|
ПГФА, Пермь
Эта работа опубликована в сборнике "НАУКИ О ЧЕЛОВЕКЕ" – Сборник статей молодых ученых и специалистов /Под ред. Л.М. Огородова, Л.В. Капилевич. – Томск, СГМУ.- 2002.-254 с.
Скачать сборник целиком
Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии широко и успешно применяется для аналитического определения различных лекарственных соединений в лекарственных формах и биологических жидкостях. [1, 2, 3].
Данное сообщение является фрагментом исследования хроматографического поведения антиаллергического средства кетотифена и возможности применения метода ВЭЖХ для его определения.
Ранее было установлено, что спектр поглощения кетотифена в УФ-области характеризуется одной полосой поглощения с одним максимумом 299-300 нм для растворов в 95% этаноле, 0,1 М кислоты хлористоводородной, хлороформе, бензоле [4].
Хроматографический анализ проводили на микроколоночном жидкостном хроматографе «Миллихром» с УФ-детектором, на стандартной аналитической колонке из нержавеющей стали длиной 64 мм и внутренним диаметром 2 мм, заполненной сорбентом Lichrosorb RP-18 с зернением 5 мкм. В качестве подвижной фазы была выбрана смесь ацетонитрила с раствором 0,05 М кислоты хлористоводородной в соотношении 1:1 рН 3,0. Объем вводимой пробы на анализ 5 мкл. Скорость подачи элюента 100 мкл/мин. Скорость диаграммной ленты 10 мм/мин. Время удерживания 5,06. Детектирование проводили при длине волны 300 нм, соответствующей максимуму поглощения раствора кетотифена в элюенте.
Для разработки методики количественного определения построили калибровочный график зависимости площади хроматографического пика от концентрации кетотифена методом абсолютной калибровки. Стандартный раствор кетотифена с концентрацией 100 мкг/мл в элюенте. Линейная зависимость наблюдается в интервале концентраций 0,1-0,5 мкг кетотифена при вводе пробы 1-5 мкл.
Методика была применена далее для количественного определения кетотифена в моче. В условиях модельного эксперимента изолирование кетотифена проводили прямой дробной экстракцией хлороформом из щелочного аммиачного раствора рН 10 после насыщения кристаллическим аммония сульфатом. Хлороформные извлечения отделяли, испаряли досуха. Остаток растворяли в 30 мкл элюента. 5 мкл полученного раствора хроматографировали в ранее выбранных условиях. По предлагаемой методике удавалось определить до 95% (из 2 мкг, добавленных к пробе мочи) кетотифена.
Проведенные исследования позволяют сделать вывод о возможности использования метода ВЭЖХ для определения содержания кетотифена в моче.
Литература
1. Еремин С. К., Изотов Б.Н. Применение высокоэффективной жидкостной хроматографии в химико-токсикологическом анализе лекарственных соединений // Ж. аналитической химии. - М., 1988. - Т. ХLIV. - С. 5 - 19.
2. Применение высокоэффективной жидкостной хроматографии в анализе лекарственных препаратов / А.П.Арзамасцев, Д.Б.Никуличев, Д.М.Попов и др.// Хим.-фармац. журн. - 1989. - Т. 23, № 4. - С. 86 - 91.
3. Лайпанов А.Х., Серегина Е.В., Дементьева Н.Н. Применение высокоэффективной жидкостной хроматографии в фармацевтическом анализе производных тропана //Фармация. - 1995. - № 2. - С. 36 - 39.
4. Хомов Ю.А., Говорова Е.Г., Кокшарова Н.В. УФ-спектрофотометрический метод анализа кетотифена в биологических субстратах // Молодые ученые Волго-Уральского региона на рубеже веков. Материалы юбилейной науч. конф. - Уфа, 2001. - С. 319 - 320.
|
