Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН  (г.Новосибирск)

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2006 год, Том 3, выпуск 1), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Значительный интерес к изучению роли клеток соединительной ткани в воспалительных процессах объясняется активным распростра¬не¬нием гранулематозных болезней [2; 3]. Актуальность проведения соответствующих прикладных [3] и теоретических [4; 5; 6] исследований определяется трудностями коррекции и неоднозначным прогнозом в отношении восстановления трудоспо¬собности и ка¬чества жизни пациентов с хроническими воспалительными заболеваниями [2; 3]. Поскольку лаброциты содержат био¬логически активные вещества, участвующие в различных патологических процессах воспалительного характера, то они, несомненно, иг¬рают роль гомеостатических регуляторов последующих провоспалительных клеточных реакций [1].
Целью работы являлось изучение состояния лаброцитов в культурах перитониальных клеток, выделенных из брюшной полости мышей линий C57BL/6 и CBA. В зависимости от генетической принадлежности и концентрации посадки клеток были сформированы 4 групп культур. Концентрация посадки в контрольных группах составляла 1000 тыс. перитониальных клеток в 1 мл взвеси, а в экспериментальных группах она составляла 500 тыс. клеток в 1 мл, выделенных от мышей линий C57BL/6 и CBA.
Подсчет лаброцитов проводили дифференцированно для дегранулирующих и не дегранулирующих клеток. Результаты оценивали на 2, 24, 48 и 72 часа инкубации. Контролем служили культуры, инкубируемые в течение 2 часов. Все последующие изменения описаны относительно контроля.
В ходе проведения эксперимента были выявлены закономерности в изменении численности лаброцитов в зависимости от сроков экспозиции культур, концентрации посадки клеток и их генетической принадлежности. В культурах перитонеальных клеток с плотностью посадки 1000 тыс. единиц в 1 мл наблюдали, что лаброцитов принадлежавших животным линии СВА содержалось в 2,5 и в 2,1 раза больше, соответственно на 2 и на 24 часа инкубации, чем в культурах, полученных от животных линии C57BL/6.
При увеличении сроков экспозиции отмечали нивелирование концентрации тучных клеток. Межгрупповые различия в количестве дегранулирующих лаброцитов отсутствовали, а максимальная активность процесса была зафиксирована на 48 часов инкубации культур в обеих группах.
При концентрации посадки 500 тыс. клеток в 1 мл в целом сохранялась ситуация аналогичная приведенной выше, с той разницей, что на ранних сроках инкубации культур перитонеальных клеток лаброциты практически отсутствовали. Их появление наблюдали начиная с 48 часов экспозиции. Было отмечено, что концентрация этих клеток в культурах группы СВА была выше, чем в культурах группы C57BL/6 в 1,5 и в 2,5 раза, соответственно на 48 и 72 часа экспозиции. Отсутствовали достоверные межгрупповые отличия в численности дегранулирующих тучных клеток на все сроки проведения эксперимента, поскольку дегрануляции подвергались только единичные лаброциты.
В культурах с высокой концентрацией посадки лаброциты присутствовали в препаратах уже на ранние сроки инкубации, чего не наблюдали в группах с пониженной концентрацией клеток. Это явление можно объяснить тем, что при низкой концентрации посадки клеток, последние не успевают в достаточной мере продуцировать матрикс, который способствует прикреплению лаброцитов. В процессе промывки смываются слабо прикрепленные тяжелые тучные клетки, контактирующие с подложкой незначительной частью площади мембраны. Поскольку наличие белкового матрикса во многом обеспечивает адекватное прикрепление, то вполне объяснимо и большее содержание лаброцитов на поздних сроках инкубации в препаратах культур с высокой концентрацией клеток. В таких культурах активность накопления метаболитов и секреция медиаторов макрофагами была повышенной, что и способствовало процессу дегрануляции. При пониженном содержании клеток требовалось значительно больше времени для накопления указанных веществ. В культурах, полученных от животных линии СВА, находили большее количество лаброцитов, чем в культурах групп C57BL/6 с аналогичными условиями культивирования.
Таким образом, была показана зависимость концентрации лаброцитов и степени активности дегрануляции от плотности посадки клеток, генетической принадлежности культур и сроков их инкубации. Полученные данные могут использоваться при моделировании процессов хронического воспаления с различной концентрацией лаброцитов и активностью процесса дегрануляции, что является одним из этапов разработки методов коррекции гранулематозных заболеваний.

Список литературы:
1. Ильин Д.А., Архипов С.А Сравнительная оценка функциональной и интегративной активности макрофагов и лаброцитов в генотипически различных культурах перитонеальных клеток // VII всероссийская конференция по патологии клетки. Москва, 2005. - С. 56 – 57.
2. Ковалева С.И. Особенности эпидемиологии туберкулеза в Москве и меры по ее улучшению. // Пробл. туб. – 1994. – № 5. – С. 2 – 4.
3. Хоменко А. Г. Туберкулез  сегодня и завтра – проблемы и пути решения. // Пробл.туб. – 1995. – № 1. – С. 4 – 8.
4. Alcais A., Sanchez F.O., Thuc N.V. Granulomatous reaction to intradermal injection of lepromin (Mitsuda reaction)is linked to the human NRAMP1 gene in Vietnamese leprosy sibships. // J. Infect. Dis. – 2000. – V. 181. – № 1. – P. 302 – 308.
5. Algood H.M., Chan J., Flynn J.L. Chemokines and tuberculosis // Cytokine Growth Factor – 2003 – V. 14. – № 6. – Р. 467 – 477.
6. Hernandez-Pando R., Bornstein Q.L., Aguilar L.D., Orozco E.H., Madrigal V.K., Martinez C.E. Inflammatory cytokine production by immunological and foreign body multinucleated giant cells. // Immunol. – 2000. – V. 100. – № 3. – Р. 352 – 358.