Защита тканей и органов человека от свободных радикалов обеспечивается эндогенной антиоксидантной системой организма. Однако эндогенные антиоксиданты далеко не во всех случаях могут защитить человека от развития оксидантного стресса. По этой причине не ослабевает интерес к поиску растительных препаратов, обладающими антиоксидантными свойствами, для профилактики и лечения заболеваний, сопровождающихся усилением реакций свободнорадикального окисления.
Интересным в этом отношении является объект нашего исследования – василек шероховатый (Centaurea scabiosa) сем Asteraceae.
Ранее проводились исследования антиоксидантной активности водного, 40 %, 70 % и 96 % этанольных экстрактов из надземной части василька шероховатого in vitro 3 методами: вольтамперометрическим, «кумольным» и спектрофотометрическим. Все экстракты василька шероховатого в той или иной степени обладают антиоксидантными свойствами, которые наиболее ярко выражены у экстракта, полученного на 70 % этаноле. Очевидно, что высокая антиоксидантная активность экстрактов объясняется комплексом природных соединений, которые содержит данное растение.
Исследование химического состава василька шероховатого показало, что наибольший интерес представляют фенольные соединения (флавоноиды – рутин, кверцетин, байкалеин, апигенин, скутелляреин, фенолкарбоновые кислоты – кофейная, хлорогеновая, феруловая, салициловая, коричная, п-кумаровая кислоты и дубильные вещества), а также сесквитерпеновые лактоны (гроссгемин, цинаропикрин) и полисахариды [1].
Среди природных антиоксидантов наиболее важное значение имеют именно растительные фенольные соединения, гидроксильные группы которых содержат подвижные атомы водорода, легко реагирующие с перекисными радикалами и обрывающие цепи окисления.
До сих пор остается открытым вопрос о связи антиоксидантных свойств того или иного вещества с его структурой. Наиболее полно разработан этот вопрос о механизме антиоксидантной активности для флавоноидов (ФЛ) и фенолкарбоновых кислот (ФКК), которая обусловлена их способностью тушить радикалы ОН• и О2• ?2?.
Целью настоящей работы явилось изучение динамики накопления ФЛ и ФКК в различных органах василька шероховатого в зависимости от фазы развития и места сбора растения и влияния технологических параметров экстракции на выход этих групп биологически активных веществ (БАВ), обусловливающих высокую антиоксидантную активность экстрактов василька шероховатого.
Объектом исследования служила надземная часть василька шероховатого, заготовленная в различных районах Кемеровской и Томской областей в 2006–2007 г.г. в фазах: вегетации, бутонизации, массового цветения и плодоношения. Растение разделяли на органы и высушивали до воздушно-сухого состояния. В качестве экстрагента на основе проведенных исследований был выбран 70 % этанол, наиболее полно извлекающий фенольный комплекс василька шероховатого.
Для определения количественного содержания флавоноидов выбран дифференциальный спектрофотометрический метод, основанный на комплексообразующей реакции с алюминия хлоридом с использованием в качестве стандарта ГСО рутина при длине волны 410 нм.
Определение количественного содержания ФКК из надземной части василька шероховатого проводили экстракционно-спектрофотометрическим методом, основанном на избирательной экстракции этилацетатом ФКК из водного извлечения при заданном значении pH, стандартом служила кофейная кислота ?3?. Как показали результаты исследования, максимальное содержание флавоноидов и фенолкарбоновых кислот наблюдается в период массового цветения растения 1,70?0,04 % в пересчете на рутин и 1,67±0,05 % в пересчете на кофейную кислоту. Изучение содержания этих групп БАВ в различных органах надземной части василька шероховатого, собранной в фазе цветения, показало, что максимальное содержание веществ наблюдается в листьях 1,96±0,04 % и 1,83±0,05 %, несколько ниже – во всей надземной части (1,70±0,04 %). На основании полученных результатов можно рекомендовать заготовку надземной части василька шероховатого в фазе массового цветения.
Чтобы расширить представление о содержании ФЛ и ФКК в объекте нашего исследования, было проведено определение их в надземной части василька шероховатого из 9 мест сбора, территориях Томской и Кемеровской областей. Содержание флавоноидов колеблется в интервале от 1,3 % до 1,8 %, а фенолкарбоновых кислот – 1,3 - 2,0 % ,что свидетельствует о незначительном различии в содержании этих групп БАВ.
Для установления более полного извлечения ФЛ и ФКК были рассмотрены следующие технологические параметры: степень измельчения сырья, соотношение сырья и экстрагента, время, температура и кратность экстракции. Для получения экстракта использовали метод мацерации при нагревании на водяной бане, поскольку применение  таких методов, как реперколяция, перколяция показали низкий выход БАВ из надземной части василька шероховатого.
Наиболее полное извлечение ФЛ и ФКК достигается при степени измельчения 2-4 мм, в соотношении сырья и экстрагента 1:20 (ФЛ – 1,9 %, ФКК – 1,6 %). Уменьшение этого соотношения не приводит к повышению выхода ФЛ и ФКК из сырья. Время  полной экстракции этих групп БАВ из травы василька шероховатого на водяной бане составляет 60 минут, при температуре – 80?C, кратности экстракции, равной 3. Уменьшение этих параметров приводит к снижению содержания ФЛ и ФКК в исследуемом экстракте.
Вывод: таким образом, была изучена динамика накопления флавоноидов и фенолкарбоновых кислот в различных органах василька шероховатого и в зависимости от фазы развития и места сбора растения, подобраны оптимальные условия экстрагирования ФЛ и ФКК из исследуемого растения.

Список литературы:
1.    Растительные ресурсы СССР : цветковые растения, их химический состав, использование; семейства Asteraceae / Под ред. А. А. Федорова. – Л. : Наука, 1987. – 326 с.
2.    Короткова, Е. И. Определение антиоксидантной активности экстрактов растительного сырья методом катодной вольтамперометрии ? Е. И. Короткова, О. А. Аврамчик ?? Химико-фармацевтический журнал. – 2003. – Т. 37, № 9. – С. 55-56. 
3.    Косман, В. М. Количественное экстракционно-спектрофотометрическое определение суммарного содержания гидроксикоричных кислот в присутствии флавоноидов в экстрактивных веществах некоторых лекарственных растений ? В. М. Косман ?? Раст. Ресурсы. - 2001. - № 4 .- С. 123-129.