Роль оксида азота (NO), как сигнальной молекулы в обеспечении межклеточной и внутриклеточной сигнализации, получила множественные экспериментальные и клинические подтверждения. Это позволяет считать его универсальным участником многих регуляторных процессов в различных висцеральных системах, в том числе и в гладкомышечных клетках (ГМК) желудочно-кишечного тракта [2, 3, 4]. Целью данной работы являлось изучение действия нитропруссида натрия (HNa) на электрические и сократительные свойства циркулярных гладких мышц дистального отдела тонкого кишечника.
В работе использовалась методика двойного "сахарозного мостика", в модификации Д.П. Артеменко и М.Ф. Шуба, позволяющая одновременно регистрировать электрическую и сократительную активность ГМК [1]. Объектом исследования являлись циркулярные гладкомышечные полоски дистального отдела тонкого кишечника котов, расположенные в 0,5 - 1,5 см от илиоцикального сфинктера, диаметром 0,5 - 0,7 мм, длинной 1 - 1,5 см. Все манипуляции с препаратами проводились в нормальном растворе Кребса, при температуре 37°С и рН = 7,4. В качестве донора оксида азота использовался нитропруссид натрия, в концентрациях от 10-7 М до 10-3 М. Полоски раздражались прямоугольными импульсами электрического тока различной полярности и силы, продолжительностью 5 сек.
В нормальном растворе Кребса циркулярные гладкомышечные клетки тонкого кишечника не обладали спонтанной электрической активностью. При нанесении гиперполяризующего импульса электрического тока наблюдалось развитие анэлектротонического потенциала. Нанесение деполяризующего импульса приводило к появлению катэлектротонического потенциала с генерацией на его плато от 2 до 5 потенциалов действия и одновременным развитием фазного сократительного ответа.
Нитропруссид натрия в концентрациях от 10-7 до 10-5 М не оказывал заметного влияния на величину мембранного потенциала. В концентрациях 10-4 М и выше наблюдалось быстроразвивающаяся гиперполяризация мембраны величиной 1 - 2 мВ. Изменений мышечного тонуса при всех применявшихся концентрациях HNa не происходило.
При действии HNa в концентрациях от 10-7 до 10-6 М наблюдалось недостоверное снижение сопротивления мембраны и силы вызванных сокращений по сравнению со значениями в нормальном растворе Кребса.
В концентрации (10-5 М) HNa уменьшал сопротивление мембраны на 40 ± 1,84 % (р<0,05; n = 6), при этом сила сокращений снизилась на 72,34 ± 2,57 % (р<0,05; n = 6) по сравнению с контрольными значениями в нормальном растворе Кребса.
В концентрации (10-4 М) и выше HNa, снижал сопротивление мембраны более чем на 71 ± 3,17 %. Деполяризующие импульсы пороговой и сверхпороговой величины не приводили к генерации потенциалов действия и развитию сокращения.
Применение тетраэтиламмония (ТЭА) в концентрации 10-2 М, приводило к увеличению сопротивления мембраны на 12,5 ± 3,2 % (n = 8) от исходных значений в нормальном растворе Кребса. На фоне развивающейся деполяризации мембраны ГМК происходило повышение уровня механического напряжения мышечных препаратов, которое достигало наибольших значений к 10 минуте действия ТЭА. В дальнейшем тонус гладкомышечных полосок оставался неизменным на протяжении всего времени перфузии раствором, содержащим ТЭА. Сила вызванных сокращений при этом увеличивалась на 62,3 ± 2,31 %. У препаратов под действием ТЭА развивались анодоразмыкательные сократительные реакции и спонтанная активность. Окончание воздействия ТЭА приводило к восстановлению электрической и сократительной активности ГМК тонкого кишечника.
На фоне ТЭА (10-2 М), нитропруссид натрия (10-4 М) не приводил к изменению величины мембранного потенциала. Сопротивление мембраны снижалось на 25 ± 0,93 % (р<0,05; n = 6), а сила вызванных сокращений на 24,1 ± 0,87 % (р<0,05; n = 6) от контрольных значений. Также происходило исчезновение спонтанной активности и анодоразмыкательных ответов. После удаления HNa все параметры электрической и сократительной активности ГМК восстанавливались до значений близких к исходным в течение 12 - 17 мин.
Таким образом, полученные результаты показывают, что нитропруссид натрия оказывает значимое дозозависимое ингибирующее действие на параметры вызванной электрической и сократительной активности ГМК дистального отдела тонкого кишечника, начиная с концентрации 10-5 М и выше. Это может быть связано с увеличением калиевой проводимости мембраны, так как эти эффекты частично устраняются - блокатором калиевых каналов - тетраэтиламмонием.