Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск
Актуальность изучения особенностей формирования многоядерных фагоцитов, играющих важную роль в образовании очагов хронического воспаления [4; 6], объясняется широким распространением гранулематозных заболеваний [1; 2; 7]. Известно, что в процессе образования многоядерных клеток происходит изменение локализации их ядер [5]. Поскольку полинуклеарные клетки различных типов разнятся по расположению ядер [3; 5], то представляется логичным использовать признаки локализации ядер в качестве критериев идентификации определенных клеточных форм.
Цель исследования состояла в изучении характера изменения локализации ядер у полинуклеарных макрофагов в зависимости от сроков инкубации культур перитонеальных клеток и их генетической принадлежности. Клетки извлекали из брюшной полости мышей линий C57BL/6 и CBA. В соответствии с генетической принадлежностью клеток были сформированы две группы культур. Результаты оценивали на 48, 72, 96 и 120 часов инкубации. Выделяли морфологические варианты клеток по признаку локализации ядер, и определяли количество полинуклеарных макрофагов с периферическим и иным расположением ядер.
Исходя из результатов исследования, было установлено, что представляется возможным выделить три основных варианта многоядерных клеток по преимущественному расположению ядер. К первому наиболее часто встречающемуся варианту относили полинуклеары с периферическим расположением ядер, причем в центральной зоне цитоплазмы находился уплотненный участок, вероятно, содержащий комплекс внутриклеточных структур. Для подавляющего большинства этих клеток было характерно наличие значительного количества секреторных гранул с периферической локализацией.
Полинуклеары, принадлежавшие ко второму морфологическому варианту, имели периферическое расположение ядер и обширную зону цитоплазмы, заполненную секреторными гранулами. Следует отметить, что ядра находящиеся в периферической зоне цитоплазмы могли быть смещены к одному из полюсов клетки, либо одно или несколько ядер располагались оппозитно по отношению другим. Указанные особенности, скорее всего, являлись следствием перестройки элементов цитоскелета. Клетки, отнесенные к третьему варианту, содержали ядра, хаотично распределенные по всему объему цитоплазмы.
Полинуклеарные макрофаги, независимо от сроков инкубации, имели преимущественно периферическое расположение ядер и повышенную секреторную активность в культурах обеих групп. На 24, 48 и 72 часа экспозиции достоверных межгрупповых различий в численности клеток с периферической локализацией ядер - не отмечали. Через 96 часов инкубации (не зависимо от генетической принадлежности клеток) таких макрофагов содержалось в среднем на 26,5 % меньше, чем в исходный период наблюдения (на 24 часа). При увеличении сроков культивирования до 120 часов данная тенденция сохранялась.
Таким образом, было выделено три морфологических варианта многоядерных макрофагов, присутствующих в культурах перитонеальных клеток. Численность полинуклеарных макрофагов с периферическим расположением ядер имела на первый взгляд парадоксальную тенденцию к уменьшению на поздних сроках экспозиции, что не зависело от генетической принадлежности культур перитонеальных клеток. Этот процесс может объясняться действием накопившихся в культуральной среде токсичных продуктов метаболизма, вызывающих гибель указанных клеток. Кроме того, не исключено влияние продуктов метаболизма на белки цитоскелета, в результате чего меняется характер перестройки его элементов, обусловливающий изменение локализации ядер. Для уточнения этих аспектов требуется проведение дальнейших исследований.
Данные результаты могут быть использованы при разработке моделей in vitro для изучения характера формообразования многоядерных макрофагов, что необходимо для понимания процессов, протекающих в очаге воспаления, и имеет значение при
создании эффективных методов коррекции хронических воспалительных заболеваний.
Список литературы:
1. Asilian A., Faghihi G., Momeni A., Radan M.R., Meghdadi M., Shariati F. Leprosy profile in Isfahan (A province of Iran) // Int. J. Lepr. Other. Mycobact. Dis. - 2005. - V. 73. - № 2. - Р. 129-130.
2. Basta P.C., Coimbra C.E., Camacho L.A., Santos R.V. Risk of tuberculous infection in an indigenous population from Amazonia, Brazil // Int. J. Tuberc. Lung. Dis. - 2006. - V. 10. - № 12. - Р. 1354-1359.
3. Chambers T.J. Multinucleated giant cells // J. Pathol. - 1978. - V. 126. - № 3. - Р. 125-148.
4. James S.J., Pogribna M., Miller B.J., Bolon B., Muskhelishvili L. Characterization of cellular response to silicone implants in rats: implications for foreign-body carcinogenesis // Biomaterials. - 1997. - V. 18. - № 9. - Р. 667-675.
5. Mariano M., Spector W.G. The formation and properties of macrophage polycaryons (inflammatory giant cells) // J. Pathol. - 1974. - V. 113. - № 1. - P.1-19.
6. Mustafa T., Bjune T.G., Jonsson R., Pando R.H., Nilsen R. Increased expression of fas ligand in human tuberculosis and leprosy lesions: a potential novel mechanism of immune evasion in mycobacterial infection // Scand. J. Immunol. - 2001. - V. 54. - № 6. - Р. 630-639.
7. Sobero R.A., Peabody J.W. Tuberculosis control in Bolivia, Chile, Colombia and Peru: why does incidence vary so much between neighbors? // Int. J. Tuberc. Lung. Dis. - 2006. - V. 10. - № 11. - Р. 1292-1295.
|