Сибирский государственный медицинский университет

Эритроцит является высокоспециализированной клеткой организма, выполняющей важную газотранспортную функцию. Участие красной кровяной клетки в газообмене требует поддержание ее формы в виде двояковогнутого диска, а также способности к деформации, позволяющей клетке двигаться по капиллярам. Однако по структуре поверхности эритроциты даже здорового человека представляют собой довольно гетерогенную популяцию, что связанно с комплексом как эндогенных, так и экзогенных факторов окружающей среды.

    Впервые  Bessis et al. (1965) предложили классификацию форм эритроцтов, основанную на изменениях их поверхностей:  дискоцит (нормальный двояковогнутый эритроцит), эхиноцит (диск с неровным контуром и с выростами), стоматоцит (куполообразная клетка), сфероцит (эритроцит в форме сферы), дакриоцит (эритроцит в форме капли слезы), дрепаноцит (эритроцит в форме серпа), кератоцит (в форме рога),эллиптоцит (в форме овала), мегаллоцит (овальный макроцит) и др.    В дальнейшем эта классификация претерпевала ряд дополнений (Новицкий с соавт., 2004).    Исследованиями многих ученых было установлено, что при самых разнообразных заболеваниях у человека (рак, шизофрения, клещевой энцефалит наблюдается существенное изменение морфологии эритроцитов, что может служить одним из дополнительных диагностических критериев тяжести течения заболевания (Крымский с соавт,1989; Новицкий с соавт., 2004).

     Имеются данные, свидетельствующие о том, что при некоторых инфекционных заболеваниях может существенно изменяться морфология эритроцитов, что  нарушает процессы газообмена в организме больного (Новицкий с соавт., 2004). При этом имеются сведения о том, что  течение заболевания  и процесс выздоровления различен у лиц различающихся по активности ферментов глутатионтрансферазы.

    В связи с изложенным целью настоящего исследования было изучение морфологических особенностей эритроцитов периферической крови у инфекционных больных с различной этиологией  заболевания: описторхъозом и иксодовым клещевым боррелиозом, в связи с их принадлежностью к различным генотипам по аллелям генов GSTM1 и GSTT.

Материал и методы

   Цитологически изучены эритроциты периферической крови у 26 человек  больных описторхозом и инфекционным клещевым боррелиозом (ИКБ). В качестве контроля использована крови 6 здоровых доноров.

Кровь для исследование была взята в момент поступления больного на лечение в клиники Сибирского государственного медицинского университета. Микроскопирование мазков крови проводили под микроскопом фирмы Carl Zeiss при увеличении 10ок Х 100об. Мазки крови окрашивали стандартно красителем Романовского-Гимза. Принадлежность обследованных к различным вариантам генотипов по аллелям генов GSTM1 и  GSTT было осуществлено на базе НИИ  экологии  человека РАН (г.Кемерово). Кроме того у больных был осуществлен комплексный стандартный анализ состояния организма.   Классификацию патологических изменений эритроцитов была проведена на основе рекомендаций Новицкого с соавт. (2004). Все результаты были обработаны статистически по Стьюденту и Манна-Уитни, а также методом ранговой корреляции по Спирмену.

Результаты исследования и их обсуждение

     Как свидетельствуют полученные нами данные в крови больных описторхозом  42,8± 6,8, а у ИКБ -56,1±5,0%  эритроцитов имеют измененную архитектонику, у здоровых лиц эта цифра не превышала 10%. (в обоих случаях Р<0,01). Среди патологически измененных клеток у больных описторхозом превалировали  эхиноциты – 22,6±6,1% (в контроле – 1,6±0,5%; Р<0,01), микроциты (6,5±0,7%; в контроле 3,5±0,2%; P<0,01) и дакриоциты (3,7±0,6%; в контроле – 0,4±0,2%; P<0,01).  Кроме того у больных достоверно чаще  (P<0,05) чем у здоровых наблюдались следующие патологические изменения клеток:  стоматоциты, акантоциты и дегенеративные изменения.

   Анализ морфологии эритроцитов у больных ИКБ позволил выявить преобладание следующих патологий. Как и при описторхозе основными типами изменений поверхности эритроцитов были клетки:  эхиноциты, дакриоциты, стоматоциты,  акантоциты

 и дегенеративно измененные клетки.  Увеличения числа макроцитов не было отмечено.

    Полученные данные свидетельствуют, что лица с нормальным  гомозиготным или гетерозиготным  генотипом GSTM1  (+/+  или 0/+) имеют существенно повышенный  уровень патологически измененных эритроцитов.  Так у лиц с мутантным генотипом

   (0/0) число эхиноцитов составило 17,8%, а у содержащих номальную аллель 27,3% (P<0,05); дакриоцитов соответственно 3,4 и 5,6% (P<0,05); стоматоцитов 0,8 и 5,8% (P<0,01). Такой закономерности в отношении генов GSTT  нами не установлено.

    Корреляционный анализ свидетельствует, что при описторхозе частота патологически измененных эритроцитов может быть связана с уровнем в крови мочевины ( дакриоциты), щелочной фосфотазы (микроциты,  стоматоциты и дегенеративно измененные эритроциты), ферментов печени: АЛТ (макроциты) и АСТ (дакриоциты), числом эозинофилов (эхиноциты), СОЭ (микроциты) и лимфоцитов (дегенеративные изменения эритроцитов). Не обнаружено достоверной связи между числом патологически измененных эритроцитов и возрастом пациента, а также уровнем билирубина и  гемоглобина в его крови.

     Изменения морфологии эритроцита может  быть по мнению Элойа (2004)  связано с локальным сопротивлением мембраны к изгибу, или же, как это наблюдается у дрепаноцита и кератоцита, с наличием генетически аномального комкообразного гемоглобина, например при при серповидноклеточной анемии у человека. В связи с этим изменения в активности энзимов, в частности  ферментов глутатион S трансфераз,  и могут приводить к локальным диффузиям в архитектонике мембран и как следствие приводить к изменению конфигурации эритроцита. В частности White and Plishker (1983) считают что этот фермент при определенных обстоятельствах может нарушать архитектонику  эритроцитов воздействуя на кальциевые структуры мембран, что возможно, мы и наблюдаем при некоторых инфекционных заболеваниях.