совместного культивирования клеток соединительной ткани и иммунокомпетентных клеток, что позволит более эффективно решать ряд прикладных и теоретических задач.
Список литературы:
1. Лурия Е.А. Кроветворная и лимфоидная ткань в культурах // Медицина – Москва, 1972. – 176 с.
2. Kovanen P.T. Mast cell granule-mediated uptake of low density lipoproteins by macrophages: a novel carrier mechanism leading to the formation of foam cells // Ann. Med. – 1991. – № 5. – P. 551–559.
3. Ma H., Kovanen P.T. IgE-dependent generation of foam cells: an immune mechanism involving degranulation of sensitized mast cells with resultant uptake of LDL by macrophages // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. – 1995. – № 6. – P. 811–819.
Ильин Д.А.
Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск

Получение информации, необходимой для решения некоторых задач в биологии и медицине связано с определением особенностей межклеточных взаимодействий [2; 3]. Многие аспекты взаимоотношений иммунокомпетентных клеток с клетками соединительной ткани подробно изучены in vitro [1].
Однако вопросы, касающиеся формообразования и функционирования фибробластов в смешанных клеточных культурах, недостаточно освещены в современной литературе. Изучение этих процессов необходимо для разработки методов коррекции заболеваний соединительной ткани.
Целью исследования являлось определение особенностей формообразования и функционирования фибробластов в смешанных клеточных культурах. Задачи исследования состояли в определении митотической активности клеток, численности многоядерных фибробластов и частоты встречаемости микроядер.
Концентрация посадки клеток в контрольных культурах составляла 100 тыс. фибробластов мыши в 1 мл взвеси. Аналогичным образом формировали и экспериментальные группы, с той разницей, что через 24 часа после посадки клеток дополнительно вносили по 0,3 мл взвеси лимфоцитов селезенки, или по 0,3 мл взвеси перитонеальных клеток, полученных от мышей линии BALB/c. Либо в указанном объеме добавляли кондиционную среду, полученную в результате инкубации (в течение 24 часов) лимфоцитов селезенки или перитонеальных клеток, выделенных от животных этой же линии. Культуры клеток инкубировали при температуре 37 С. Результаты оценивали через 48 часов от начала инкубации.
Внесение в культуры фибробластов кондиционной среды, полученной при инкубации перитонеальных клеток, вызывало снижение численности одноядерных фибробластов, содержащих микроядра в 7 раз. В отношении многоядерных клеток подобная тенденция не наблюдалась. Показатели митотической активности фибробластов и частоты встречаемости многоядерных клеток не изменялись. Добавление кондиционной среды, полученной в результате инкубации лимфоцитов селезенки, не вызывало достоверного изменения указанных параметров.  
При совместной инкубации фибробластов с перитонеальными клетками и с лимфоцитами селезенки отмечали снижение активности формирования микроядер в одноядерных фибробластах в 6 и 4,5 раза, соответственно. Аналогичный показатель для многоядерных фибробластов в группе культур инкубируемых совместно с лимфоцитами селезенки уменьшался в 1,9 раза. Инкубация фибробластов совместно с перитонеальными клетками не вызывала достоверного изменения частоты встречаемости многоядерных фибробластов, содержащих микроядра.
Активность митотического процесса в группе культур фибробластов, инкубируемых совместно с перитонеальными клетками и с лимфоцитами селезенки, возрастала относительно контрольных значений в 2 и в 1,7 раза, соответственно. Достоверных изменений численности многоядерных фибробластов в зависимости от условий инкубации не наблюдали.
Таким образом, результаты исследования свидетельствуют о значительном снижении частоты встречаемости микроядер в фибробластах, вероятно в ответ на действие регуляторных факторов, синтезируемых иммунокомпетентными клетками. Кроме того, нельзя исключить эффекта прямого (контактного) межклеточного взаимодействия, обуславливающего включение ряда регуляторных механизмов, направленных на оптимизацию функционирования фибробластов. Логично предположить, что повышение митотической активности фибробластов было связано с влиянием перитонеальных клеток и лимфоцитов селезенки.
Полученная информация может быть использована при дальнейшем усовершенствовании методов совместного культивирования клеток соединительной ткани и иммунокомпетентных клеток, что позволит более эффективно решать ряд прикладных и теоретических задач.

Список литературы:
1. Лурия Е.А. Кроветворная и лимфоидная ткань в культурах // Медицина – Москва, 1972. – 176 с.
2. Kovanen P.T. Mast cell granule-mediated uptake of low density lipoproteins by macrophages: a novel carrier mechanism leading to the formation of foam cells // Ann. Med. – 1991. – № 5. – P. 551–559.
3. Ma H., Kovanen P.T. IgE-dependent generation of foam cells: an immune mechanism involving degranulation of sensitized mast cells with resultant uptake of LDL by macrophages // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. – 1995. – № 6. – P. 811–819.