Интерес к детальному изучению механизмов действия диуретических средств обусловлен широким применением этой группы препаратов в клинической практике. Работы по углубленному изучению закономерностей фармакологической активности лекарственных веществ являются актуальными и практически важными, поскольку вносят существенный вклад в создание новых веществ с улучшенными фармакологическими характеристиками. В связи с этим данная работа посвящена изучению влияний пространственного и электронного строения фуросемида и роли карбоксильной группы в его молекуле на диуретическую и салурети-ческую активности.

В ходе работы были получены ряд новых производных фуросемида (этиловый и метиловый эфиры, N-ацетилфуросемид), исследованы их фармакологические свойства, а также произведены квантово-химические расчёты пространственного и электронного строения.
Стоит отметить, что химические модификации функциональных групп молекулы фуросе-мида в значительной мере осложнены большим количеством реакционных центров и чувствительностью субстрата к сильнокислым средам.

Так, например, метиловый эфир фуросемида был получен при действии такого высокоактивного и высокоселективного реагента, как диазометан. Этиловый эфир получен по реакции фуросемида с бромистым этилом в среде диметилформамида с добавками соды. Ацилирова-ние фуросемида удалось осуществить под действием мягкой ацилирующей системы уксусный ангидрид-пиридин. 1 13
Строение полученных соединений доказано методами ЯМР Н и ЯМР   С спектроскопии.
Контроль за ходом реакции и чистотой полученных продуктов вели методом ТСХ на пластинках Sorbfil ПТсХ-П-А-УФ и Silufol УФ-254. Детектирование пятен проводили УФ-светом, в качестве элюента использовали хлороформ, систему бензол : ацетон в соотношении 4:1, систему гексан : изопропиловый спирт : уксусная кислота в соотношении 7:3:1.

Спектры ЯМР 1Н, 13С записывали на спектрометре Brucker Avante-300 (300 мГц) внутренний стандарт - ГМДС, в качестве растворителя использовали дейтерированный ацетон и дейтерированный ДМСО. Температуры плавления определяли на микронагревательном столике Boetius.

Диуретическую активность веществ изучали в опытах на белых крысах линии Wistar мужского пола. Величину диуреза и экскреции ионов натрия и калия определяли в течение суток после введения исследуемых веществ [1]. Концентрацию ионов в моче определяли методом пламенной фотометрии на приборе ПАЖ-3. Исследуемые вещества вводили однократно подкожно в 1 мл физиологического раствора хлорида натрия. Фуросемид вводили в дозе 5 мг/кг, этиловый эфир и метиловый эфир фуросемида, а также N-ацетилфуросемид фуросе-мида вводили в дозах 5, 10 и 50 мг/кг. В качестве контроля вводили 1 мл физиологического раствора хлорида натрия. Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием критерия Стьюдента. Различия между сравниваемыми величинами считали достоверными при P<0,001 [2]

Построенные в ходе неэмпирических квантово-химических расчётов методом DFT B3LYP/6-311G* молекулярные модели полученных производных и исходного фуросемида показали:
1. Пространственное и электронное строение фуросемида в результате этерификации практически не изменяется. С другой стороны, полная потеря диуретической активности эфирами фуросемида позволяет предположить ключевую роль свободной карбоксильной группы в проявлении диуретической активности.
2. Ацилирование фуросемида приводит к глубоким изменениям пространственного и электронного строения. При ацилировании изменяются параметры внутримолекулярной водородной связи молекулы фуросемида, а также коренным образом меняется пространственная конфигурация молекулы, что приводит к появлению стерических затруднений при контакте молекулы с белковой мишенью.

Полученные в ходе исследования результаты позволили выявить ряд существенных факторов, определяющих диуретическую и салуретическую активность препарата.
1. Замещение активного атома водорода карбоксильной группы фуросемида на гидрофобные радикалы различной величины приводит к потере диуретической и салуретической активности препарата.
2. Изменения геометрии молекулы фуросемида, вызывающие выраженные стерические затруднения при образовании водородной связи с активным атомом водорода карбоксильной группы приводят к потере диуретической и салуретической активности препарата.