|
ГОУ ВПО СибГМУ Росздрава, (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы Х конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М.
Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2009. – 166 с.
Скачать сборник целиком
Экспериментальные и клинические наблюдения свидетельствуют о том, что окислительный стресс является важным патогенетическим фактором возникновения инсулинорезистентности при сахарном диабете (СД) 1 и 2 типа. Повышение содержания свободных жирных кислот в кровеносном русле при нарушении метаболизма триацилглицеролов (ТАГ) способствует снижению чувствительности к инсулину мышц, а так же других тканей и органов. Одним из важных эффектов инсулина является ин-гибирование липолитической активности в жировых клетках.
Целью настоящей работы являлось исследование активности базального и стимулированного ли-полиза и эффекты на него инсулина в адипоцитах крыс с аллоксановым диабетом.
Исследования были проведены на 18 беспородных белых крысах-самцах массой 210±25 г. Экспериментальный СД у животных вызывали инъекцией аллоксана (90 мг/кг четерехкратно). Через 2 недели после введения препарата животных усыпляли СО2-асфиксией. В сыворотке крови определяли содержание глюкозы и инсулина. Из эпидидимальной жировой ткани выделяли адипоциты с использованием коллагеназы по методу M. Rodbell, 1964 [1]. Адипоциты инкубировали в СО2-инкубаторе 3 ч в Кребс-Рингер буфере с добавлением 139 мМ глюкозы и 7 % бычьего сывороточного альбумина (V-фракция). Интенсивность липолиза оценивали по концентра - ции глицерола в среде инкубации адипоцитов, определяемого ферментатив - ным методом. Стимуляцию липолиза осуществляли р2-агонистом изопротеренолом в конечной концентрации 1 мкМ. Об интенсивности перекисного окисления в жировой ткани судили по содержанию продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-активные продукты). Результаты обрабатывали с помощью непараметрического критерия Краскала-Уолиса.
В ходе экспериментов было установлено, что четырехкратная инъекция аллоксана (90 мг/кг) приводит к развитию у животных СД с выраженной гипергликемией (19,2±1,4 ммоль/л, в контроле -5,8±0,4 ммоль/л) и гипоинсулинемией (9,2±1,6 мкЕд/мл, в контроле - 25,5±3,2 мкЕд/мл). В жировой ткани животных с аллоксановым диабетом увеличивается содержание ТБК-активных продуктов, что свидетельствует об активации свободнорадикального окисления (82,8±9,1 нмоль/г ткани, в контроле - 51,4±5,8 нмоль/г ткани).
В адипоцитах крыс с аллоксановым СД наблюдается достоверное увеличение спонтанного липо-лиза (р<0,05), о чем свидетельствует более высокое содержание глицерола в среде инкубации по сравнению с контролем (рис.1). Добавление инсулина (1 нМ) не оказывает ингибирующего влияния на повышенный спонтанный липолиз у животных с экспериментальным СД (р>0,05). Изопротеренол (Р2-агонист) стимулирует липолиз в адипоцитах контрольных животных в 3,7 раза и в 1,9 раза у животных с СД.
Рис. 1. Влияние инсулина на спонтанный и стимулируемый изопротеренолом липолиз в адипоцитах крыс с аллоксановым диабетом (— контроль;^ аллоксановый диабет)
Известно, что активация ц-АМФ зависимой фосфодиэстеразы в адипоцитах под действием инсулина снижает содержание внутриклеточного ц-АМФ, что вызывает инактивацию ц-АМФ зависимой протеинкиназы и дефосфорилирование гормончувствительной липазы с последующим снижением ее активности. Инсулин (1 нМ) ингибировал стимулированный изопротеренолом липолиз в адипоцитах контрольных крыс (26%) (рис.1). В тоже время в жировых клетках крыс с экспериментальным СД ингибирую - щий эффект гормона на липолиз выражен в меньшей степени (13%).
Таким образом, в адипоцитах крыс с аллоксановым СД повышен базальный липолиз и увеличен уровень нечувствительного к инсулину стимулированного изопротеринолом липолиза.
Поверхность эндогенных липидных капель в адипоцитах покрыта монослоем фосфатидилхолина (ФХ), который влияет на доступность ТАГ для действия липазы, и главным образом определяет активность базального липолиза [2]. Можно предполагать, что окисление полиненасыщенных жирных кислот в составе фосфолипидов в условиях окислительного стресса в жировой ткани при экспериментальном СД сопровождается снижением концентрации ФХ на поверхности жировых капель и приводит к активации базального липолиза. В тоже время, ингибирование стимулированного изопро-теренолом липолиза может быть обусловлено снижением активности аденилатциклазы, чувствительной к продуктами свободнорадикального окисления.
Окислительный стресс в жировой ткани при экспериментальном сахарном диабете играет определенную роль в повышении содержания свободных жирных кислот в крови, которые способствуют снижению утилизации глюкозы, секреции инсулина и инсулинорезистентности.
Список литературы:
1. Rodbell, M. Metabolism of isolated fat cells / M. Rodbell // Biol. Chem. - 1964. - Vol. 239. - P. 375-380.
2. Tsujita, T. Basal lipolysis in epididymal fat cells from streptozotocin-induced diabetic rats/ T. Tsuji-ta // Nutr. Sci. Vitaminol. (Tokyo) - 2006. - Vol.52. - P. 47-53.
Похожие статьи:
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ТКАНЕВЫХ БАЗОФИЛОВ У КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ АЛЛОКСАНОВЫМ ДИАБЕТОМ
ИЗМЕНЕНИЕ МОРФОФУНКЦ. СОСТОЯНИЕ ДЕРМАЛЬНЫХ БАЗОФИЛОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ АЛЛОКСАНОВОМ ДИАБЕТЕ
УРОВЕНЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ ПРИ ИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА У КРЫС
О ПРОТЕКТИВНОМ ЭФФЕКТЕ АНТИОКСА В ОТНОШЕНИИ РАЗВИТИЯ АЛЛОКСАНОВОГО ДИАБЕТА
ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНОГО 0-ИЗОБОРНИЛФЕНОЛА НА ПОКАЗАТЕЛИ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В ТКАНЯХ ГОЛОВНОГО МОЗГА У КРЫС ПРИ ИШЕМИИ
ВЛИЯНИЕ НИТРОПРУССИДА НАТРИЯ НА РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ЭРИТРОЦИТОВ КРЫС
РОЛЬ СЕРОВОДОРОДА В РЕГУЛЯЦИИ СОКРАТИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ГЛАДКОМЫШЕЧНЫХ КЛЕТОК АОРТЫ КРЫСЫ
ВЛИЯНИЕ ДИАЗЕПАМА НА АКТИВНОСТЬ КАРБОКСИПЕПТИДАЗЫ Н В ТКАНЯХ САМЦОВ КРЫС
ВОЗДЕЙСТВИЕ ГИПОХЛОРИТА НАТРИЯ НА ПАРАМЕТРЫ СИСТЕМЫ «ПОЛ-АНТИОКСИДАНТЫ» БРЮШИНЫ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПЕРИТОНИТЕ У КРЫС
|
