Labirint.ru - ваш проводник по лабиринту книг
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -ГлавнаяОб АльманахеРецензентыАрхив телеконференций- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Сборники АльманахаДругие сборникиНаучные труды- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Образец оформленияИнформационное письмоО проведении телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Материалы I телеконференцииМатериалы II телеконференцииМатериалы III телеконференцииМатериалы IV телеконференцииМатериалы V телеконференцииМатериалы VI телеконференцииМатериалы VII телеконференцииМатериалы VIII телеконференцииМатериалы IX телеконференцииМатериалы Х телеконференцииМатериалы XI телеконференцииМатериалы XII телеконференцииМатериалы XIII телеконференцииУчастники XIII телеконференцииМатериалы XIV телеконференцииУчастники XIV телеконференцииЮбилейная XV Телеконференция Октябрь 2014Участники Юбилейной XV Телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Конференция СМПиЧ-2015Участники СМПиЧ-2015- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -КонтактыФорум
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Поиск по сайту

Последние статьи

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ ВЛИЯНИЕ ВИРУСНОИ ИНФЕКЦИИ КЛЕЩЕВЫМ ЭНЦЕФАЛИТОМ НА ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДИКТОРЫ БОЛЕЗНИ РОЛЬ ГЕНА GSTM1 В ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЯХ КЛЕТОК КРОВИ и ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЯХ СПЕРМАТОЗОИДОВ ПРИ ГРАНУЛОЦИТАРНОМ АНАПЛАЗМОЗЕ ЧЕЛОВЕКА ГЕНЕТИЧЕСКИИ ПОЛИМОРФИЗМ И ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ Т- ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ АРТРИТОМ, АССОЦИИРОВАННЫМ В КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ КЛИНИЧЕСКИЕ ПОСЛЕДСТВИЯ ИКСОДОВОГО ВЕСЕННЕ-ЛЕТНЕГО КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫИ СТАТУС И АДАПТИВНЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ОРГАНИЗМА ПЕРВОКЛАССНИКОВ ШКОЛ г. НЕФТЕЮГАНСКА ТЮМЕНСКОИ ОБЛАСТИ Материалы трудов участников 14-ой международной выездной конференции русскоязычных ученых в Китае (Sanya, Haynan Island) "Современный мир, природа и человек", том 8, №3. ПРОЛИФЕРАТИВНЫЕ И АПОПТОТИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ В ПРОЦЕССЕ СТИМУЛЯЦИИ АНТИГЕНОМ БОРРЕЛИИ THE ANALYSIS OF SOME INDICES OF IMMUNERESPONSE, DNA REPAIR, AND MICRONUCLEI CONTENT IN CELLS FROM TICK-BORNE ENCEPHALITIS PATIENTS КОМПЬЮТЕРНЫИ СПЕКТРАЛЬНЫИ МОРФОМЕТРИЧЕСКИИ АНАЛИЗ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ И ГРАНУЛОЦИТАРНЫМ ЭРЛИХИОЗОМ ЧЕЛОВЕКА

Полезная информация

 
 

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ЭКСПРЕССИЯ Е-КАДХЕРИНА В 3 ИММУННОФЕНОТИПИЧЕСКИХ ВАРИАНТАХ КАРЦИНОМ ЖЕЛУДКА

Печать E-mail
Автор Гаганов Л.Е., Гуревич Л.Е.   
08.02.2011 г.

ГБУ Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского (МОНИКИ).

Эта статья опубликована сборнике научных трудов "Проблемы и перспективы современной науки" с материалами Четвертой Международной Телеконференции "Фундаментальные науки и практика" - Том 3 - №1. - Томск - 2011.

  
Е-кадхерин (увоморулин) принадлежит семейству трансмембранных кальций-зависимых гликопротеинов, обеспечивающих адгезивные межклеточные контакты эпителиальных клеток. Повреждение Е-кадхерина приводит к дестабилизации связей между клетками эпителиальных структур и является одним из основных механизмов инвазии. Во многих типах карцином недостаток или мутация Е-кадхерина коррелирует с их инвазивным и метастатическим потенциалом [Chan O.A., 2006].
Функциональные особенности карцином желудка, определяющиеся экспрессией муцинов, позволяют выделить 4 иммуннофенотипических варианта: «желудочный», «кишечный», смешанный» и «неклассифицируемый» [Гаганов Л.Е. и соавт., 2010]. Для опухолей с «желудочным» иммуннофенотипом характерна экспрессия муцинов (MUC) 1, 5AC и 6 типов, с «кишечным» - MUC2, а так же гликопротеина CD10, экспрессируемого щеточной каёмкой тонкой кишки [Seki T. et al. 2009].
Исследования, посвященные изучению экспрессии Е-кадхерина в разных иммуннофенотипических вариантах рака желудка немногочисленны, противоречивы и часто проведены на небольшом по количеству наблюдений материале [Lillehoj E.P. et al, 2007; Namikawa T., Hanazaki K., 2010; Zhang H. et al, 2004; Zhou Y. et al, 2002].
Настоящее исследование посвящено изучению экспрессии Е-кадхерина в различных вариантах карцином желудка, различающихся по экспрессии муцинов 1, 5AC, 6, 2 типов и CD10 с целью уточнения их инвазивного потенциала.
Был исследован операционный материал 22 гастрэктомий и 33 резекций желудка, выполненных по поводу рака в хирургических отделениях МОНИКИ им. М.Ф.Владимирского в период с апреля 2005 года по июль 2007. Возраст оперированных пациентов от 27 до 75 лет (средний возраст 58,2 года), мужчин 30, женщин – 25 (1,2:1).
В кардии локализовалось 11 опухолей, на границе кардии и тела – 8, теле - 9, на границе тела и антрального отдела – 10, антральном отделе – 17. Опухоли росли эндофитно, были изъязвлены (за исключением карциномы in situ).
Согласно международной гистологической классификации ВОЗ (2009г.) исследуемые карциномы были подразделены на следующие варианты: папиллярная аденокарцинома – 4 наблюдения (низкой степени злокачественности); тубулярная – 10 (8 – низкой степени злокачественности, 2 – высокой степени злокачественности); перстневидно-клеточная карцинома – 18; смешанная – 22; слизистая – 1.
В прилежащей к опухоли слизистой оболочке желудка выявлены очаги интраэпителиальной неоплазии (дисплазии): низкой степени в 19 наблюдениях, высокой степени – 13, а так же фокусы кишечной метаплазии в 36 случаях.
Для микроскопического исследования операционный материал фиксировали в 10% формалине, заливали в парафин по рутинной методике. Срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали Г-Э. Для иммунногистохимического (ИГХ) исследования отбирали блоки с репрезентативными участками и исследовали ткани опухоли. В качестве позитивного контроля использовали прилежащую неопухолевую слизистую оболочку, негативного – параллельные срезы того же блока с использованием вместо исследуемых антител буферного раствора.
ИГХ исследование проводили ПАП-методом на парафиновых срезах толщиной 5 мкм по стандартному протоколу. Использовали моноклональные антитела к муцинам и Е-кадхерину (Novocastra), CD10 (DAKO). Инкубация с первичными антителами проводилась после предварительной обработки срезов в микроволновом (2х5 мин) режиме при мощности 650 ватт. На следующих этапах применяли KIT фирмы DAKO (Envision, Mouse/Rabbit); в качестве хромогена использовали диаминобензидин – ДАВ+ (DAKO), ядра клеток докрашивали гематоксилином Майера.
Экспрессию соответствующих маркеров оценивали как число позитивно окрашенных клеток на 100 учтенных в репрезентативных полях зрения при увеличении х400 выраженное в %. ИГХ реакцию считали положительной при окрашивании >5% опухолевых клеток (для муцинов и Е-кадхерина) и единичных клеток (для CD10).
В зависимости от типа экспрессируемых муцинов и CD10 карциномы желудка разделили на 3 группы с «желудочным», «кишечным» и «смешанным» иммуннофенотипом. К «желудочному» относили опухоли с изолированной или сочетанной экспрессией MUC1,5AC,6 (56% (31/55) наблюдений); к «кишечному» - MUC2 и/или CD10 (4% (2/55)); к «смешанному» – с сочетанной экспрессией желудочных и кишечных маркеров (40% (22/55)); к «неклассифицируемому» - с отсутствием экспрессии исследуемых маркеров (иммуннофенотип не выявлен).
Экспрессию Е-кадхерина оценивали по характеру окрашивания. Выделены 2 варианта экспрессии: «нормальная» и «аномальная». «Нормальная» экспрессия Е-кадхерина проявлялась мембранным окрашиванием, «аномальная» - цитоплазматическим и гетерогенным (мембранно-цитоплазматическим). При наличии в опухоли нескольких вариантов окрашивания учитывался преобладающий вариант.
Для определения экспрессии Е-кадхерина в карциномах желудка применили полуколичественный анализ. Окрашивание 5-25% клеток – расценивали как слабую иммуннореактивность, 26-50% - умеренную, более 50% - высокую.
Статистическую обработку проводили посредством пакета программ «SigmaPlot 11.0». Для сравнения частот использовали критерий Хи-квадрат. Различия считали значимыми при р < 0,05.
Исследование показало, что в неопухолевой слизистой желудка, в том числе с признаками атрофического гастрита в очагах интраэпителиальной неоплазии низкой степени и фокусах кишечной метаплазии мембранная («нормальная») экспрессия Е-кадхерина наблюдалась в 100% клеток. В очагах интраэпителиальной неоплазии высокой степени мембранная экспрессия Е-кадхерина отмечалась в 69% (9/13) наблюдений; «аномальная» в виде гетерогенного окрашивания отдельных клеток - в 31% (4/13).
В карциномах желудка экспрессия Е-кадхерина выявлялась в 93% (51/55) случаев (из них «нормальная» - в 31% (17/55); «аномальная» - в 62% (34/55)); в 7% (4/55) экспрессия отсутствовала. При «аномальном» типе экспрессии цитоплазматическое окрашивание наблюдалось в 24% (13/55) наблюдений; гетерогенное - в 38% (21/55).
В карциномах с мембранной экспрессией Е-кадхерина иммунореактивными были в среднем 63% клеток, с цитоплазматической – 47%, гетерогенной – 50%.
Карциномы с мембранной экспрессией Е-кадхерина имели высокую иммуннореактивность в 11/17 случаях, умеренную - в 5/17, слабую - в 1/17; при цитоплазматической экспрессии Е-кадхерина – высокая иммуннореактивность отмечена в 6/13 наблюдениях, умеренная - в 3/13, слабая - в 4/13; при гетерогенной экспрессии – высокая иммунореактивность выявлялась в 12/21, умеренная - в 4/21, слабая - в 5/21. Представленные различия незначительны (р=0,5).
В карциномах с «желудочным» иммуннофенотипом мембранный тип экспрессии обнаружен в 16% (5/31) наблюдений, цитоплазматический - в 26% (8/31), гетерогенный – в 55% 17/31, экспрессия отсутствовала - в 3% (1/31). В карциномах с «кишечным» иммуннофенотипом в 1 наблюдении выявлен цитоплазматический тип экспрессии Е-кадхерина, во втором экспрессия отсутствовала. В опухолях со «смешанным» иммуннофенотипом мембранный тип экспрессии выявлен в 54% (12/22) наблюдений, цитоплазматический - в 14% (3/22), гетерогенный - в 23% (5/22), экспрессия отсутствовала в 9% (2/22) (см. диаграмму). 

 

Image

 

Различия в типах экспрессии Е-кадхерина между «желудочным» и «смешанным» иммуннофенотипами достоверны (р=0,01). Сравнение экспрессии Е-кадхерина не проводились с группой карцином имеющих «кишечный» иммуннофенотип ввиду ее малочисленности (2 наблюдения).
В опухолях с «желудочным» иммуннофенотипом иммунореактивными к Е-кадхерину были в среднем 49% клеток, с «кишечным» – 22%, со «смешанным» – 51%. Карциномы с «желудочным» иммуннофенотипом имели высокую иммуннореактивность в 17/31 случаях, умеренную - в 7/31, слабую - в 6/31; со «смешанным» – высокую - в 12/22, умеренную - в 4/22, слабую - в 4/22. В единственной карциноме с «кишечным» иммуннофенотипом, экспрессирующей Е-кадхерин, выявлена умеренная иммуннореактивность. Различия в иммунореактивности к Е-кадхерину между карциномами «желудочного» и «смешанного» иммуннофенотипов незначительны (р=0,8) (см. таблицу1).

Таблица 1

Иммуннореактивность карцином к Е-кадхерину в зависимости от иммуннофенотипического варианта опухоли

Фенотип

Общее n

Иммуннореактивность

Слабая

Умеренная

Высокая

Отсутствует

Желудочный

31

6

7

17

1

Кишечный

2

-

1

-

1

Смешанный

22

4

4

12

 


Проведенное исследование выявило неоднородность экспрессии Е-кадхерина в различных иммуннофенотипических вариантах карцином желудка и прилежащей неопухолевой слизистой оболочке. Установлено, что «нормальный» (мембранный) тип экспрессии Е-кадхерина выявлялся в 31% наблюдений карцином, «аномальный» (цитоплазматический и гетерогенный - в 24% и 38%), в 7% экспрессия отсутствовала. В группе карцином имеющих «желудочный» иммуннофенотип обнаружено статистически значимое преобладание «аномальной» экспрессии Е-кадхерина по сравнению с опухолями имеющими «смешанный» иммуннофенотип (р=0,01), что позволяет предположить у них наличие более высокого инвазивного потенциала (сравнение с группой карцином имеющих «кишечный» иммуннофенотип не проводились ввиду её малочисленности). Значимого различия в иммуннореактивности между исследованными группами карцином не выявлено.
Во всех клетках неопухолевой слизистой желудка, в очагах интраэпителиальной неоплазии низкой степени и фокусах кишечной метаплазии наблюдалась «нормальная» экспрессия Е-кадхерина. В очагах интраэпителиальной неоплазии высокой степени «нормальная» экспрессия Е-кадхерина отмечалась в 69% наблюдений, «аномальная» - в 31% в виде гетерогенного окрашивания отдельных клеток, что может быть ранним признаком карциномы.
Проведённое сравнительное иммуногистохимическое исследование выявило более высокий инвазивный потенциал в группе карцином имеющих «желудочный» иммуннофенотип по сравнению с опухолями имеющими «смешанный» иммуннофенотип. Различия в иммуннореактивности между исследованными группами карцином были минимальны.

Последнее обновление ( 12.04.2011 г. )
 

Добавить комментарий

Правила! Запрещается ругаться матом, оскорблять участников/авторов, спамить, давать рекламу.



Защитный код
Обновить

« Пред.   След. »
 
 
Альманах Научных Открытий. Все права защищены.
Copyright (c) 2008-2020.
Копирование материалов возможно только при наличии активной ссылки на наш сайт.

Warning: require_once(/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php) [function.require-once]: failed to open stream: Нет такого файла или каталога in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 99

Fatal error: require_once() [function.require]: Failed opening required '/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php' (include_path='.:/usr/local/zend-5.2/share/pear') in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 99