|
Пятигорская государственная фармацевтическая академия (г. Пятигорск)
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам пятого конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича.- Томск, СибГМУ.- 2004.- 413 с.
Скачать сборник целиком
Введение. В настоящее время в условиях возрастания неблагоприятных химических воздействий на организм, нарушения принципов сбалансированного питания, отмечается рост числа заболеваний сердечнососудистой системы. Среди них ведущее место занимает атеросклероз и его осложнения, которые продолжают оставаться наиболее частой причиной инвалидизации и смертности населения в экономически развитых странах. Многочисленные экспериментальные, клинические и эпидемиологические исследования свидетельствуют, что одним из основных факторов риска развития атеросклероза является нарушение обмена липидов и липопротеидов. Среди них наиболее существенное значение имеет увеличение в крови атерогенных липопротеидов, отражающееся в увеличении содержания в крови общего холестерина и липопротеидов очень низкой плотности, отражающееся в увеличении содержания в крови триглицеридов. На основании этого эффективными лечебными и профилактическими противоатеросклеротическими средствами являются те, которые способны снижать содержание холестерина и триглицеридов в сыворотке крови, т. е. обладают гиполипидемическим действием. В настоящее время гиполипидемическая лекарственная терапия признается главным способом снижения риска развития атерокслероза и его осложнений. При этом предпочтение следует отдавать гиполипидемическим средствам растительного происхождения, поскольку они не обладают побочным действием и имеют низкую токсичность. В связи с этим из надземных органов амброзии полыннолистной нами получены 4 субстанции и изучено их влияние на содержание в крови общего холестерина и триглицеридов в условиях экспериментальной гиперлипидемии.
Материалы и методы исследования. Сырьё - надземная часть амброзии полыннолистной. Получение субстанций из исходного сырья проводилось по известным методикам [1]. В результате для исследований были предложены 4 фракции.
Хроматографический анализ проводили в тонком слое на пластинках Silufol UV-254 и силикагеле марки LS 5\40 (Чехословакия) в системах растворителей: 1) хлороформ-этанол-вода 8:2:0,1; 2) этилацетат-петролейный эфир 3:1; 3) хлороформ-этанол-муравьиная кислота 31:2:0,15; 4) бензол-этанол 8:2; 5) этилацетат-бензол 1:2; 6) толуол-этилацетат-уксусная кислота 5:4:1 и бумажную хроматографию - на бумаге марки "Фильтрак" в системах растворителей: 1) формиат натрия-муравьиная кислота-вода 10:1:200; 2) 15% уксусная кислота; 3) 2,5% уксусная кислота; 4) бутанол-уксусная кислота-вода 4:1:5 [1, 2].
Хроматограммы после высушивания просматривали в УФ-свете до и после обработки реактивами: парами аммиака; 0,5 н раствора калия гидроксида в метаноле; свежеприготовленные диазосоединения в растворе карбоната натрия. Кроме перечисленных реактивов, для проявления веществ на бумажных хроматограммах применяли реактив Гепфнера и 1% метанольный раствор хлорида железа (III) [3].
Гиполипидемическое действие указанных фракций изучено на белых беспородных крысах обоего пола, массой 180-220 г на модели витаминной гиперлипидемии, вызванной пероральным введением витамина Д2 в дозе 320000 ЕД совместно с холестерином в дозе 200 мг/кг ежедневно в течение 4 суток. Исследуемые фракции в виде водной суспензии вводили per os в дозах 100 мг/кг за 6 дней до начала введения витамина Д2 и холестерина, а затем на фоне воспроизведения модели гиперлипидемии. В качестве препарата сравнения использовали липанор, который в опытах на животных применяют в дозе 50 мг/кг перорально [4]. Забой производили путем декапитации через 24 часа после последнего воздействия. В сыворотке крови определяли содержания общего холестерина по методу Илька и триглицеридов по методу Gottfried S. P., Rosenberg B. [5] и выражали в ммоль/л. Статистическую обработку результатов проводили с помощью t-критерия Стьюдента [6].
Результаты и их обсуждение. Полученные результаты представлены в таблице 1. Как видно из таблицы, в контрольной группе животных, которым вводили витамин Д2 совместно с холестерином, развивалась выраженная гиперлипидемия: содержание холестерина в сыворотке крови возрастало в 3,8 раза, а триглицеридов - в 2. 4 раза.
Лечебно-профилактическое введение различных фракций оказало гиполипидемическое действие, при этом наиболее выраженное снижение в крови содержания холестерина и триглицеридов (соответственно на 70% и 53%) наблюдалось под влиянием фракции I, из которой в дальнейшем были получены остальные 3 фракции при помощи различных растворителей. Гиполипидемическая активность фракций II и IV оказалась значительной ниже, чем исходной фракции. Введение фракции II привело к снижению холестерина на 52%, а триглицеридов - на 36%. Фракция IV оказалась еще менее эффективной: холестерин и триглицериды в крови снизились под ее влиянием лишь на 30% и 21% соответственно. В то же время активность фракции III достоверно не отличалась от активности фракции I: при ее введении крысам с гиперлипидемией холестерин и триглицериды крови снизились соответственно на 68% и 45%, при этом и под влиянием фракции I и под влиянием фракции III наблюдалась полная нормализация изученных показателей липидного обмена, поскольку они достоверно не отличались от таковых у интактных крыс.
|
Таблица 1.
Влияние различных извлечение из амброзии на содержание в крови
холестерина и триглицеридов в условиях экспериментальной гиперлипидемии
|
| Показатели
Группы животных |
Общий холестерин, ммоль/л |
Триглицериды, ммоль/л |
| Интактные, n=4 |
1,7±0,08 |
0,75+0,089 |
| Контроль (гиперлипидемия), n=5 |
6,6+0,36*
+288%
|
1,77+0,093* +136% |
| Фракция I,
n=5 |
2,05+0,220+
-70%
|
0,83+0,092+
-53%
|
| Фракция II, n=5 |
3,2+0,28+*
-52%
|
1,13+0,105+*
-36%
|
| Фракция III, n=5 |
2,08+0,31+
-68%
|
0,98+0,133+
-45%
|
| Фракция IV, n=5 |
4,6+0,25+*
-30%
|
1,39+0,091+*
-21%
|
| Липанор, n=4 |
1,96+0,079+
-70%
|
0,91+0,207+
-48%
|
Примечание: Различия статистически значимы по сравнению: *- с интактными животными; - с контролем.
Изучение химического состава полученных фракций показало наличие в них фенолокислот, кумаринов, флавоноидов и их гликозидов. Т. к. гиполипидемическая активность и исходной и полученной из нее 3-х фракций изучена в одной и той же дозе (100 мг/кг), причем эффективность фракции III сравнима с таковой фракции I, можно сказать, что определенный вклад в общую гиполипидемическую активность фракции I вносят не только соединения, переходящие во фракцию III, но и те соединения, которые обнаруживаются во фракции II и IV. Т. о. и агликоны и гликозиды фенолокислот, кумаринов и флавоноидов, обнаруженные в амброзии, обладают способностью снижать содержание холестерина и триглицеридов крови в условиях гиперлипидемии, при этом гиполипидемическая активность гликозидов in vivo выше, чем агликонов, что, по-видимому, связано с их лучшей растворимостью в воде, следствием чего является их лучшая биодоступность. Нужно отметить, что гиполипидемическая активность фракции I из амброзии по своей эффективности не уступает действию эталонного препарата липанора, который снижал содержание холестерина в сыворотке крови на 70%, а триглицеридов - на 48% (таблица 1).
Выводы. Ряд субстанций, полученных из амброзии, обладают способностью снижать в сыворотке крови содержание холестерина и триглицеридов на модели витаминной гиперлипидемии у крыс, при этом гиполипидемическая активность фракции I и фракции III не уступает по эффективности действия референтному препарату липанору и является основанием для последующего изучения противоатеросклеротического действия данных извлечений. Гиполипидемическая активность фракции I обусловлена наличием в ней агликонов и гликозидов фенолокислот, кумаринов и флавоноидов.
Литература:
1. Химический анализ лекарственных растений / Ладыгина Е.Я., Сафронович Л.Н., Отряшенкова В.Э. и др.- М.: Высшая школа, 1983.-176 с.
2. Выделение и анализ природных биологически активных веществ / Краснов Е.А., Березовская Т.П., Алексеюк Н.В. и др. - Томск: Изд-во Том. ун-та, 1987.-184 c.
3. Бандюкова, В.А. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозиды / В.А. Бандюкова // Химия природных соединений. - 1983.- №3.-С. 263-272.
4. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: ИПК "Бионт", 2000. - 398 с.
5. Колб, В.Г. Справочник по клинической химии / Колб В.Г., Камышников В.С. - Минск: Беларусь, 1982. - 336 с.
|
