Лаборатория нейроморфологии с группой электронной микроскопии отдела сердечно-сосудистой патологии института клинической кардиологии им. А.Л. Мясникова и группа нейробиологии института экспериментальной кардиологии,  ФГУ Российского кардиологического научно-производственного комплекса, Москва.

    Эндотелий эндокарда сердца лабораторных животных интенсивно изучается в последние несколько десятилетий с использованием электронной микроскопии [7-10].  Ушки сердца до последнего времени остаются загадочной частью этого органа, чья структура и функциональное назначение изучены недостаточно, особенно у мелких животных, часто используемых в модельных исследованиях [8, 12]. Так как мы не обнаружили в доступной нам литературе сведений об ультраструктуре эндокарда ушек мышей линии Balb/c, то целью данной работы было проведение сравнительного электронно-микроскопического исследования эндокарда обоих ушек сердца интактных половозрелых мышей этой линии.
Материал и методы исследования.
    Изучали правое и левое ушки сердец интактных половозрелых мышей-самцов линии Balb/c с весом тела от 30 до 35 граммов, полученных из вивария кардиоцентра. Животных усыпляли нембуталом и промывали сердца от крови 5 минут согласно описанию, сделанному в наших более ранних работах [1]. Затем их фиксировали перфузией 2,5% глютаровым альдегидом на 0,1 М фосфатном буфере (рН=7,4) при 4о С еще 5 минут и оставляли в охлажденном фиксаторе на 2 часа. После промывки буфером дофиксировали ушки 1% четырехокисью осмия, осуществляли проводку в спиртах возрастающей концентрации, в окиси пропилена и заключали в аралдит [4]. Вес сердец после перфузии был от 240 до 280 мг. Поскольку стенки ушек были достаточно тонкими, то их проводили по спиртам и другим обезвоживающим жидкостям и заключали в эпоксидную смолу как целое без предварительной резки на мелкие кусочки. Гистологию ушек изучали на полутонких срезах (0,5-1 мкм), полученных с помощью микротома Histo Range (LKB, Швеция) и окрашенных толуидиновым синим как в предыдущей публикации [2]. Ультратонкие срезы получали на ультратомах фирмы LKB (Швеция) и окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца [3]. Электронную микроскопию ультратонких срезов осуществляли на электронном микроскопе JEM-100 C при 80 кв при исходных увеличениях  от 5 до 50 тысяч. 
Результаты и обсуждение.
    Анализ полутонких срезов показал, что оба ушка сердца являлись тонкостенными образованиями, покрытыми снаружи однослойным эпителием (мезотелием), а изнутри однослойным эндотелием эндокарда. Между эпикардом и эндокардом располагался компактный или трабекулярный миокард, содержащий большое количество рабочих (сократительных) миоцитов, элементы микрососудистого русла, нервные проводники и соединительнотканую основу. Стенка капилляров в нем была образована 1 - 3 эндотелиоцитами, часто с разной осмиофилией их цитоплазмы, покрытыми снаружи базальной мембраной, в листках которой были видны отростки перицитов более темной окраски, чем эндотелиоциты капилляров. В эндотелиоцитах некоторых капилляров выявлялись пиноцитозные пузырьки и выросты в просвет сосудов. Эндокард ушек, как в трабекулярной, так и в компактной зонах органа был представлен эндотелием и подэндотелиальными структурами схожими в правом и левом ушках. Эндотелий эндокарда  был образован уплощенными эндотелиоцитами, лежащими на базальной мембране и содержащими округлые ядра с мелкодисперсным содержимым. Тельца Вайбеля-Палада в эндотелиоцитах ушек интактных мышей отсутствовали, что роднит их с эндотелиоцитами капилляров миокарда ушек у этих животных. Под эндотелием в матриксе соединительной ткани располагались эластические и коллагеновые волокна, а также клетки соединительной ткани, в основном макрофаги, с ячеистой структурой и лизосомами. Кроме того, встречались клетки фиброцитарного ряда. В целом соединительная ткань эндокарда ушек сердца интактных мышей линии Balb/c демонстрировала те же структурные компоненты, что и рабочий миокард правого предсердия и межпредсердной перегородки у интактной крысы [1, 5, 6]. В соединительной ткани между эндотелием эндокарда и миокардом часто проходили немиелинизированные нервные проводники и их эфферентные терминали, содержащие разные типы синаптических пузырьков (мелкие гранулярные и агранулярные, а также  крупные гранулярные). Характер проводников и их эфферентных терминалей напоминал нервные волокна в других отделах сердца у интактных крыс, собак и кроликов [1, 3, 4]. Показано, что в трабекулярной части ушек имеются глубокие лакуны между мышечными балками и часть из них, при промывке перфузией сохраняла форменные элементы крови прилежащие к эндотелию эндокарда.
    Переходя к обсуждению сделанных находок, отметим, что в целом ультраструктура эндокарда ушек интактных мышей линии Balb/c напоминает таковую у интактных животных других видов [7-12] и в контроле у человека [2], особенно в отношении строения эндотелия и подэндотелиального нервного аппарата [1, 3, 4, 6]. Гетерогенность структуры эндотелиоцитов для эндокарда в отличие от сосудов миокарда у интактных животных и в эксперименте [7, 10] отсутствовала. Наименее изученным в настоящее время является эндотелий эндокарда в плане понимания его происхождения [11], функционирования [7, 9], его взаимодействия с эндотелием микрососудистого русла сердца и его роли в модуляции сокращений миокарда [8, 12].  Эти вопросы требуют проведения дальнейших исследований у линейных животных, в том числе и в экспериментальных условиях с применением количественных методов ультраструктурного анализа [4-6].

 

 

Литература
1. Павлович Е.Р. “Иннервация атриовентрикулярной части межпредсердной перегородки у крысы”, Архив анатомии, гистологии и эмбриологии, 1984, т.86, №3, с.40-46.
2. Павлович Е.Р. “Ультраструктура синусного узла сердца человека при алкогольной кардиомиопатии на фоне острого алкогольного отравления и без него”, Архив патологии, 1988, т.50, №11, с.28-35.
 3. Павлович Е.Р. “Иннервация проводящих и рабочих миоцитов в синоаурикулярной области сердца собаки. (Количественное исследование)”, Морфология, 1994, т.106, №4-6, с.109-117.
4. Павлович Е.Р. “Ультраструктура миокарда сердца кролика в поздние сроки иммобилизационного стресса”, Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2001, т.132, №7, с. 99-102.
 5. Червова И.А., Павлович Е.Р. “Морфометрический анализ мышечно-сосудисто-соединительнотканых взаимоотношений в проводящей системе сердца крысы”, в книге “Гисто-гематические барьеры и нейро-гуморальная регуляция”, Москва, “Наука”, 1981, с.221-224.
6. Червова И.А., Павлович Е.Р. “Количественные исследования иннервационных взаимоотношений в синоаурикулярной области сердца крысы”, Архив анатомии, гистологии и эмбриологии, 1982, т. 82, №4, с. 45-51.
7. Aird W.C. “Endothelial cell heterogeneity”, Crit. Care Med., 2003, v.31, Supple.4, S.221-230.
8. Andries L.J., Sys S.V., Brutsaert D.L. “Morphoregulatory interactions of endocardial endotelium and materiae in the heart”, Hertz, 1995, v.20, N2, p.135-145.
9. Brutsaert J.E., Andries L.J. “The endocardial endothelium”, Amer. J. Physiol., 1992, v.263, N.4, part 2, p.H985-H1002.
10. Candiollo L. “The fine structure of the endocardial endothelium”, Z. Zellforsch. Mikrosk. Anat., 1963, Bd.61, S.486-492.
11. De Ruiter M.C., Poelmann R.E., Varder Plas de Vries J., Mentink M.M. “The development of the myocardium and endocardium of mouse embryos”, Anat. and Embryol., 1992, v.185, N5, p.461-473.
12. Fort S., Lewis M.J., Shah A.M. “The role of endocardial endothelium in the modulation of myocardial contraction in the isolated whole heart”, Cardioscience, 1993, v.4, N.4, p.217-223.