Новосибирский государственный медицинский университет, г. Новосибирск
Кафедра фармакогнозии с курсом ботаники
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 66-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2007 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
Скачать сборник целиком (формат .PDF, 1,5 мб)
С незапамятных времён человек использовал растения для лечения самых различных заболеваний. Преимуществами лекарственных растений являются их малая токсичность, возможность длительного применения без существенных побочных явлений, природная близость растительных компонентов к человеческому организму. В официальной медицине используют растения, которые входят в Государственную Фармакопею XI как лекарственное растительное сырье. Одним из таких растений является Fragaria vesca L. (земляника лесная). Она используется как источник витаминов и микроэлементов, как потогонное, противовоспалительное и ранозаживляющее средство [2, 3, 5].
Однако в настоящее время интерес представляют не только традиционные лекарственные растения, но и родственные им виды, в которых на основании систематических родственных связей предполагается наличие веществ аналогичного состава и действия. Близкородственными видами F. vesca являются Fragaria viridis Duch (з. зелёная), Fragaria ananassa Duch (з. садовая), Rubus Saxatilis L.(малина каменная) и Rubus caesius L. (м. сизая). Они представляют интерес для исследования и внедрения в медицинскую практику. Также все эти виды имеют широкий спектр применения в народной медицине [4, 5].
В природе F. vesca и близкородственные виды часто произрастают рядом, поэтому в сырье F. vesca могут присутствовать части растений других близких видов. В связи с этим необходимо установить признаки, по которым сырье данных видов будет различаться. В медицине лекарственное растительное сырье часто используют в измельченном виде, поэтому морфологические признаки не востребованы в полной мере. Наиболее часто и широко используются микродиагностические признаки.
Кроме того, сырье лекарственных растений должно быть доброкачественным, то есть отвечать требованиям нормативных документов (фармакопейная статья) по числовым показателям (влажность, зольность, экстрактивные вещества и другие), которые свидетельствуют о чистоте и качестве исследуемого сырья. Поэтому установление числовых показателей являются актуальным.
Целью работы является выявление показателей подлинности и доброкачественности сырья: листьев F. vesca и близких к ней видов.
Объектами исследования служили высушенные растения (надземная часть) исследуемых видов, собранные в различные фазы развития и в разных местах обитания (Новосибирская область, Алтайский край). Микроскопические исследования проводились на микроскопе «Микмед» при увеличениях до 280, 400, 600 раз в проходящем свете. Фиксирование микроскопических признаков производили с помощью рисовального аппарата РА-7У 4,2, а также с использованием цифровой фотографии на микроскопе «Axioskop 2 Plus» на увеличениях до 400Х в проходящем свете. Определение числовых показателей влажности и зольности проводили по общим фармакопейным методикам [1]. Содержание аскорбиновой кислоты определяли титриметрическим способом. В качестве титранта использовали раствор 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия. Хроматографический анализ оксикоричных кислот проводили методом восходящей бумажной хроматографии, системой растворителей являлся раствор кислоты уксусной 2 %. Микроэлементный состав определен методом атомно-эмиссионной спектроскопии.
В результате микроскопического исследования установлено, что для листьев F. vesca характерны 2 типа волосков. Первый тип представлен простыми одноклеточными толстостенными с узкой полостью длинными и короткими волосками, иногда с коричневым содержимым внутри. Ко второму типу относятся железистые головчатые волоски с многоклеточной ножкой и одноклеточной головкой, они были обнаружены у всех исследуемых видов, кроме R. caesius, у которой присутствуют головчатые волоски с многоклеточной головкой и R. Saxatilis, у неё головчатых волосков нет. Клетки эпидермы, прилегающие к основанию волосков, располагаются в виде розетки.
Степень извилистости стенок клеток верхней эпидермы у F. vesca менее выражена чем у R. caesius, но более выражена, чем у F. ananassa и F. viridis (у них стенки клеток верхней эпидермы практически прямостенные), а также R. Saxatilis, у которой стенки клеток верхней эпидермы слабоизвилистые.
Степень извилистости стенок клеток нижней эпидермы F. vesca менее выражена, чем у R. caesius и R. Saxatilis (у данных видов извилистость очень велика). В мезофилле листа у F. vesca присутствуют кристаллические включения, которые представлены друзами и большим количеством одиночных призматических кристаллов (в отличие от F. ananassa, R. Saxatilis и R. caesius, у которых одиночных призматических кристаллов практически нет, в основном присутствуют друзы). Таким образом, в результате исследования были установлены микродиагностические признаки исследуемых видов. Проведено микроскопическое исследование листьев F. vesca из разных мест обитания (Новосибирской области и Алтайского края), выявлено, что в зависимости от экологических условий анатомическое строение растений вида F. vesca меняется незначительно.
При хроматографическом исследовании суммарного извлечения из F. Vesca, произрастающей в Новосибирской области, обнаружено 6 веществ фенольной природы (оксикоричные кислоты), из которых по величинам Rf, свечению в УФ-свете до и после обработки хроматограмм проявителем (раствор натрия гидроксида 10 %) и по цвету пятен после реакции азосочетания (с диазотированной сульфаниловой кислотой) были идентифицированы 5 веществ: галловая, феруловая, хлорогеновая, кофейная, m-оксикоричная кислоты.
Установлено, что содержание аскорбиновой кислоты в траве F. vesca больше, чем в F. viridis и R. Saxatilis. В F. vesca в плодах аскорбиновой кислоты 0,194 %, в листьях – 0,125 %, в черешках – 0,065 %; в F. viridis: в листьях – 0,118 %, в черешках – 0,087 %; в траве R. Saxatilis общее содержание 0,016 %.
По фармакопейным методикам определено содержание влаги в сухом сырье исследуемых видов. В траве F. vesca влажность не более 6 %, F. viridis – 7 %, R. Saxatilis – 8 %. Золы общей в траве F. vesca и R. Saxatilis не более 9 %, F. Viridis – 7 %. Золы, не растворимой в 10 % растворе хлористо-водородной кислоты, не более 0,43 % в траве F. vesca и F. viridis, 0,22 % – в траве R. Saxatilis (от массы сырья).
В надземной части F. vesca (в %/мг) содержатся такие микроэлементы, как марганец – 3300, кремний – 2900, железо – 100, магний – 40, цинк – 20, медь – 10, никель – 0,5.
Таким образом, в результате проведенного исследования выявлены показатели подлинности (микродиагностические признаки) и числовые показатели доброкачественности сырья (влажность, зола общая, зола, не растворимая в растворе кислоты хлористо-водородной 10 %). Установлено, что в надземной части F. Vesca аскорбиновой кислоты больше, чем в других исследуемых видах. Идентифицировано 5 оксикоричных кислот и определен микроэлементный состав в траве F. Vesca, собранной в Новосибирской области. Впервые проведено сравнительное микроскопическое исследование листьев F. vesca, собранной в разных регионах Сибири, а также видов, рассматриваемых в качестве возможных примесей.