Актуальность. Необходимым условием функционирования красных клеток крови является изменение их объёма. Восстановление объёма эритроцитов происходит благодаря изменению транспорта одновалентных ионов через мембрану клеток. Показано, что набухание эритроцитов человека, крысы и кролика активирует K+,Cl- -котранспорт. Сжатие эритроцитов крысы и кролика приводит к активации Na+/H+-обмена и Na+,K+,2Cl--котранспорта [2]. Не исключено, что Са2+ - активируемые калиевые каналы (К+(Са2+)-каналы) эритроцитов также участвуют в ауторегуляции объема этих клеток.
Цель: Изучить изменения объёма эритроцитов крысы в гетероосмотических средах в условиях активации Са2+ - зависимых калиевых каналов.
Материал и методы. В работе использовалась кровь белых беспородных крыс-самцов массой 250 ? 300 г. Процедура получения упакованных эритроцитов: после центрифугирования (1000g, 5 мин, 40С) плазму и клетки белой крови удаляли, а эритроциты дважды промывали 3 частями изоосмотического раствора NaCl (150 мМ), содержащего 5 мМ Na-фосфатный буфер (рН 7,4) при тех же условиях центрифугирования. Использованные растворы:
1. Среда отмывания эритроцитов: 5 мМ Na-фосфатный буфер в150 мМ NaCl.
2. Среда инкубации эритроцитов:
1) изоосмотическая среда 320 мосм: 150 мМ NaCl, 1 мМ KCl, 1 мM MgCl2, 10 мM глюкоза.
2) гипоосмотическая среда 220 мосм: 100 мМ NaCl, 1 мМ KCl, 1 мM MgCl2, 10 мM глюкоза.
3) гиперосмотическая среда 420 мосм: 100 мМ сахароза, 150 мМ NaCl,      1 мМ KCl, 1 мM MgCl2, 10 мM глюкоза.
4) гиперосмотическая среда 520 мосм: 200 мМ сахароза, 150 мМ NaCl,      1 мМ KCl, 1 мM MgCl2, 10 мM глюкоза.
Для регистрации изменений объёма эритроцитов в условиях варьирования осмолярности среды и при активации К+(Са2+)-каналов, использовался метод, предложенный в работе [1], основанный на том, что при изменении объёма эритроцитов изменяется светорассеяние суспензии клеток.
Результаты. Перенос эритроцитов в гипоосмотическую среду приводил к снижению показателя светорассеяния суспензии эритроцитов, а инкубация эритроцитов в гиперосмотических средах вызывала увеличение этого показателя (Рис.1), что свидетельствовало о набухании и сжатии клеток крови, соответственно. Внесение Са2+- ионофора А23187 (0,5 мкМ) в суспензию клеток приводило к увеличению показателя светорассеяния до 1,443±0,0069 (n=10, p<0,01) в изоосмотической среде, что свидетельствовало о сжатии клеток (Рис.1.). В гипоосмотических условиях внесение Са2+- ионофора А23187 также приводило к увеличению светорассеяния суспензии клеток до 1,285±0,007, (Рис.1.). Внесение Са2+-ионофора А23187 в суспензию эритроцитов, инкубированных в  гиперосмотической среде так же оказывало значительное влияние на светорассеяние суспензии (Рис.1). Причиной обнаруженного эффекта может быть открывание К+(Са2+)-каналов. Са2+-ионофор А23187 обеспечивает входящий поток ионов кальция в эритроциты, что приводит к открыванию К+(Са2+)-каналов. Утечка ионов калия из эритроцитов приводит к выходу из них воды, и, следовательно, к сжатию клеток [3].
Подтверждением участия К+(Са2+)-каналов в уменьшении объёма эритроцитов, инкубированных в гетероосмотических средах, служат данные об устранении этого эффекта в присутствии 3 мкМ клотримазола – блокатора этих каналов.
Выводы:   Са2+ - активируемые калиевые каналы участвуют в изменении объема эритроцитов крысы.

Список литературы:
1.    Орлов, С.Н. / О механизме регуляции транспорта ионов через плазматическую мембрану при изменении объема клетки. / С.Н. Орлов, Н.И. Покудин, Г.Г. Ряжский и др. // Биологические мембраны.-1988.-Т.5, №10.-С. 1030-1041.
2.    Орлов, С.Н. / ?- адренергические катехоламины активируют Na+, K+- насос эритроцитов карпа независимо от стимуляции Na+/H+- обмена. / С.Н. Орлов, Г.А. Скрябин // Докл. АН СССР. – 1991. – Т. 316, №4. – C. 997 – 1000.
3.    Halperin, J.A. / Ca2+- activated K+ efflux limits complement - mediated lysis of human erythrocytes / J.A. Halperin, C. Brugnara, A. Nicholson - Weller // J. Clin. Invest. - 1989. - V. 83. - P. 1466 - 1471.