Полное название

ИЗУЧЕНИЕ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ ТРАНСЛОКАЦИИ T(9;22) У ПАЦИЕНТОВ С РАЗЛИЧНЫМИ ФОРМАМИ ЛЕЙКОЗОВ, ПРОЖИВАЮЩИХ  В КАРАГАНДИНСКОЙ ОБЛАСТИ

Карагандинский государственный университет им. Е.А. Букетова (Казахстан)

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов по материалам Первой Международной Телеконференции «Фундаментальные медико-биологические науки и практическое здравоохранение» (январь-февраль 2010 год), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н.

Посмотреть титульный лист сборника

Скачать информацию о сборнике (в архиве: обложка, тит. лист, оглавление, список авторов) 

Филадельфийская хромосома (Ph) – реципрокная транслокация, возникающая между длинными плечами хромосом 9 и 22, t(9;22)(q34;q11) – специфическое для опухолевых клеток цитогенетическое изменение, впервые выявленное в 1959г. при обследовании больных хроническим миелоидным лейкозом (ХМЛ) /1/. Данное изменение кариотипа наблюдается у 95-98% больных хроническим миелоидным лейкозом (ХМЛ), у 25% больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) и у 2% больных острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) /9,10/.  Эта хроматидная аберрация является результатом слияния части протоонкогена ABL (Abelson Leukemia Virus), расположенного на хромосоме 9 и участка гена BCR (Breakpoint Cluster Region) хромосомы 22 с образованием химерного гена на хромосоме 22 /2,3/.
Установлено, что тип продуцируемого белка, синтезируемого гибридным геном, имеет клиническое значение, поскольку больные острыми лимфобластными лейкозами, ХМЛ при лимфоидном и бластном кризах по-разному реагируют на противоопухолевую терапию [25]. Известны несколько вариантов формирования филадельфийской хромосомы:.

Целью данной работы был сравнительный анализ выявления хромосомой аномалии - транслокации t(9;22) в клетках крови у больных лейкозами методом ПЦР с детекцией при помощи электрофореза и real-time ПЦР.

Материалы и методы
Материалом служили образцы крови пациентов гематологического отделения областной клинической больницы г. Караганды. Возраст пациентов составил от 27 до 77 лет.
Процедуры выделения РНК, постановки реакции обратной транскрипции, полимеразной цепной реакции, электрофореза амплифицированных фрагментов ДНК, ПЦР в режиме реального времени проводили в соответствии с методиками и инструкциями, сопровождающими наборы реактивов.

Результаты и обсуждение
Первоначальные исследования проводили, используя в качестве метода детекции продуктов амплификации традиционный метод электрофореза ДНК в агарозном геле. Каждый раз применяли положительный и отрицательный контрольные образцы. При приведении электрофореза использовали маркер молекулярного веса. Фотография электрофореза одного из экспериментов приведена на Рисунке 1.
Из рисунка видно, что выявляется специфический транскрипт, соответствующий химерному гену BCR-ABL (слияние фрагментов e1-a2), размером примерно 200 пар оснований. Транскрипт соответствует белку p185.
ПЦР в режиме реального времени обладает рядом безусловных преимуществ: возможность детекции накопления продуктов амплификации непосредственно во время проведения амплификации; не требует дополнительных манипуляций, связанных с раститровкой ДНК исследуемой пробы; позволяет снизить требования, предъявляемые к ПЦР лаборатории и др. Исходя из этих соображений, последующие исследования приводили с постановкой реакции амплификации в аппарате ДТ322, поддерживающем режим реального времени.

Скачать работу целиком

Читайте также:

 АПОПТОЗ ЛЕЙКОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ЛИЦ С АДДИКТИВНЫМИ РАССТРОЙСТВАМИ В ДИНАМИКЕ ТЕРАПИИ

ВЗАИМОСВЯЗЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ РЕЦЕПТОРА CCR5 И ХЕМОКИНА RANTES В ЛЕЙКОЦИТАХ КРОВИ С ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ НЕОАДЪЮВАНТНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

КОМПЬЮТЕРНЫЙ МОРФОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РАЙОНОВ ЯДРЫШКОВОГО ОРГАНИЗАТОРА МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ОПИСТОРХОЗОМ 

ОЦЕНКА КАЧЕСТВА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЛЕЙКОВОРИНА

ИЗМЕНЕНИЯ КОЛОНИЗАЦИОННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ЗЕВА ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ КРОПАНОЛА 

ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО IL-4A2 С РЕЦЕПТОРАМИ IL-4R I И IL-4R II IN SILICO