Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра патофизиологии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.
Актуальность: решающий момент специфического иммунного ответа при туберкулезной инфекции – ответ Т-клеток на распознавание антигена [1]. На данном этапе определяется форма иммунного ответа: с преобладанием антител или клеточных реакций, что зависит от множества факторов, в том числе и от цитокинового фона микроокружения. Показано, что дифференцировка и пролиферация Т-хелперных лимфоцитов типа 1 (Th1), необходимых для эффективного иммунного ответа против Mycobacterium tuberculosis во многом определяется секрецией интерлейкина (IL)-12 макрофагами и дендритными клетками, важными эффекта-ми которого считают индукцию секреции IL-2, основного регуляторного цитокина Th1-клеток, а также стимуляцию продукции лимфоцитарного интерферона (IFN)-γ, способст-вующего дифференцировке моноцитов в эффекторные клетки, усиление фагоцитоза и бакте-рицидной активности фагоцитов [2, 3]. В настоящее время высказывается предположение о связи генетически детерминированной гипер- или гипопродукции цитокинов с качеством иммунного ответа на микобактерии туберкулеза [4].
Цель: выявить механизмы нарушений в IL-12-зависимом пути активации Т-лимфоцитов по характеру распределения аллельных вариантов промоторных регионов T-330G гена IL2, +874A/T гена IFNγ и А-1188С гена IL12B среди больных инфильтративным туберкулезом легких.
Материалы и методы: в программу обследования вошли 78 пациентов (46 мужчин и 32 женщины) с впервые выявленным ИТЛ в возрасте от 19 до 55 лет. Обследование пациентов проводили до начала специфической противотуберкулезной химиотерапии. Контрольную группу составили 82 здоровых донора с сопоставимыми характеристиками по полу и возрас-ту. Материалом исследования служила периферическая кровь, а также выделенные из нее с помощью градиентного центрифугирования мононуклеарные лейкоциты. Культивирование клеток проводили в полной питательной среде. Секрецию IL-12, IL-2 и IFNγ in vitro оценивали методом твердофазного иммуноферментного анализа. Оценку аллельного полиморфизма промоторных регионов T-330G гена IL2, +874A/T гена IFNγ и А-1188С гена IL12B проводили с использованием полимеразной цепной реакции в сочетании с рестрикционным анализом. Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием стандартных алгоритмов биометрии. Обработка результатов генетических исследований осуществлялась с использованием критерия отношения шансов OR с расчетом для него 95% доверительного интервала.
Результаты: продукция цитокинов мононуклеарными клетками представлена в таблице 1.
|
Таблица 1.
Продукция иммуноцитокинов мононуклеарными клетками (пг/мл) у здоровых доноров и у больных ИТЛ (Me (Q25% - Q75%).
|
| Регистрируемый
показатель |
Здоровые доноры |
Больные ИТЛ |
| IL-12 |
73,9 (64,5-103,0) |
34,0 (17,5–56,9) p<0,05 |
| IL-2 |
25,0 (19,9–32,5) |
19,4 (14,6-25,5) p<0,05 |
| IFNγ |
592,0 (294,2-527,4) |
689,4 (487,4-725,1) p<0,05 |
Примечание: p – достоверность различий показателей по сравнению со значениями у здоровых доноров.
Уровень базальной секреции мононуклеарными клетками IL-12 и IL-2 у больных с ИТЛ был ниже, по сравнению со здоровыми донорами в 2,2 и 1,3 раза соответственно. Продук-ция IFNγ у больных с ИТЛ, наоборот, оказалась выше, чем у здоровых в 1,7 раза. В ходе иммуногенетического исследования было выявлено, что среди больных туберкулезом ста-тистически значимо чаще встречались гетерозиготы с генотипом АС (50%) промоторного региона А-1188С гена IL12B, с этим же генотипом был связан и риск развития туберкулез-ного процесса (OR=1,65, р=0,012). Протективным эффектом обладал генотип СС (OR=0,5) полиморфного участка A-1188C гена IL12В. Проведенные нами исследования ассоцииро-ванности генотипа с уровнем продукции IL-12 показали, что генотип СС гена IL12B чаще выявляется среди индивидов с высоким уровнем продукции цитокина, однако статистиче-ски значимой зависимости продукции этого цитокина от генотипа промоторного региона А-1188С гена IL12B обнаружено не было. Анализ полиморфизма T-330G промоторного ре-гиона гена IL2 показал, что среди больных туберкулезом легких гетерозиготный вариант TG встречается в 44,4% (OR=1,79, р=0,044), что достоверно выше, чем среди здоровых до-норов (34%). Среди больных ИТЛ также преобладали индивиды с генотипом АТ (59,2%) промоторного региона +874A/T гена IFNγ. Была показана положительная ассоциация гено-типов АА (OR=1,66, р=0,022) и АТ (OR=1,60, р=0,017), а также аллеля А (OR=1,77, р=0,02) с ИТЛ.
Выводы: результаты проведенного исследования позволяют заключить, что снижение продукции IL-12 при туберкулезе легких ассоциировано с генотипом АС промоторного региона A-1188C гена IL12В, снижение продукции IL-2 -с генотипом TG промоторного региона T-330G гена IL2. Увеличение секреции IFNγ ассоциировано с генотипами АА и АТ промоторного региона +874A/T гена IFNγ.
Список литературы:
1. Кетлинский, С. А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета / С. А. Кетлинский // Иммунология. – 2002. – № 2. – C. 77-79.
2. Ивашкин, В. Т. Основные понятия и положения фундаментальной иммунологии / В. Т. Ивашкин // РЖГГК. – 2008. – №4. – С. 4-13
3. Симбирцев, А. С., Роль цитокинов в регуляции физиологических функций иммунной системы / А. С. Симбирцев // Физиология и патология иммунной системы. – 2004. – №10. – С. 3-10
4. Роль полиморфизма генов цитокинов в регуляции воспаления и иммунитета / А. С. Симбирцев, А. Ю. Громова, А. В. Рыдловская // Медицинский академический журнал. – 2006. – № 1. – С. 144-149.
|
