Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск, Россия
Проблема фагоцитоза в достаточной мере освещена в научной литературе, в которой затронут целый ряд вопросов [1; 2; 3; 6; 7], в том числе связанных с изучением фагоцитоза у многоядерных макрофагов [1; 2]. Вместе с тем к малоизученным вопросам следует причислить факт взаимной обусловленности различных видов функциональной активности у макрофагов, также как и фагоцитоз детерминированных реакциями перестройки элементов цитоскелета. В частности, от характера перестройки элементов цитоскелета зависит и образование цитоплазматических отростков [5]. Кроме того, определенный интерес представляет модифицирование клеточных реакций вследствие воздействия некоторых агентов, изменяющих характер функционирования макрофагов. При этом можно отметить влияние мурамилдипептида на клетки [4], что служит основанием для использования этого агента в качестве модификатора клеточных реакций.
Цель данного исследования состояла в изучении специфики формирования у моно- и полинуклеарных макрофагов цитоплазматических отростков и особенностей участия этих структур в процессе фагоцитоза на фоне модификации клеточных реакций. Эксперимент проводили на культурах перитонеальных макрофагов, выделенных от мышей линий BALB/c, C57BL/6 и CBF. Клетки инкубировали в течение 24 часов. В качестве объектов фагоцитоза использовали гранулы зимозана. Модификатором клеточных реакций служил мурамилдипептид. Определяли численность моно- и полинуклеарных макрофагов с фагоцитированными гранулами зимозана, расположенными на конце цитоплазматического отростка, а также среднее количество отростков, приходящееся на одну клетку.
Согласно результатам исследования в культурах группы BALB/c стимуляция клеток мурамилдипептидом вызывала увеличение численности одноядерных макрофагов с фагоцитированными гранулами, находящимися на конце цитоплазматического отростка, в 1,6 раза, а среднего количества отростков на 16,7 % по сравнению с контролем. Причем указанная тенденция не наблюдалась у многоядерных макрофагов.
В культурах группы C57BL/6 присутствовали единичные моно- и полинуклеарные макрофаги с фагоцитированными гранулами, расположенными на конце цитоплазматического отростка. Стимуляция клеток мурамилдипептидом не вызывала изменения количества одноядерных и полинуклеарных макрофагов с этим признаком и не изменяла у них среднюю численность цитоплазматических отростков.
В культурах группы CBF вследствие стимуляции клеток мурамилдипептидом наблюдали возрастание числа одноядерных макрофагов с фагоцитированными гранулами, присутствующими на конце цитоплазматического отростка, в 1,4 раза по сравнению с контролем, но не отмечали изменения средней численности цитоплазматических отростков у мононуклеаров. Данные параметры не имели достоверных изменений у многоядерных макрофагов.
В интактных клеточных культурах при сравнении показателей численности одноядерных макрофагов с фагоцитированными гранулами, расположенными на конце цитоплазматического отростка, отмечали, что этот параметр в культурах группы BALB/c был в 2,2 раза выше, чем в культурах группы CBF. Тогда как средняя численность цитоплазматических отростков у мононуклеаров в культурах группы BALB/c в 1,5 раза превышала уровень аналогичного показателя в культурах группы CBF.
Стимуляция клеток мурамилдипептидом вызывала увеличение численности мононуклеарных макрофагов с фагоцитированными гранулами, находящимися на конце цитоплазматического отростка, и среднего числа цитоплазматических отростков у одноядерных клеток соответственно в 2,6 и в 1,8 раза в культурах группы BALB/c по сравнению с аналогичными параметрами в культурах группы CBF. В интактных и стимулированных культурах группы C57BL/6 присутствовали единичные моно- и полинуклеарные макрофаги с фагоцитированными гранулами, расположенными на конце цитоплазматического отростка, что было характерно и для многоядерных макрофагов во всех культурах группы CBF.
Во всех используемых в эксперименте культурах у моно- и полинуклеарных макрофагов на конце цитоплазматического отростка регистрировали одну или две фагоцитированные гранулы зимозана и лишь в единичных случаях отмечали присутствие трех и более гранул. Перемещение гранул реализовалось вследствие их передвижения по цитоплазматическому отростку или в результате его втягивания фагоцитирующей клеткой.
Таким образом, были представлены сведения об особенностях образования у макрофагов цитоплазматических отростков и об участии данных структур в процессе фагоцитоза на фоне модификации клеточных реакций, что может быть использовано при дальнейшем изучении взаимной обусловленности различных видов функциональной активности у этих клеток, детерминированных перестройкой элементов цитоскелета.
Список литературы:
1. Ильин Д.А. Многоядерные макрофаги. - Новосибирск: Наука, 2011. - 56 с.
2. Felipe I., Oliveira-Castro G.M. Reception-mediated phagocytosis of yeast by macrophage polykarions // Braz. J. Med. Biol. Res. - 1987. - V. 20. - № 1. - P. 79-91.
3. Leichtle A., Hernandez M., Ebmeyer J., Yamasaki K., Lai Y., Radek K., Choung Y.H, Euteneuer S., Pak K., Gallo R., Wasserman S.I., Ryan A.F. CC chemokine ligand 3 overcomes the bacteriocidal and phagocytic defect of macrophages and hastens recovery from experimental otitis media in TNF-/- Mice // J. Immunol. - 2010. - V. 184. - № 6. - P. 3087-3097.
4. Mizuno K., Okamoto H., Horio T. Muramyl dipeptide and mononuclear cell supernatant induce Langhans-type cells from human monocytes // J. Leukoc. Biol. - 2001. - V. 70. - № 3. - P. 386-394.
5. Myers K.R., Casanova J.E. Regulation of actin cytoskeleton dynamics by Arf-family GTPases // Trends Cell. Biol. - 2008. - V. 18. - № 4. - P. 184-192.
6. Weeks B.A., Warinner J.E. Functional evaluation of macrophages in fish from a polluted estuary // Vet. Immunol. Immunopathol. - 1986. - V. 12. - № 1-4. - P. 313-320.
7. Wiersinga W.J., Kager L.M., Hovius J.W., van der Windt G.J., de Vos A.F., Meijers J.C., Roelofs J.J., Dondorp A., Levi M., Day N.P., Peacock S.J., van der Poll T. Urokinase receptor is necessary for bacterial defense against Pneumonia-derived septic melioidosis by facilitating phagocytosis // J. Immunol. - 2010. - V. 184. - № 6. - P. 3079-3086.
|