Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра инфекционных болезней и эпидемиологии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.
Актуальность: иксодовый клещевой боррелиоз – инфекционное трансмиссивное природно-очаговое заболевание, имеющее тенденцию к хроническому и рецидивирующему течению, поражающее различные органы и системы. В острый период иксодовый клещевой боррелиоз может протекать в эритемной или безэритемной формах, а также в серопозитивном и серонегативном вариантах. Известно, что десять акроцентрических хромосом человека (акроцентрики D- и G-групп) формируют ядрышко после выхода клетки из митоза. При этом нуклеогенез по существу определяется транскрипционной активностью рибосомных генов, локализованных в спутничных нитях, в так называемых районах ядрышкового организатора акроцентриков. Активные районы ядрышкового организатора могут быть выявлены при световой микроскопии препаратов интерфазных клеток после обработки раствором нитрата серебра. Размер, форма и число ядрышек являются важнейшими показателями уровня пролиферативной активности и функционального состояния клетки. Наиболее часто метод выявления числа аргирофильных районов ядрышкового организатора применяется для оценки пролиферативной активности злокачественных клеток [3]. Вместе с тем, публикаций, посвященных морфометрическому анализу клеток крови при инфекционных заболеваниях крайне мало [1].
Цель: установить особенности реакции бласттрансформации лимфоцитов периферической крови в ответ на стимуляцию фитогемагглютинином у больных с различными клиническими формами острого иксодового клещевого боррелиоза.
Материалы и методы: в качестве материала использовалась венозная кровь 5 больных безэритемной серопозитивной формой, 5 больных эритемной серопозитивной формой и 5 больных эритемной серонегативной формой острого иксодового клещевого боррелиоза. Контрольная группа состояла из 10 здоровых лиц, не подвергавшихся ранее укусам клещей, не болевших иксодовым клещевым боррелиозом и не имевшим в крови специфических антител к антигенам боррелий. Кроме стандартного метода окраски, для морфологической оценки пролиферативного ответа клеток в культуре нами было использовано выявление районов ядрышкового организатора с применением нитрата серебра [2]. Определенная с помощью программы анализа изображений ImageJ суммарная площадь аргирофильных районов ядрышкового организатора в ядре находится в прямой зависимости от транскрипционной активности локализованных в акроцентрических хромосомах генов, кодирующих прерибосомную РНК, и отражает пролиферативную активность клетки.
Результаты: в стимулированных фитогемагглютинином культурах лимфоцитов, полученных от больных острым иксодового клещевого боррелиоза, было установлено достоверное снижение процента бластных клеток и площади аргирофильных районов ядрышкового организатора, по сравнению с соответствующими культурами здоровых людей (P<0,01). Показатели реакции бласттрансформации лимфоцитов, площади аргирофильных районов ядрышкового организатора у больных с эритемной серонегативной формой иксодового клещевого боррелиоза были существенно выше (P<0,05), по сравнению с группами больных с эритемной и безэритемной серопозитивными формами заболевания. Вывод. Таким образом, использование окраски районов ядрышкового организатора может быть применено для оценки реакции бласттрансформации лимфоцитов. Результаты, полученные при стимуляции культур фитогемагглютинином могут свидетельствовать о подавлении Т-клеточного иммунного ответа, который наиболее выражен у больных с эритемной серонегативной формой в острый период иксодового клещевого боррелиоза.
Список литературы:
1. Шилов, Б. В. Компьютерный морфометрический анализ структуры ядер лимфоцитов периферической крови человека в норме и при Эпштейн-Барр вирусной инфекции в условиях in vivo и in vitro : автореф. дис. … канд. мед. наук / Б. В. Шилов – Томск, 2001. – 16 с.
2. Howell, W. M. Controlled silver staining of nucleolus organizer regions with a protective colloidal developer: a one step method / W. M. Howell, D. A. Black // Experimentia. – 1980. – Vol. 36. – P. 101–105.
3. Yekeler, H. Nuclear organizer regions in lymphomas a quantitative study / H. Yekeler, M. R. Ozercan // Pathologica. – 1993. – Vol. 85. – № 5. – P. 353–360.
|