Известно, что заживление полнослойных кожных ран на спине у крыс и мышей всегда заканчивается формированием эпителизированного соединительного регенерата, морфологический субстрат которого может варьировать в зависимости от возраста животного, площади иссекаемого кожного лоскута, наличия механических раздражителей в различные периоды заживления кожной раны, введения в организм животного некоторых веществ [1]. Цель работы: изучить особенности морфогенеза послеоперационных кожных рубцов на спине у крыс в динамике.
В эксперименте использовались 40 крыс-самцов массой 180-200 г. Всем животным под эфирным наркозом наносили полнослойные прямоугольные раны размером 5x4 см2 в центре спины в продольном направлении. Половине животных тотчас осуществлялось подшивание краев раны к мышцам непрерывным обвивным швом нитью кетгута (2-я группа), у других животных подшивание не проводилось (1-я группа). В сроки с 30-х-95-е сутки эксперимента проводился забор материала для гистологического исследования. Ткани фиксировали в жидкости Карнуа и 12 % растворе нейтрального формалина. Срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, по Ван-Гизону, толуидиновым синим, альциановым синим на гликозаминогликаны по Стидмену (рН==1,0; 2,5), орсеином по Унна-Тенцеру, брилиантовым зеленым и пиронином по Браше, а также ШИК-реакцией. В качестве нейроморфологических методов применялись импрегнация азотнокислым серебром по Билыповскому-Грос в модификации А. И. Рыжова (1960), а также окраска Суданом черным на миелин.
Макроскопически у животных 1-й группы в течение первой недели эксперимента за счет активных механизмов контракции краев раны площадь ее уменьшилась в среднем на 2/3 от величины первоначального дефекта. Формирование рубца у животных 1-й группы с его полной эпителизацией заканчивалось к 30-му дню с момента операции. У 2-й группы крыс за счет фиксации краев раны к подлежащим тканям контракция ограничивалась и площадь раневого дефекта оставалась фактически неизменной на протяжении 14-15 дней в послеоперационном периоде. Таким образом, если у животных 1-й группы заживление ран осуществлялось путем концентрического рубцевания по И. И. Краузе (1949), то у крыс 2-й группы имело место «заживление ран от эпителизации». Длительность процесса заживления раны у животных 2-й группы увеличилась до 55-х суток от момента операции. Размеры регенератов у животных 1-й группы на момент формирования рубца составили: длина - 48+3 мм; ширина - 9+1 мм; площадь рубца занимала 21-25 % площади удаленного лоскута. У крыс 2-й группы - длина рубца на момент его формирования - 49±3 мм, ширина 15+2 мм, соотношение площади рубца к размерам удаленного лоскута - 32-35 %.
Микроскопически на 30-е сутки опыта у животных 1-й группы эпителизация раны почти завершена. Имеются лишь отдельные участки кожи, где наблюдается наползание регенерирующего эпителия либо обнаруживается очень тонкий эпителиальный пласт, состоящий из 2-х - 3-х рядов клеток уплощенной формы. В то время как в экспериментах с подшиванием краев раны на 55-е сутки после операции эпителизация явно не завершена, по краям дефекта наблюдается клиновидное наползание эпителиального пласта, а в различных участках обнаруживаются фокусы эпителизации за счет сохранившихся камбиальных клеток придатков кожи. В этих участках эпителиоциты располагаются хаотично, не упорядоченно и не формируют послойную организацию, характерную для нормального эпителия. Часть эпителиальных клеток характеризуются кариопикнозом. Среди эпителиоцитов выявляются немногочисленные лейкоциты. На 70 - 90-е сутки после операции эпителизация завершена у животных обеих экспериментальных групп. Однако у животных 2-й группы встречаются участки истонченного эпителия, характеризующиеся нарушениями архитектоники слоев.
В собственно коже в месте рубца у животных 1-й группы на 30-е сутки эксперимента выявляются различной толщины коллагеновые волокна. Среди клеточных элементов преобладают фибробласты различной степени зрелости и малодифференцированные клетки. Плотность кровеносных сосудов в центральных участках рубца не высока, придатки кожи (сальные, потовые железы и волосы) в области рубцового регенерата отсутствуют. У крыс 2-й группы на момент формирования рубца дерма представлена преимущественно коллагеновыми фуксинофильными волокнами, но более толстыми и грубыми, чем было описано ранее, часть из них находится в состоянии мукоидного набухания. Придатки кожи не определяются. Клеточный состав представлен многообразием активно функционирующих клеток фибробластического ряда. На активность фибробластов указывает накопление в их цитоплазме РНК.
На 90-е сутки эксперимента у животных 2-й группы сформировалась грубая рубцовая ткань, представленная толстыми фуксинофильными волокнами. Между волокнами располагаются немногочисленные клеточные элементы, преимущественно фиброциты. Из придатков кожи обнаруживаются единичные сальные железы. В опытах без подшивания краев кожной раны на 70-е сутки с момента операции объем рубца значительно меньше. Наблюдается восстановление придатков кожи в значительно большем объеме, а сформировавшийся эпителий, как правило, имеет обычное строение. При окраске орсеином на 30-55-е сутки эксперимента у животных обеих групп не удалось выявить эластических волокон в рубцовой ткани. На 70-е сутки у животных 1-й группы определялись эластические волокна вокруг вновь сформированных придатков кожи. В то время как у крыс 2-й группы в сроки до 90 суток от момента формирования рубца эластических волокон не обнаружено. У животных обеих групп в различные сроки эксперимента в коже, окружающей рубцы, определяются эластические волокна в обычном количестве. При окраске альциановым синим у животных с подшиванием краев раны наблюдалось преобладание гиалуроновой кислоты, слабокислых сульфатированных мукоидных веществ и сиаломуцинов в межклеточном веществе. Тканевые базофилы, находясь между коллагеновыми волокнами, приобретают распластанный вид и вытянутую форму. Они локализуются неравномерно и преобладают в виде скоплений в субэпидермальном и глубоком слоях дермы на границе с подкожной клетчаткой. Исследование нейроморфологии рубцов выявило следующие закономерности. На момент формирования рубца у животных обеих групп нервные волокна определяются на границе с окружающей кожей, они ориентированы в сторону рубца и расположены параллельно коллагеновым волокнам. Первыми в рубце появляются безмиелиновые нервные волокна и только позднее миелиновые. На 70-95-е сутки эксперимента выявляются реактивные изменения нервных элементов в виде дисхромии осевых цилиндров, грубых варикозных утолщений, наплывов нейроплазмы. Встречаются деструктивные изменения в форме фрагментации и мелкоглыбчатого распада осевого цилиндра. Выше описанные изменения преобладают в более поздние сроки в рубцах 2-й группы животных.
Таким образом, искусственное ограничение контракции полнослойных кожных ран за счет шовной фиксации краев дефекта к дну раны существенно изменяет механизмы регенерации кожи. В результате заживления «со дна раны» формируется грубый рубец обширной площади и избыточного объема, который имеет признаки патологического гипертрофического рубца кожи человека.