ГОУ ВПО Башкирский государственный медицинский университет, Уфа;
Инфекционная клиническая больница № 4, Уфа
Эта статья опубликована в сборнике по материалам российской научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии», посвященной 85-летию кафедры инфекционных болезней и эпидемиологии Сибирского государственного медицинского университета (ноябрь 2009, г. Томск)
Скачать содержание сборника
Скачать сборник целиком
Важная роль в патогенезе ГЛПС принадлежит иммунопатологическим механизмам. Значительное место в ауторегуляции иммунного ответа и его интеграции с функциями всех систем организма принадлежит цитоки-нам [1]. Зависимость выработки цитокинов от стимулирующих воздействий генетически детерминирована. Определенные мутации в генах цитокинов, изменяя уровень их экспрессии, влияют на продукцию и функ-циональную активность белков цитокиновой сети.
Цель исследования: выявить ассоциацию полиморфных вариантов генов цитокинов (TNFA, IL1В, IL1RN) и индуцибельной синтазы оксида азота (NOS2A) с предрасположенностью к развитию инфекционно-токсического шока (ИТШ), ДВС-синдрома и острой почечной недостаточности (ОПН) при геморрагической лихорадке с почечным синдромом (ГЛПС). Анализ полиморфных ДНК-локусов генов TNFA, IL1В, IL1RN, NOS2A проводили методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК (ПЦР) у 335 больных с серологиче-ски подтверждённым методом РНИФ (МФА) диагнозом ГЛПС, в возрасте от 15 до 65 лет, получивших ста-ционарное лечение в городской клинической инфекционной больнице № 4 г. Уфы.
Наиболее частым осложнением у анализируемых больных был ИТШ – 30 чел. (8,9%). ИТШ, как правило, развивался на 5-6 день болезни, на фоне критического снижения температуры. Факторы, способствующие раз-витию данного осложнения – позднее обращение за медицинской помощью, физическая нагрузка, стресс, употребление алкоголя, посещение бани, неправильная транспортировка. У 17 (5,1%) больных диагностиро-ван ИТШ I ст., у 13 (3,9%) - ИТШ II ст., случаев декомпенсированного шока не было. У всех больных ИТШ купирован, летальные исходы не регистрировались. Симптомы ОПН – это основное проявление ГЛПС. В соответствии с патогенетическим принципом ОПН рассматривалась нами как осложнение ГЛПС в том случае, если степень выраженности данного синдрома становилась чрезмерной (анурия) и компенсаторные возможно-сти организма исчерпывали себя, вследствие чего, такие больные без экстренного гемодиализа могли погиб-нуть от азотемической уремии. ОПН в нашем случае наблюдалась у 20 чел. (5,9%). ДВС-синдром, по данным нашего исследования зарегистрирован, у 15 больных (4,5%), из них: у 9 чел. (2,7%) отмечались повторные носовые кровотечения, для купирования которых проводились передняя и задняя тампонады; у 6 пациентов (1,8%) развились полостные кровотечения (в 4 случаях - желудочно-кишечное, в 2 случаях – маточное), кото-рые купированы консервативными методами лечения в условиях реанимационного отделения.
Оценка распределения частот аллелей и генотипов -308G>A полиморфизма гена TNFA у больных ГЛПС в зависимости от развития осложнений (ИТШ, ОПН, ДВС-синдром) выявила достоверные отличия между группой больных с ИТШ и пациентами без ИТШ (χ2=6,92; P=0,01 и χ2=6,23; P=0,04, соответственно). У инди-видов с ИТШ отмечено увеличение частоты аллеля TNF*A - 33,33% против 19,02% у больных без данного осложнения (P=0,01; OR=2,13; 95%CI 1,15-3,91). Генотип TNF*G/*G у пациентов с ИТШ наблюдался значи-тельно реже - 46,67%, чем у индивидов с неосложненным течением ГЛПС - 67,21% (OR=0,42; 95%CI 0,19-0,96). Анализ –511С>T полиморфизма гена IL1B выявил статистически значимые различия в распределении частот генотипов между группами больных с ИТШ и без ИТШ (χ2=6,05; P=0,04). У больных ГЛПС, осложнен-ной ИТШ, отмечено увеличение частоты генотипа IL1B*C/*T – 76,67%, по сравнению с пациентами без ИТШ - 54,1% (P=0,03; OR=2,78; 95%CI 1,10-7,38). Обнаружены статистически значимые различия в распределении частот комбинаций полиморфных локусов -511С>T и 3953С>T гена IL1B между больными с ДВС-синдромом и пациентами с неосложненным течением ГЛПС (χ2=14,5; P=0,05). Среди больных с ДВС-синдромом частота сочетания генотипов T/T-C/T оказалась значительно выше - 20,0%, чем у лиц без данного осложнения – 3,12% (P=0,009; OR=6,4; CI 95% 1,45-21,3).
-308G>A полиморфизм гена TNFA является функционально значимым, влияющим как на базальную, так и на индуцированную экспрессию гена [9]. Установлено, что аллель TNF*A является более мощным активато-ром транскрипции, чем аллель TNF*G. На линиях В–клеток человека показано, что полиморфизм -308G>A связан с повышенной экспрессией гена TNFА in vitro: присутствие аллеля TNF*А ассоциировало с вдвое по-вышенной продукцией цитокина по сравнению с аллелем TNFА*G [6]. Биаллельный полиморфизм гена IL1B в положении -511С>Т, точнее, аллельный вариант -511Т этого гена характеризуется повышенной продукцией ИЛ-1β [5].
Значительный подъем уровней провоспалительных цитокинов в разгар болезни выполняет протективную функцию с реализацией всего комплекса воспалительных и иммунных реакций. Однако чрезмерное повыше-ние уровня синтеза TNF-α, IL-1β, вызывающих запредельную активацию нейроэндокринной системы, избы-точную продукцию оксида азота, повышение проницаемости сосудов, плазморрею, усиление коагуляции, спо-собно оказывать и повреждающее действие с развитием клиники инфекционно-токсического шока [2]. В связи с чем можно предположить, что постоянная выработка достаточно высоких концентраций TNF-α у носителей мутантного аллеля TNF*A -308G>A полиморфизма гена TNFA и IL1β у гетерозигот по -511С>Т полимор-физму гена IL1B, неблагоприятно сказывается на течении ГЛПС.
Аллель 3953Т гена IL1B, также как и аллель -511Т, ассоциирован с высокой продукцией цитокина IL-1β [8] . Сочетание аллелей 3953Т и -511Т, по-видимому, обладает взаимоусиливающим эффектом: комбинация T/T-C/T полиморфных локусов гена IL1B (-511С>Т, 3953С>Т) достоверно чаще определялась у больных ГЛПС, осложненой ДВС-синдромом.
Распределение частот генотипов STR-полиморфизма гена NOS2A у больных с осложненными и неослож-ненными формами ГЛПС не выявило статистически значимых различий в сравниваемых группах (P>0,05), Однако, у больных ГЛПС с ИТШ отмечалось увеличение частоты генотипа NOS2A *14/*16 - 10,0%, по срав-нению с пациентами без шока - 1,97% (Р=0,04; OR=4,01; 95%CI 1,49-10,85). У больных с ОПН преобладал генотип NOS2A *11/*14 - 20% против 3,5% среди индивидов с неосложненным течением ГЛПС (P=0,005; OR=5,17; 95%CI 1,97-13,57). Предполагается, что увеличение числа (ССТТТ)n повторов приводит к повыше-нию транскрипционной активности гена NOS2A [7]. Повышенный синтез макрофагальными клетками оксида азота, в результате активации NOS2 при ГЛПС направлен на ограничение распространения хантавируса. В значительных концентрациях оксид азота способен выполнять не только протективную функцию, но и оказы-вать цитотоксический эффект на собственные клетки организма, опосредованный образованием пероксинит-рита, инициируя апоптоз или некроз клеток [3]. Избыточная секреция оксида азота приводит к тяжелой гипо-тензии, нарушению микроциркуляции, гипоксии и вызванным ею метаболическим нарушениям, с последую-щим некрозом клеток коркового слоя почек, что может послужить причиной развития острой почечной не-достаточности [4].
Таким образом, по данным нашего исследования, маркерами повышенного риска развития ИТШ у боль-ных ГЛПС являются: аллель TNF*A-308G>A полиморфизма гена TNFA, генотип IL1В*C/*T (IL1В*-511C>T), комбинация генотипов C/T-I/I (IL1В*-511C>T - IL1RN*VNTR); ОПН - аллель NOS2A*11 STR-полиморфизма гена NOS2A; ДВС-синдрома - сочетание генотипов T/T-C/T полиморфных локусов -511С>Т, 3953С>Т гена IL1B.
Список литературы:
- Иванис В.А., Маркелова Е.В., Скляр Л.Ф. и др. Значение цитокинового статуса в изучении иммунопато-генеза инфекционных болезней // Pacific. Medical Journal. – 2004. – № 2. – P. 36-39.
- Кашкин К.П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность //Клин. лаб. диагностика – 1998. – № 11. – С. 21-32.
- Маеда Х., Акаике Т. Оксид азота и кислородные радикалы при инфекции, воспалении и раке //Биохимия. – 1998. – Т. 63, № 7. – С. 1007-1019.
- Марков Х.М. Окись азота в физиологии и патологии почек //Вестник РАМН.–1996.–№ 7.–С. 73-78.
- Laurincova B. Interleukin-1 family: from genes to human disease //Acta Univ. Palacki. Olomuc. – 2000. – V. 143.– P. 19-29.
- Mäkelä S., Hurme M., Ala Houhala I. et al. Polymorphism of cytokine genes in hospitalized patients with Puu-mala hantavirus infection. //Nefrol. Dial. Transplant. – 2001. – V. 16. – P. 1368-1373.
- Warpeha K. M., Xu W., Liu L., Charles I. G. et al. Genotyping and functional analysis of the polymorphic (CCTTT)n locus of NOS2A in diabetic retinopathy //FASEB. J. – 1999. – V. 13. – P. 1825–1832.
- Wilkinson R. J., Patel P., Llewelyn M. et al. Influence of polymorphism in the genes for the interleukin (IL)-1 receptor antagonist and IL-1β on tuberculosis //J. Exp. Med. - 1999. – V. 189. – P. 1863-1873.
- Wilson A.G., Symons J.A., McDowell T.L. et al. Effects of a polymorphism in the human tumor necrosis factor alpha promoter on transcriptional activation//Proc. Nat. Acad. Sci. USA.–1997.– V.94 –P.3195-3199.
|
