Глицирризиновая кислота, главный компонент экстракта корня солодки (Glycyrrhiza sps.), обладает широким спектром биологических активностей [1]. Описано эффективное ингибирование репродукции ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в культуре клеток ее производными - моноаммониевой солью глицирризиновой кислоты (глицирам) и мононатриевой солью [2], а так же новым ингибитором ВИЧ, полученным путем химической модификации - пента-О-никотинатом глицирризиновой кислоты (ниглизином) [3]. Доступность и дешевизна сырья для производства этого класса соединений делает их весьма перспективными кандидатами для разработки отечественного препарата для терапии ВИЧ-инфекции.
В данной работе мы исследовали способность ниглизина (пента-О-никотината ГК) и его различных комбинаций с азидотимидином препятствовать размножению ВИЧ-1 в культуре клеток и ингибировать рекомбинантную обратную транскриптазу ВИЧ-1 в модельной системе in vitro.
Показано, что ниглизин эффективно подавляет репликацию ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4. Исследование совместного анти-ВИЧ действия ниглизина и азидотимидина (АЗТ) показало, что АЗТ и ниглизин в комбинациях 1:20, 1:50, 1:200 и 1:2000 проявляют синергетический эффект. Результаты противовирусной активности ниглизина и его комбинации с АЗТ в отношении АЗТ-устойчивого мутанта ВИЧ-1 показали, что ниглизин более эффективен в отношении АЗТ-резистентного мутанта (ID50 = 0,134 мкМ), по сравнению с "диким" штаммом (ID50 = 9,64 мкМ), а в комбинации АЗТ:ниглизин = 1:100 проявляет синергизм (FIC = 0,553).
Для выяснения молекулярной мишени в репликативном цикле ВИЧ, на которую воздействует ниглизин, мы исследовали его ингибирующие свойства в отношении рекомбинантной обратной транскриптазы ВИЧ-1.
Результаты подавления активности обратной транскриптазы показали, что ниглизин является активным неконкурентным ингибитором (ID50 = 5,36 мкМ). Также ниглизин более эффективно подавлял активность мутантных форм обратной транскриптазы, несущих аминокислотные замены, определяющие устойчивость к АЗТ. Совместное действие АЗТ и ниглизина, а также ниглизина и невирапина (известного ненуклеозидного ингибитора обратной транскриптазы ВИЧ) показало во всех случаях синергетический характер.
Таким образом, механизм синергетического действия ниглизина и АЗТ, наблюдаемый на культуре инфицированных клеток, заключается именно в совместном действии этих препаратов на обратную транскриптазу. Это свидетельствует о перспективности использования данных комбинаций для терапии ВИЧ-инфекции, в том числе для лечения пациентов с развившейся лекарственной устойчивостью.