Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра патологической физиологии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 66-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2007 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
Скачать сборник целиком (формат .PDF, 1,5 мб)
В структуре онкологической заболеваемости и смертности рак легкого в России занимает лидирующие позиции, среди мужчин он находится на первом месте.
Рак легкого характеризуется широким разнообразием фенотипических проявлений и факторов риска, одним из которых является генетическая предрасположенность [1]. В многочисленных исследованиях показано, что чувствительность к раку легкого может быть связана с индивидуальной вариабельностью в процессах метаболической детоксикации экзо- и эндогенных канцерогенов, осуществляемой в организме ферментами биотрансформации ксенобиотиков [4]. Особый интерес вызывают полиморфные варианты генов II фазы этой системы – глутатион-S-трансфераз ?1 и ?1(GSTM1 и GSTT1). Существуют нулевые аллели (генотип 0/0), в которых протяженные делеции приводят к полному отсутствию белкового продукта, участвующего во взаимодействии организма с неблагоприятными факторами внешней среды [1]. Генотип 0/0 широко распространен в популяции человека, при этом литературные сведения об ассоциации “нулевых” генотипов генов GSTM1 и GSTT1 с риском возникновения рака легкого и факторах, его модулирующих, противоречивы, что определяет актуальность подобных исследований в различных популяциях [1, 2, 3].
Цель исследования: провести сравнительный анализ частоты встречаемости генотипов GSTT1 и GSTM1 у больных плоскоклеточным раком легкого и здоровых доноров.
Материал и методы. Проведено обследование 50 больных раком легкого, которые находились на лечении в клинике НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН и Областном онкологическом диспансере г. Томска. Использованы 50 образцов периферической крови здоровых людей – 16 (32%) мужчин, 34 (68%) женщин в возрасте от 22 до 77 лет (средний возраст 43 года), которые составили контрольную группу, и 50 образцов крови больных плоскоклеточным раком легкого – 46 (92%) мужчин и 4 (8%) женщин в возрасте от 42 до 70 лет (средний возраст 57 лет). Диагноз и гистологическая форма рака легкого были подтверждены морфологически, эндоскопически, рентгенологически. Весь обследуемый материал был классифицирован по международной классификации (TNM). У больных преобладала 3 – 4 стадия рака 84%(42).
Кровь на исследование у пациентов забирали из локтевой вены утром натощак. Для выделения ДНК из лейкоцитов венозной крови был использован метод осаждения ДНК на сорбенте. Исследование делеционного полиморфизма генов GSTM1 и GSTT1 проводили методом мультиплексной ПЦР. Продукты амплификации фракционировали в 3%-ном агарозном геле с бромистым этидием в течение 30 мин при напряжении 130 В и визуализировали в УФ-свете. Гомозиготность по нулевым аллелям (0/0) генов GSTT1 и GSTM1 определяли по отсутствию на электрофореграммах фрагментов размером 131 и 114 п.н. соответственно.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием стандартных алгоритмов биометрии, в том числе сравнение частот генотипов в группах больных и здоровых лиц с помощью критерия хи-квадрат Пирсона. Относительный риск (OR – odd ratio, отношение шансов) развития заболевания при определенном генотипе рассчитывался по стандартной формуле OR=a/b*d/c, где a и b – количество человек в контрольной группе, имеющих и не имеющих мутантный генотип, d и с – количество человек в контрольной группе, имеющих и не имеющих мутантный генотип. OR указан с 95%-ным доверительным интервалом.
Результаты. Проведено исследование роли нулевых аллелей глутатионтрансфераз GSTT1 и GSTM1 у больных плоскоклеточным раком легкого. Показано, что у больных, имеющих плоскоклеточную форму рака легкого, генотип GSTT1 0/0 встречается в 2,7 раза чаще, чем в группе контроля (в 54 и 20%, соответственно) (?2=10,98; Р=0,0009). Относительный риск развития плоскоклеточного рака легкого у здоровых носителей данного генотипа повышен в 4,7 раза (OR=4,7; CI 95%: 1,78-12,56). Для GSTM1-гена значимых различий в распределении частот генотипов для данной гистологической формы рака легкого не выявлено.
Таким образом, в результате исследования делеционного полиморфизма генов II фазы биотрасформации ксенобиотиков GSTM1 и GSTT1 выявлено, что полиморфный генотип GSTT1 может иметь высокую рисковую значимость для формирования плоскоклеточного рака легкого.
