Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН (г. Новосибирск)

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2006 год, Том 3, выпуск 1), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

В настоящее время во всем мире наблюдается активное и повсеместное распространение гранулематозных заболеваний, индуцируемых различными этиологическими факторами [1; 3; 5; 6]. Известно, что регуляция иммунных процессов тесно связана с функцией апоптоза иммунокомпетентных клеток [4]. Наблюдение этих процессов дает возможность получения информации о реализации потенциала фагоцитов, что позволило бы учитывать особенности функционирования полинуклеаров при коррекции гранулематозных заболеваний. Важную роль, определяющую адекватность иммунного ответа, играет количественный состав очагов хронического воспаления [2].
Цель исследования заключалась в изучении влияния концентрации посадки клеток на поведение полинуклеарных фагоцитов в культурах перитонеальных макрофагов. Клетки выделяли из брюшной полости мышей линии CBA. Концентрация посадки в контрольной и в экспериментальной группах составляла 1000 тыс. и 500 тыс. перитонеальных клеток в 1 мл взвеси, соответственно.
Подсчитывали количество многоядерных фагоцитов. Находили численность клеток, имевших признаки апоптоза, некроза, и дистрофии. Определяли концентрацию апоптозных телец. Результаты оценивали на 2, 24, 48 и 72 часа инкубации. Контролем служили культуры, инкубируемые в течение 2 часов.
Общая тенденция изменения численности многоядерных клеток в куль¬турах перитоне¬альных макрофагов заключалась в том, что происходило увеличение содержания таких фагоцитов через 24 часа¬ инкубации. Преобладали двухядерные макрофаги с ядрами круглой формы. Указанные изменения различались по степени выраженности в зависимости от сроков ин¬кубации культур и концентрации посадки клеток. Прослеживалась закономерность относительно численности ядер много¬ядерных макрофагов и соотношения количества ядер к числу многоядерных клеток. Это отношение находилось в диапазоне от 2,0 до 2,3.
Численность многоядерных макрофагов в культурах группы с пониженной концентрацией перитонеальных клеток после 24 часов инкубации превосходила количество полинуклеарных фагоцитов в культурах группы с высокой концентрацией клеток на 37,8 %. Через 48 часов экспозиции эта разница уменьшалась, и составляла 16,6 %. При дальнейшем увеличении сроков инкубации достоверные межгрупповые различия не отмечали. Наблюдали волнообразный характер изменения численности полинуклеаров в обеих группах, который проявлялся снижением численности клеток на 48 часов экспозиции и возрастанием их количества к 72 часам.
Логично предположить, что апоптоз являлся возможной причиной снижения числа полинуклеаров ко вторым суткам инкубации, что подтверждается возрастанием концентрации апоптозных телец в этот период. Данный процесс наиболее активно протекал в культурах с пониженным содержанием клеток. Вторым важным моментом, на наш взгляд, следует считать меньшую активность течения компенсаторно-приспособительных процессов у полинуклеарных клеток в указанных культурах. Косвенным подтверждением этого являлось незначительное возрастание численности многоядерных макрофагов на 72 часа экспозиции по сравнению с контрольным периодом.
Полинуклеарные макрофаги обеих групп на отмеченные сроки наблюдения не подвергались некрозу, а количество клеток в состоянии дистрофии достоверно не отличалось при межгрупповом сравнении, и не изменялось в течение всего времени проведения эксперимента. Наличия апоптоза полинуклеаров на 24 часа инкубации не отмечали. Активность апоптоза многоядерных фагоцитов достигала наибольшего значения через 72 часа. На ранних сроках экспозиции (на 24 часа) в культурах с низкой концентрацией содержания клеток от животных линии СВА находили 33,3 % многоядерных макрофагов с признаками апоптоза. В группах СВА количество апоптозных телец в культурах с низкой концентрацией клеток превышало данный параметр у культур с высокой концентрацией посадки на все сроки экспозиции.
Таким образом, выявленные различия в динамике формиро¬вания многоядерных макрофагов в культу¬рах перитонеальных клеток на отмеченные сроки инкубации были, вероятно, обусловлены изменением концентрации посадки клеток. Соотношения между интенсивностью протекания процессов апоптоза, некроза и дистрофии макрофагов изменялись в зависимости от сроков инкубации и концентрации посадки клеток. Полученные результаты могут быть использованы при моделировании продуктивной фазы хронического воспалительного процесса с различным уровнем активности течения апоптоза, некроза и дистрофии иммунокомпетентных клеток в очаге воспаления.

Список литературы:
1. Васильев А.В., Гришко А.Н. Аспекты эпидемиологии // Внелёгочный туберкулёз. СПб., 2000. – С.11-33.
2. Ильин Д.А., Архипов С.А Сравнительная оценка функциональной и интегративной активности макрофагов и лаброцитов в генотипически различных культурах перитонеальных клеток // VII всероссийская конференция по патологии клетки. Москва, 2005. – С. 56 – 57.
3. Рыбка Л.Н., Пунга В.В.  Туберкулез  у беженцев из дальнего зарубежья. // Пробл. туб. – 1996. – № 3. – С. 12 – 13.
4. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология 1996, т. 6, с. 10 – 23.
5. Alcais A., Sanchez F.O., Thuc N.V. Granulomatous reaction to intradermal injection of lepromin (Mitsuda reaction)is linked to the human NRAMP1 gene in Vietnamese leprosy sibships. // J. Infect. Dis. – 2000. – V. 181. – № 1. – P. 302 – 308.
6. Hernandez-Pando R., Bornstein Q.L., Aguilar L.D., Orozco E.H., Madrigal V.K., Martinez C.E. Inflammatory cytokine production by immunological and foreign body multinucleated giant cells. // Immunology. – 2000. – V. 100. – № 3. – Р. 352 – 358.