Labirint.ru - ваш проводник по лабиринту книг
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -ГлавнаяОб АльманахеРецензентыАрхив телеконференций- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Сборники АльманахаДругие сборникиНаучные труды- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Образец оформленияИнформационное письмоО проведении телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Материалы I телеконференцииМатериалы II телеконференцииМатериалы III телеконференцииМатериалы IV телеконференцииМатериалы V телеконференцииМатериалы VI телеконференцииМатериалы VII телеконференцииМатериалы VIII телеконференцииМатериалы IX телеконференцииМатериалы Х телеконференцииМатериалы XI телеконференцииМатериалы XII телеконференцииМатериалы XIII телеконференцииУчастники XIII телеконференцииМатериалы XIV телеконференцииУчастники XIV телеконференцииЮбилейная XV Телеконференция Октябрь 2014Участники Юбилейной XV Телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Конференция СМПиЧ-2015Участники СМПиЧ-2015- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -КонтактыФорум
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Поиск по сайту

Полезная информация

 
 

ОСОБЕННОСТИ ОРГАНИЗАЦИИ КЛЕТОЧНОГО МОНОСЛОЯ В ПЕРВИЧНЫХ КУЛЬТУРАХ ФИБРОБЛАСТОВ

Печать E-mail
Автор Ильин Д.А.   
18.06.2013 г.
Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск
 
  

Известно, что фибробласты играют центральную роль в развитии системного склероза [8], фиброза [1; 3; 5] и воспаления [5]. Для изучения клеточных реакций с участием фибробластов [6] требуется проведение комплексного цитологического анализа и в качестве обеспечивающих методов целесообразно использование культуральных технологий. Поэтому культуры фибробластов находят широкое применение в исследовательской работе [2; 4]. Используются как первичные культуры фибробластов [7], так и фибробласты клеточной линии [9]. 
Однако использование первичных культур фибробластов является способом, наиболее отвечающим данным целям. Важным при этом следует считать уточнение особенностей формирования клеточного монослоя, поскольку его структурно-функциональные характеристики детерминируют реализацию клеточных реакций. 
Цель исследования состояла в изучении особенностей организации клеточного монослоя в первичных культурах фибробластов. Эксперимент проводили на первичных культурах фибробластов легких, выделенных от мышей линии CBF. Клетки культивировали в течение 7 суток. Проводили оценку особенностей организации клеточного монослоя путем выделения участков, имеющих характерные признаки строения. Определяли абсолютную численность фибробластов на единицу занимаемой площади. Подсчитывали количество, окруженных клеточным монослоем, зон незаполненных фибробластами и оценивали форму этих областей. 
Было установлено, что в первичных культурах фибробластов в пределах клеточного монослоя существуют четыре типа участков, имеющих характерное строение. Клеточный монослой содержал несколько участков каждого типа, разнящихся по площади, причем в пределах одного и того же типа имелись определенные вариации по данному показателю. 
Выделяли зоны с крайне высокой численностью фибробластов на единицу занимаемой площади. Эти участки, отнесенные к первому типу, были расположены в различных областях клеточного монослоя, но наиболее часто они находились в его центральной зоне. В таких участках монослоя фибробласты плотно прилегали друг к другу. Участки второго типа имели такие же морфологические особенности, что и первого, но отличались от них меньшим содержанием фибробластов на единицу площади. 
Участки третьего типа представляли собой переходную зону между вышеописанными и областями миграции фибробластов к периферии монослоя. Отмечали наличие незаполненных клетками зон, окруженных фибробластами. Эти области имели округлую или овальную форму, и в единичных случаях обладали неправильным контуром. Образование таких областей может быть связано с некоторыми особенностями поверхности материала подложки, либо объясняться не вполне изученными аспектами поведения фибробластов in vitro. Численность фибробластов на единицу площади снижалась на 32,5 % по сравнению с аналогичным показателем участков второго типа. 
Четвертому типу участков соответствовала зона активной миграции фибробластов к периферии монослоя. В данной области находили как отдельно расположенные, так и образующие кластеры фибробласты. Количество фибробластов на единицу площади было на 60,5 % меньше, чем в участках третьего типа. 
Из вышеизложенного следует, что в результате инкубации первичных культур фибробластов легких наблюдается образование клеточного монослоя, имеющего характерные особенности строения, заключающиеся в формировании участков разнящихся по особенностям своей структурной организации и численности клеточных элементов, входящих в их состав. Вполне очевидно, что снижение численности фибробластов в соответствующих участках клеточного монослоя связано с высокой активностью миграции фибробластов к области образования клеточных кластеров. Уменьшение количества зон незанятых фибробластами, по всей видимости, сопряжено с активизацией процесса клеточной адгезии. 
Полученная информация может быть использована при разработке методов инкубации первичных культур фибробластов с целью изучения ряда аспектов функционирования этих клеток и уточнения характера их формообразования, что является необходимым этапом исследования процессов, детерминирующих развитие фиброзных изменений в тканях. 

Список литературы: 
1. Aden N., Nuttall A., Shiwen X., de Winter P., Leask A., Black C.M., Denton C.P., Abraham D.J., Stratton R.J. Epithelial cells promote fibroblast activation via IL-1alpha in systemic sclerosis // J. Invest. Dermatol. - 2010. - V. 130. - № 9. - P. 2191-2200. 
2. Brinckerhoff C.E., Harris E.D. Jr. Collagen production by cultures containing multinucleated cells derived from synovial fibroblasts // Arthritis Rheum. - 1978. - V. 21. - № 7. - P. 745-753. 
3. Datta A., Scotton C.J., Chambers R.C. Novel therapeutic approaches for pulmonary fibrosis // Br. J. Pharmacol. - 2011. - V. 163. - № 1. - P. 141-172. 
4. Heddle J.A., Shepson P.B., Gingerich J.D., So K.W. Mutagenicity of peroxyacetyl nitrate (PAN) in vivo: tests for somatic mutations and chromosomal aberrations // Environ. Mol. Mutagen. - 1993. - V. 21. - № 1. - P. 58-66. 
5. Isozaki T., Otsuka K., Sato M., Takahashi R., Wakabayashi K., Yajima N., Miwa Y., Kasama T. Synergistic induction of CX3CL1 by interleukin-1β and interferon-γ in human lung fibroblasts: involvement of signal transducer and activator of transcription 1 signaling pathways // Transl. Res. - 2011. - V. 157. - № 2. - P. 64-70. 
6. Margulis A., Nocka K.H., Wood N.L., Wolf S.F., Goldman S.J., Kasaian M.T. MMP dependence of fibroblast contraction and collagen production induced by human mast cell activation in a three-dimensional collagen lattice // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. - 2009. - V. 296. - № 2. - P. 236-247. 
7. Plante S., Semlali A., Joubert P., Bissonnette E., Laviolette M., Hamid Q., Chakir J. Mast cells regulate procollagen I (alpha 1) production by bronchial fibroblasts derived from subjects with asthma through IL-4/IL-4 delta 2 ratio // J. Allergy Clin. Immunol. - 2006. - V. 117. - № 6. - P. 1321-1327. 
8. Postiglione L., Montuori N., Riccio A., Di Spigna G., Salzano S., Rossi G., Ragno P. The plasminogen activator system in fibroblasts from systemic sclerosis // Int. J. Immunopathol. Pharmacol. - 2010. - V. 23. - № 3. - P. 891-900. 
9. Rennick D., Hunte B., Holland G., Thompson-Snipes L. Cofactors are essential for stem cell factor-dependent growth and maturation of mast cell progenitors: comparative effects of interleukin-3 (IL-3), IL-4, IL-10, and fibroblasts // Blood. - 1995. - V. 85. - № 1. - P. 57-65. 

Последнее обновление ( 23.04.2014 г. )
 

Добавить комментарий

Правила! Запрещается ругаться матом, оскорблять участников/авторов, спамить, давать рекламу.



Защитный код
Обновить

« Пред.   След. »
 
 
Альманах Научных Открытий. Все права защищены.
Copyright (c) 2008-2019.
Копирование материалов возможно только при наличии активной ссылки на наш сайт.

Warning: require_once(/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php) [function.require-once]: failed to open stream: Нет такого файла или каталога in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 79

Fatal error: require_once() [function.require]: Failed opening required '/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php' (include_path='.:/usr/local/zend-5.2/share/pear') in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 79