Воронежский Государственный Университет, (г. Воронеж)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы Х конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М.
Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2009. – 166 с.
Скачать сборник целиком
Одним из разрешенных к применению в РФ растений с высоким содержанием сапонинов является синюха голубая. Лекарственное сырьё синюхи "Rhizomata cum radicibus Polemonii" включено в ГФ XI в качестве отхаркивающего средства. Различными исследователями отмечалась так же седативная, ранозаживляющая, кровоостанавливающая, противовоспалительная активность данного растения. Столь широкий спектр активности синюхи характерен и для других сапонинсодержащих растений, многие из которых обладают так же и гипогликемическим действием.
В настоящей работе представлены результаты исследований, направленных на получение максимально очищенного сапонинсодержащего препарата синюхи голубой, его стандартизацию и первичную оценку предполагаемой гипогликемической активности. В качестве исходного растительного сырья использовали высушенные корневища с корнями синюхи голубой, стандартизованные по ГФ XI.
В предварительных экспериментах было установлено, что максимальное количество сапонинов из данного вида сырья извлекается спиртоводными смесями, в частности, этанолом в концентрации 70%. С применением выбранного экстрагента было проведено выделение сапонинов из корневищ с корнями синюхи в максимально очищенном виде. Извлечение сапонинов проводили из навески измельченного высушенного сырья методом циркуляционного экстрагирования до полного истощения сырья (контроль полноты извлечения методом ТСХ, проявитель - ФВК). Полученное первичное извлечение очищали сменой растворителя, дважды переосаждали из этанола и, после отгонки растворителя, получали аморфный мелкодисперсный порошок кремового цвета, который далее анализировали на качественное (методом ТСХ) и количественное содержание сапонинов.
Для количественного определения сапонинов в полученном препарате нами была предложена методика, основанная на общем свойстве пентациклических тритерпеноидов - давать полосу поглощения в УФ и видимой части спектра после нагревания с концентрированной серной кислотой. При отработке методики раствор, содержащий точную навеску исследуемого образца, нагревали в течение 3 часов на кипящей водяной бане с концентрированной серной кислотой в соотношении 1 : 3. Оптическую плотность полученного раствора измеряли на спектрофотометре СФ - 46 при ^max = 286 нм. В качестве вещества - стандарта (РСО) использовали олеаноловую кислоту, являющуюся агликоном пентациклических тритерпеновых сапонинов многих растений. Содержание олеаноловой кислоты в образце определяли методом неводного титрования агликона по методике ГФ XI, предложенной для количественного определения сапонинов в сырье и препаратах аралии маньчжурской. Раствор точной навески олеаноловой кислоты, перед проведением спектрофотометрирования нагревали с серной кислотой в аналогичных с образцом условиях. Полученные в данных условиях УФ-спектры поглощения продуктов реакции с серной кислотой сапонинов и олеаноловой кислоты, имеют общий максимум поглощения при 286±2нм, используемый как аналитический. Относительное стандартное отклонение результатов определения сапонинов этим методом 0,08. С применением предложенной методики было определено содержание сапонинов в полученном образце в пересчете на олеаноловую кислоту, оно составило 27%, что соответствовало содержанию сапонинов около 65%, исходя из приблизительного усредненного значения их молярных масс 1100 (молярная масса олеаноловой кислоты 456).
Далее было проведено первичное исследование гипогликемического действия полученного сапо-нинсодержащего образца на лабораторных животных с использованием глюкозо - толерантного теста.
Опыты проводили на 22 белых мышах обоего пола массой 27,15±0,55 г. Всех животных за 12 часов до эксперимента подвергали пищевой депривации. Первой группе мышей внутрибрюшинно вводили водный раствор сапонинов в дозе 10 мг/кг. Вторая группа мышей являлась контрольной - растворы сапонинов не вводились. Через 30 минут всем мышам однократно подкожно вводили 40%-ный раствор глюкозы из расчета 3 г/кг. Содержание глюкозы в капиллярной крови определяли с использованием тест-полосок фирмы «Betachek» (Австрия). Измерения концентрации глюкозы в крови на фоне введения сапонинов синюхи проводили пятикратно: натощак до введения препарата (исходно), через 30 минут после введения препарата до введения глюкозы (0 минут), через 30, 60 и 120 минут после введения глюкозы. Для контрольных исследований измерения проводили четырехкратно - натощак до введения глюкозы (0 минут) и через 30, 60 и 120 минут после введения глюкозы. Анализ результатов, полученных в контроле и опыте свидетельствует, что по сравнению с исходными значениями, применение сапонинов синюхи обеспечивает снижение концентрации глюкозы в крови на 125,5% через 30 минут, на 71,0% через 60 минут и, на 8,6% через 120 минут после ее введения. Данный результат является весьма существенным и доказательным, подтверждая наличие гипогликеми-зирующей активности изучаемых сапонинов синюхи.
Таким образом, при проведении глюкозо-толерантного теста было выявлено, что изучаемый образец не снижает исходный уровень гликемии натощак у здоровых животных, однако проявляет гипог-ликемизирующие свойства при «глюкозной нагрузке». Полученный предварительный результат, подтверждающий гипогликемическую активность сапонинов синюхи, может открыть новый этап в использовании известного растения.
|