Амурская государственная медицинская академия (г. Благовещенск)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы VI конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2005. – 120 с.
Скачать сборник целиком
Цель работы заключалась в изучении морфологических, морфометрических и биохимических показателей кожи у крыс для оценки эффективности эмоксипина и низкоэнергетического лазерного излучения, применяемых на фоне общего охлаждения организма.
Материал и методы. Объектом нашего исследования служили кожные покровы ушей и лапок беспородных половозрелых крыс-самцов, которые были разделены 13 экспериментальных групп. Животных подвергали общему охлаждению при температуре - 15°С в течение 3, 7, 14 дней по 3 часа ежедневно. До начала охлаждения ежедневно проводили облучение кожи ушей и лапок импульсным красным лазером с длиной волны 0,63 мкм или введение эмоксипина внутрибрюшинно 1% раствор из расчетов 10 мг/кг в течение 3, 7, 14 дней, а также сочетанное применение лазера и эмоксипина в вышеперечисленные сроки.
Гистологическое исследование проводились на парафиновых и полутонких срезах. Применялись окраски: гематоксилин Бемера - эозин, орсеин по Унны-Тенцера, осмий-иодид цинка по Акерту и Сендри, толуидиновый синий. Морфометрическое исследование включало изучение периметра, площади, длины, ширины ядра и всей клетки тканевых базофилов, клеток Лангерганса [2]. Вычислялся показатель целости базальной мембраны и степени вакуолизации клеток слоев эпидермиса. Для оценки процессов перекисного окисления липидов и анти-оксидантной системы кожных покровов определяли содержание диеновых коньюгатов [3], гидроперекисей липидов [1]. и содержание витамина Е в коже.
Результаты. При исследовании выявлен высокий процент вакуолизации клеток эпидермиса и значительное нарушение целостности базальной мембраны при действии холода в течение 3, 7 и 14 дней в коже лап и ушей. Данные эффективности лазера и эмоксипина представлены в таблице.
Действие холодового фактора вызвало достоверное уменьшение площади клетки и ядра клеток Лангерганса, тканевых базофилов кожи лап и ушей. Наибольшая реакция со стороны тучных клеток отмечена при действие холода в течение 3 дней на фоне применения лазера, при 7 днях - эмоксипина. При 14 днях положительный эффект выявлен при комбинированном действии лазера и эмоксипина. Изменение морфометрических показателей тучных клеток кожи уха на фоне действия холодового фактора в течение 3, 7 дней выявлен при применении лазера, а при 14 днях холодового воздействия наиболее эффективно сочетанное воздействие лазера и эмоксипина. Изменения в клетках Лангерганса в коже лап были аналогичны тучным клеткам. В коже ушей в клетках Лангерганса показатели достоверно повышались при 3, 7 днях облучением лазером, а при 14 днях охлаждения эффектом сочетания лазера и эмоксипина.
Таблица
Эффективность лазера и эмоксипина при действие холодового фактора
|
|
Холод+лазер |
Холод+эмоксипин |
Холод+лазер+эмоксипин |
|
3дня |
7дней |
14дней |
3дня |
7дней |
14дней |
3дня |
7дней |
14дней |
Вакуолизация
клеток слоев эпидермиса |
Лапа |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Бс |
0 |
4 |
0 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
Шс |
|
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
Зс |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
Ухо |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Бс |
|
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
0 |
Шс |
! |
4 |
0 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
Зс |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
Целостность
базальной мембраны |
Лапа |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Цбм |
0 |
0 |
0 |
! |
0 |
! |
0 |
! |
! |
Србм |
0 |
0 |
0 |
4 |
0 |
4 |
0 |
4 |
|
Всрбм |
0 |
0 |
0 |
|
0 |
4 |
! |
4 |
4 |
Ухо |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Цбм |
0 |
4 |
! |
! |
! |
! |
4 |
0 |
! |
Србм |
0 |
! |
4 |
4 |
0 |
4 |
0 |
0 |
4 |
Всрбм |
! |
0 |
0 |
4 |
4 |
0 |
! |
4 |
4 |
Примечание: Бс-базальный слой, Шс-шиповатый слой, Зс-зернистый слой, Цбм - целая базальная мембрана, Србм - среднеразрыхлен-ная базальная мембрана, Всрбм - высокая степень разрыхленности базальной мембраны, | - достоверное повышение, 4 - достоверное понижение, 0 - отсутствие достоверности.
Количество эластических волокон при охлаждении в течение 3, 7, 14 увеличивалось. В коже лапки содержание эластических волокон приближается к картине характерной для интактных животных на фоне введении эмоксипина при охлаждении в течение 3 дней, а при охлаждении в течение 7 и 14 дней наиболее эффективным было сочетанное использование лазера и эмоксипина. Положительный эффект коррекции в дерме в коже уха в течение 3 дней просматривается при сочетанном использовании лазера и эмоксипина. При охлаждении в течение 7, 14 дней в коже уха позитивная динамика выявилась только при введении эмоксипина.
Биохимическое исследование в коже лапок на фоне охлаждения в различные сроки (3, 7, 14 дней) позволило выявить повышение уровня показателей антиоксидантной защиты и достоверное снижение количества продуктов реакции перекисного окисления липидов при применение эмоксипина или сочетанного действия лазера и эмоксипина. Аналогичная динамика изменений показателей была выявлена в коже ушей крыс только на фоне комбинированного применения лазера и эмоксипина при сроках охлаждения 3 и 7 дней.
Вывод. Наибольший эффект действия лазера на структуры кожного покрова лап и ушей выявляется при охлаждении в течение 3 дней, а при более продолжительном охлаждении необходимо применение или эмоксипина или комбинация лазера и эмоксипина.
Литература:
1. Бородин Е. А. Антиокислительный эффект фосфолипидов // Нейрофармакология на рубеже двух тысячелетий. - С-Пб., 1992. - Т. 1. - С. 68.
2. Программа для ЭВМ - Система количественного анализа изображений "Морфометр" / А. А. Кудлаев, Ю. С. Наянов, А. Филиппов,
С.С. Целуйко. - М., ЦНИИГАиК, 1991.
3. Стальная И. Д. Метод определения диеновых коньюгаций ненасыщенных жирных кислот // В кн. Орехович В. Н. Современные методы в биохимии. - М.: Медицина, 1977. - С. 63-64.
|