Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
ГУ НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН, лаборатория молекулярной фармакологии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 66-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2007 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
Скачать сборник целиком (формат .PDF, 1,5 мб)
Патогенез многих заболеваний связан с повреждением мембран клеток, которое приводит к нарушению их функциональной активности. Поврежденные клетки не в состоянии вырабатывать достаточное количество энергии. Это связано с разрушением под влиянием этиологических факторов митохондриальных мембран. В развитии заболеваний печени важное значение имеет поражение митохондриальных мембран в результате активации перекисного окисления липидов [1]. В механизме терапевтического действия гепатопротективных средств при заболеваниях печени наряду с антинекротическим эффектом, улучшением детоксикациоонной и экскреторной функций, стабилизацией лизосом большое значение имеет восстановление нарушенного энергообмена. Гепатопротекторы, оказывая антиоксидантное действие, активируют аэробные процессы биоэнергетики, протекающие в митохондриях гепатоцитов [2].
Целью данной работы явилось изучение биоэнергетики печени крыс при модели экспериментального хронического гепатита, вызванного введением тетрахлорметана (ТХМ), и при терапии экстрактом бадана толстолистного и силимарином (флаволигналы расторопши пятнистой).
Эксперименты проводили на 30 беспородных крысах-самцах массой 180–220 г. Для исследований использовали гомогенат печени. Функциональное состояние митохондрий печени оценивали полярографическим методом с помощью закрытого электрода Кларка лабораторного изготовления по скорости потребления кислорода в различных метаболических состояниях по Б. Чансу [3]. Среда инкубации: 1,2 ? 10–1 моль КСl, 1 ? 10–3 моль Hepes-буфер, 2 ? 10–5 моль этилендиаминтетраацетата, 2 ? 10–3 моль КН2РО4 (pH = 7,2; t = 26 ?C). В качестве субстратов окисления использовали янтарную кислоту в концентрации 1 ? 10–3 моль, смесь НАД-зависимых субстратов малата и глутамата в концентрации по 3 ? 10–3 моль. Регистрировали скорости дыхания митохондрий до (V4п), после (V4о) и во время цикла фосфорилирования (V3) АДФ, добавленной до концентрации 1 • 10–4 моль. Во всех измерениях абсолютные значения скоростей потребления кислорода выражали в нанограммах атомарного кислорода в минуту на 1 мг белка митохондрий. Для оценки энергетического статуса рассчитывали коэффициенты стимуляции дыхания СД = V3/V4п, дыхательного контроля ДК = V3/V4о и сопряженности окислительного фосфорилирования АДФ/О.
После курсового введения ТХМ увеличивались скорости дыхания митохондрий во всех метаболических состояниях на 26–49% и снижались коэффициенты ДК и АДФ/О. Это свидетельствует о низкой степени энергизованности митохондрий. Через две недели после прекращения введения ТХМ скорости дыхания во всех метаболических состояниях уменьшались на 24–35% при сохранении низкой степени энергизованности митохондрий. Терапия экстрактом бадана толстолистного приводила к уменьшению коэффициента АДФ/О на фоне роста скоростей дыхания на треть при окислении сукцината, при этом показатели НАДН-зависимого дыхания нормализовались. Гепатопротективная активность экстракта бадана проявлялась восстановлением активности дегидрогеназ цикла Кребса. В группе животных, получавших силимарин, сохранялись такие же нарушения дыхания митохондрий, как у нелеченных животных.
