Свободнорадикальное окисление представляется неотъемлемой составляющей метаболизма организмов, живущих в аэробных условиях. Гомеостаз обеспечивается, как известно, группой ферментов, действующих на разных стадиях процесса, и группой антиоксидантов (АО), способных уничтожать свободные радикалы. Наиболее значимым жирорастворимым АО является а-токоферол (а-ТФ). В литературе описан эффект онкотропии а-ТФ, который в повышенных количествах локализуется в клетках опухолей и стимулирует их деление. К водорастворимым АО относят, в частности, карнозин и глутатион, проявляющие противоопухолевую активность. Считали, что исследование совместного действия указанных жиро- и водорастворимых АО позволит выявить возможность их взаимодействия и понять механизм противоопухолевого действия пептидов.
Целью настоящей работы являлось изучение антиоксидантной активности (АОА) а-ТФ в композиции с карнозином (Р-аланин^-гистидин) и глутатионом (у-глутамилцистеинилглицин). Оценка АОА проводилась in vitro на модели инициированного окисления эмульсии метилового эфира олеиновой кислоты (МО) манометрическим методом. Реакцию окисления МО инициировали за счет термического разложения азобисизобутиронитрила (АИБН) (САИБН =3><10-3 М). В качестве растворителя использовали хлорбензол. Эмульсию жир: вода (1:1) стабилизировали додецилсульфатом. Эффекты ингибирования оценивали по величине периодов индукции (т). Количество а-ТФ с составе всех бинарных смесей оставалось постоянным 2,5х10-4 М. Концентрация карнозина и глутатиона изменялась в диапазоне (10-5 - 10-3) М. Оценивали аддитивное действие составляющих и эффективность смеси в целом. Было показано, что в совместном действии а-ТФ с карнозином, и глутатионом проявляется эффект антагонизма: ингибирующее действие смеси (т2) было неизменно ниже, чем простая сумма периодов торможения индивиуальных составляющих (ZTJ) Количественно эффект антагонизма определяли по уменьшению периодов индукции по формуле Ат = ETJ - или выражали в относительных единицах АТ/ETJ *100%.
Была изучена закономерность изменения величины антагонизма от концентрации карнозина и глутатиона. Для каждого из указанных пептидов получены однотипные зависимости. Показано, что при сравнимых концентрациях пептидов эффект антагонизма в смеси а-ТФ с трипептидом глутатионом в 4,0-4,5 раза выше, чем в смеси а-ТФ с дипептидом карнозином (55-60% и 14% соответственно). Можно полагать, что проявление антагонизма в совместном действии композиций а-ТФ с пептидными соединениями обусловлено образованием комплексов между активной гидроксильной группой а-ТФ и пептидной связью. Как видно, величина эффекта зависит от количества пептидных групп. С увеличением числа пептидных групп величина эффекта антагонизма возрастает. Ранее подобный механизм взаимодействия был установлен нами в системе а-ТФ - дипептидное производное бетулоновой кислоты, включающее в своей структуре 2 пептидные группировки. Известно, что пептиды бетулоновой кислоты проявляют противоопухолевую и противовирусную активность. Величина антагонизма как и в случае с глутатионом составляла 55%. Характер концентрационной зависимости был идентичен закономерностям, установленным для карнозина и глутатиона. Можно полагать, что нами обнаружен механизм связывания а-ТФ пептидными соединениями, снижающий антиоксидантную защиту опухолевых клеток и увеличивающий вероятность их гибели в результате окисления. Развиваемый в настоящей работе подход может оказаться полезным на стадии предварительного отбора потенциальных противоопухолевых агентов.