Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 64-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2005 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.

Скачать сборник целиком (1 мб)

В связи с неуклонным ростом заболеваемости бронхиальной астмой (БА) в последнее десятилетие актуальна разработка мероприятий первичной профилактики данного заболевания [1,2]. Так, больные с атопическим дерматитом (АД) представляют собой группу повышенного риска (он составляет 20-30%) развития БА. Таким образом, требуется поиск дополнительных биологических маркеров у пациентов с АД, в том числе особенностей генетических участков, кодирующих белки иммунологических агентов атопического воспаления. Результаты поисков позволят более обоснованно внедрять программу первичной профилактики [3]. Ключевым маркером атопического воспаления при БА является IL5 [5]. Точная локализация гена IL5 установлена в 1987г. , а в 1998г. был обнаружен полиморфизм – 703С/Т , оказывающий влияние на его экспрессию [4].

Цель исследования: установление роли полиморфизма - 703С/Т гена IL5 как биологического маркера БА у детей с АД.

Программа осуществлялась на базе областного детского центра клинической иммунологии и аллергологии (Областная детская больница, г. Томск).

Под наблюдением находились следующие группы:

- группа 1: больные АД в возрасте 1 – 16 лет (n = 54, средний возраст 9,4±0,28 лет);

- группа 2: больные с сочетанной патологией (АД и БА) в возрасте 1 – 16 лет (n = 68, средний  возраст 9,9±0,57 лет);

- группа 3: контрольная – здоровые дети в возрасте 1 – 16 лет (n = 147, средний возраст 7,61±1,23).

Группы 1 и 2 были сформированы для изучения распределения генетических предикторов БА у пациентов с изолированным АД и больных с сочетанной патологией (АД и БА).

Молекулярно-генетический метод анализа включал исследования полиморфизма - 703С/Т гена IL5. Выделение ДНК осуществляли по стандартной неэнзиматической методике из цельной венозной крови. Типирование полиморфизма проводили с помощью рестрикционного анализа ПЦР – продуктов, содержащих, при наличии аллеля С, сайт узнавания для эндонуклеазы AlwN 1 (New England Biolabs, США). Генотипирование происходило посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР), с использованием структуры праймеров и параметров температурных циклов. Продукты рестрикции фракционировали в 3% агарозном геле при напряжении 130 В в течение 45 минут. Фрагменты ДНК окрашивали бромистым этидием и визуализировали в ультрафиолетовом свете с применением компьютерной видеосъемки на приборе «UV-VIS Imager-11».

Для изучения вклада полиморфизма - 703С/Т гена IL5 в формирование БА оценивали распределение генотипов в выборках больных изолированным АД, у пациентов с БА и АД и в группе здоровых детей (табл.). Обнаружено преобладание гомозигот – 703СС в группе больных АД и БА в сравнении с контролем. Различий в распространенности генотипов между контрольной группой и пациентов с АД не получено.

Анализ частот встречаемости аллелей в изучаемых группах позволил выявить преобладание носителей аллеля – 703С среди пациентов, страдающих БА и АД, в сравнении со здоровыми лицами. Частоты аллелей в выборке больных АД практически не отличалось от таковых у здоровых лиц.

Таким образом, носительство аллеля – 703С гена IL5 является фактором риска формирования БА, но не АД. Этот генетический фактор можно рассматривать как дополнительный биологический маркер развития БА у пациентов с аллергическим поражением кожи.

Список литературы:

1. Национальная программа «Бронхиальная астма у детей. Диагностика, лечение и профилактика». - М., 2004.

2. Смоленов, И. В. Первичная профилактика бронхиальной астмы у детей /И. В. Смоленов, Н. Г. Машукова //Консилиум-медикум .- 2001.

3. Prevention of Allergy and Asthma / Interim report. ACI International.- 2001. - 12/6.

4. Rioux J. D., Stjne V. A., Daly V. et al. Familial eosinophilia maps to the cytokine gene cluster on human chromosomal region 5q31-q33 // Am. J. Hum. Genet. 1998. – V. 63. P. 1086-1094.

5. Огородова, Л. М. Роль интерлейкина – 5 в регуляции воспаления у больных бронхиальной астмой /Л. М. Огородова, О. С. Кобякова , В. П. Пузырев //Аллергология .- 2000. - №5. - С. 32-34