Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск
Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2006 год, Том 3, выпуск 2), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника
Широкое распространение гранулематозных заболеваний [1] отражает ухудшение современной эпидемиологической обстановки [5; 7; 9] и диктует необходимость изучения механизмов развития патологического процесса с целью создания эффективных методов коррекции. Эффективность лечения больных с гранулематозными заболеваниями во многом определяется адекватностью процесса фиброзирования гранулем. Однако механизм активации нормальной фибропластической регенерации остается до конца не изученным, а традиционные представления о рубцевании ткани как о конечной точке патологического процесса заменяется современной концепцией о потенциально обратимом явлении [11]. Одним из наиболее актуальных вопросов является лечение больных с гранулематозными заболеваниями, имеющими поверхностную локализацию [1; 10]. Для этой цели с успехом применяются различные фотостимуляторы [4; 6]. Предполагают, что возможный механизм влияния света на клетку связан с тем, что фотоны взаимодействуют с акцепторами световой энергии [8], которыми являются ферменты [2; 3]. Известно, что в периоде G1 происходят интенсивные процессы биосинтеза, при которых клеточный метаболизм, контролируется ферментами. Индуцируется образование веществ, подавляющих или стимулирующих начало следующей фазы. Регуляция клеточного цикла осуществляется посредством обратимого фосфорилирования и дефосфорилирования регуляторных белков, которые регулируют вступление клетки в митоз.
Исходя из вышеизложенного, целью нашего исследования было изучение влияния различных цветовых составляющих света видимого диапазона на активность течения процессов пролиферации и дифференцировки фибробластов.
Культуры клеток были разделены на 4 группы. Первая группа - контрольная, культуры клеток которой не подвергались облучению. Три опытные группы были представлены культурами, облучаемыми в течение 24 часов. Каждая группа культур облучалась светом одного из трех спектральных диапазонов видимого света. Световое воздействие начинали через 24 часа, после предварительной инкубации. В качестве источника излучения были выбраны светодиоды, имеющие красный, зеленый и синий цвет свечения. Сила свечения соответствовала 8 кд.
Клетки инкубировали в термостате при температуре 37 С. Препараты фиксировали 50 % раствором этанола и окрашивали азур – эозином. Исходная концентрация посадки составляла 100 тыс. клеток культуры фибробластов, полученных от мышей линии C3H. Подсчитывали численность дифференцированных форм фибробластов и количество клеток в состоянии митоза в 10 полях зрения. Результаты оценивали на 48 и 72 часа инкубации. Контролем служили культуры, инкубируемые в течение 48 часов. Все последующие изменения описаны относительно контроля.
В контрольной группе культур показатель митотической активности на 72 часа инкубации достоверно не отличались от исходного уровня (на 48 часов). В культурах, облученных синим светом, численность клеток в состоянии митоза снижалась в 6,3 раза по сравнению с контрольным значением. Красный и зеленый свет не вызывали достоверного изменения уровня митотической активности фибробластов. Количество дифференцированных форм фибробластов имело тенденцию к возрастанию после индукции, обусловленной действием красного света.
Таким образом, синий свет вызывал снижение митотической активности фибробластов. В то же время свет красного диапазона индуцировал некоторое увеличение количества дифференцированных клеток. Однако при данной силе свечения их численность достоверно не отличалась от контрольного значения. Логично предположить, что при использовании более мощного источника излучения наблюдалось бы активное увеличение численности дифференцированных форм фибробластов. Возникновение отмеченных морфологических изменений, возможно, вызвано влиянием света различных спектральных диапазонов на активность течения ферментативных реакций в клетках, и требует дальнейшего изучения. Данные результаты могут быть применены при разработке моделей воздействия различных спектров видимого света на клетки соединительной ткани в поверхностно расположенных очагах хронического воспаления с целью создания эффективных методов коррекции гранулематозных заболеваний.
Список литературы:
1. Васильев А.В., Гришко А.Н. Аспекты эпидемиологии // Внелёгочный туберкулёз. СПб., 2000. - С.11-33
2. Владимиров Ю.А. Три гипотезы о механизме действия лазерного облучения на клетки и организм человека. В сб. Эфферентная медицина М:ИБМХ РАМН, 1994. - С. 51-67.
3. Горбатенкова Е.А., Владимиров Ю.А., Парамонов Н.В., Азизова О.А. Красный свет гелий-неонового лазера реактивирует супероксиддисмутазу // Бюлл. эксп. биол. мед. - 1989. - Т. 57. - С. 302-305.
4. Кару Т.Й. Фотобиология низкоинтенсивной лазерной терапии // Итоги науки и техники. Физические основы лазерных и пучковых технологий.-1989.- Т.4.- С.44-84.
5. Ковалева С.И. Особенности эпидемиологии туберкулеза в Москве и меры по ее улучшению. // Пробл. туб. – 1994. – № 5. – С. 2–4.
6. Плетнев С.Д. Лазеры в клинической медицине. - М.: Медицина, 1996.-432 с.
7. Рыбка Л.Н., Пунга В.В. Туберкулез у беженцев из дальнего зарубежья // Пробл. туб. – 1996. – № 3. – С. 12–13.
8. Утц С.Р., Волнухин В.А. Низкоинтенсивная лазеротерапия в дерматологии. Саратов. Изд-во Саратовского Ун-та, 1998. - 92 с.
9. Хоменко А. Г. Туберкулез сегодня и завтра – проблемы и пути решения // Пробл.туб. – 1995. – № 1. – С. 4–8.
10. Alcais A., Sanchez F.O., Thuc N.V., Lap V.D., Oberti J., Lagrange P.H., Schurr E., Abel L. Granulomatous reaction to intradermal injection of lepromin (Mitsuda reaction)is linked to the human NRAMP1 gene in Vietnamese leprosy sibships. // J. Infect. Dis. - 2000. - V. 181. - № 1. - P. 302 - 308.
11. Gabbiani G. The cellular derivation and the life span of the myofibroblast // Pathol. Res. Pract. - 1996. - V. 192. - № 7. - P. 708-711.
|