Иркутский государственный медицинский университет

В медицинской практике для лечения различных аллергических заболеваний широко применяются антигистаминные лекарственные средства из группы Н1 – блокаторов. По данным ВОЗ эта группа лекарственных средств занимает третье место среди терапевтических групп, подлежащих фальсификации (1). Для выявления и изъятия из обращения поддельных лекарственных средств необходимы простые методы экспресс – анализа, позволяющие быстро, надежно и с минимальными затратами отличить поддельный продукт от оригинального (1).
Система экспресс – идентификации не разработана для антигистаминных лекарственных средств Н1 – блокаторов. Это обстоятельство определило выбор объектов исследования. Таковыми были следующие лекарственные средства:
 Димедрол субстанция;
 Супрастин таблетки 25 мг;
 Тавегил таблетки 1 мг;
 Хлорфенирамин субстанция;
 Фенкарол таблетки 10 мг;
 Кларитин таблетки 10 мг.
Как свидетельствуют литературные данные (3) и наши собственные исследования, супрастин, тавегил и кларитин занимают ведущие позиции в рейтинге антигистаминных препаратов, пользующихся большим спросом у населения. В то же время они являются часто объектами для фальсификации, особенно супрастин (2).
Цель нашего исследования заключалась в разработке простых и экспрессных методик идентификации антигистаминных лекарственных средств на основе химических реакций и метода ТСХ. Такое сочетание методов позволяет достоверно подтвердить наличие или доказать отсутствие в лекарственном препарате действующего вещества, указанного на упаковке.
Анализ нормативной документации, регламентирующей качество исследуемых лекарственных средств, показал, что для установления подлинности используется ограниченное число аналитических реакций. В ФС включены хромогенная реакция с кислотой серной концентрированной для димедрола, реакция с реактивом Марки для фенкарола и реакция с бромцианом для хлорфенирамина. В доступной литературе нет сведений о химических аналитических реакциях, характерных для супрастина, тавегила и кларитина. Это послужило основанием для поиска и разработки таких реакций для изучаемых лекарственных препаратов.
В состав анализируемых препаратов входят антигистаминные лекарственные вещества как близкие, так и отличающиеся по химической структуре, включающие разнообразные функциональные группы.
Сравнительное изучение аналитических реакций показало, что многие из них не являются специфическими, позволяющими отличить лекарственные вещества друг от друга. Специфической для димедрола и тавегила оказалась хромогенная реакция с кислотой серной концентрированной. Димедрол образует оксониевую соль, окрашенную в ярко-желтый цвет, постепенно переходящий в кирпично-красный. Тавегил реагирует аналогично, но продукт реакции имеет ярко-желтое окрашивание, переходящее в зеленое. Хлорфенирамин и фенкарол окрашиваются в розовый цвет, и не окрашиваются кларитин и супрастин.
Последние не реагируют и с реактивом Марки. С данным реактивом взаимодействуют фенкарол, хлорфенирамин, димедрол и тавегил с образованием продуктов конденсации характерного цвета.
Кларитин за счет уретановой группировки окисляется калия дихроматом в сернокислой среде с образованием ацетальдегида и соли хрома (ІІІ) зеленого цвета. Другие лекарственные средства не реагируют подобным образом. Супрастин, как установлено нами, не имеет характерных аналитических реакций, что затрудняет его идентификацию химическим методом.
Более специфичными по сравнению с химическим являются современные хроматографические методы, среди которых наиболее простым, экспрессным и экономичным является метод ТСХ. Метод широко применяется для установления подлинности и обнаружения родственных примесей в антигистаминных лекарственных средствах. Однако условия хроматографирования не унифицированы, для разделения используются различные системы растворителей и адсорбенты. Это затрудняет идентификацию антигистаминных лекарственных средств методом ТСХ.
Для разработки унифицированной методики изучали хроматографическое поведение лекарственных средств на пластинках «Силуфол» и «Сорбфил» в системах растворителей нейтрального, основного и кислого характера, содержащих в качестве главного компонента бензол, хлороформ, эфир, этилацетат.
Ни в одной из испытанных систем растворителей не удалось достигнуть удовлетворительного разделения всех лекарственных средств. Трудноразделяемой парой оказались димедрол и супрастин, их хроматографические зоны перекрываются во всех системах растворителей, за исключением кислой. Однако в кислой системе нивелируется различие в хроматографическом поведении других лекарственных средств. Они разделяются с большим разбросом Rf только в основных системах растворителей.
Проведенные исследования позволили разработать унифицированную методику идентификации антигистаминных лекарственных средств, предполагающую хроматографирование образцов на двух пластинках в системах растворителей, селективных относительно отдельных групп лекарственных средств. На первой пластинке разделяли фенкарол, хлорфенирамин, тавегил и кларитин в системах растворителей основного характера, на второй пластинке – димедрол и супрастин в кислой системе растворителей.
Зоны веществ обнаруживали на пластинках «Сорбфил» 0,1 моль/л раствором йода, а на пластинках «Силуфол» модифицированным реактивом Драгендорфа.
Идентификацию лекарственных средств проводили по величинам Rf , воспроизводимость которых изучали в 5-6 повторностях. Для оценки эффективности разделения соседних зон рассчитывали коэффициент разделения R (4).
Оптимальные условия разделения и идентификации антигистаминных лекарственных средств, доверительные интервалы среднего значения Rf представлены в таблице 1.

Таблица 1

Оптимальные условия разделения и идентификации антигистаминных лекарственных  препаратов на пластинках «Сорбфил»

 

Лекарственные средства	Адсорбент «Сорбфил»		Системы  растворителей
	∆Rf cр ± ∆х	R
1. Фенкарол   2. Хлорфенирамин   3. Тавегил   4. Кларитин	0,06 ±0,01   0,19 ±0,02   0,31 ±0,03   0,54 ±0,04	2,05   1,52   3,10	Бензол – этанол – аммиак 25% (9:1:0,1)
1. Фенкарол   2. Хлорфенирамин   3. Тавегил   4. Кларитин	0,03±0,01   0,29±0,06   0,45±0,05   0,71±0,02	3,55   1,69   3,47	Хлороформ – этанол  аммиак 25%   (9:0,5:0,1)
1. Фенкарол   2. Хлорфенирамин   3. Тавегил   4. Кларитин	0,07±0,01   0,29±0,02   0,41±0,05   0,66±0,02	3,00   1,48   3,57	Этилацетат – этанол – аммиак 25% (9:1:0,3)
1. Димедрол   2. Супрастин	0,68±0,06   0,43±0,03	1,45	Этанол – ледяная уксусная кислота – вода (5:3:2)

 

Как видно из таблицы 1, почти во всех системах растворителей коэффициент разделения R намного больше 1, что свидетельствует о достаточно высокой эффективности предлагаемых хроматографических систем.
Таким образом, разработаны экспрессные методы идентификации антигистаминных лекарственных средств – блокаторов Н1 – рецепторов с применением аналитических химических реакций и метода ТСХ. Предложенные методики могут быть использованы для установления наличия или отсутствия в фальсифицированных лекарственных средствах действующего вещества, указанного на упаковке.

 

 

Литература
1. Выявление фальсифицированных лекарственных средств с использованием современных аналитических методов / А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев, А.А. Коновалов и др.// Химико – фармацевтический журнал. – 2004. - №3. – С.48-51.
2. Насекина, Е.Ю. Средства для лечения и профилактики аллергических заболеваний в аптечных продажах / Е.Ю. Насекина // Новая аптека. – 2007. - №5. – С. 30-32.
3. Мелик-Гусейнов,Д. Учет фальсифицированных лекарственных средств / Д. Мелик-Гусейнов// Фармацевтический вестник. – 2006. - №7. – С. 28-30.
4. Пери, С. Практическое руководство по жидкостной хроматографии / С. Пери, Р. Амос, П. Брюер. – Пер. с англ. – М.: Мир, 1974. – С. 18-23.