ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВЕГЕТАТИВНЫХ И ГЕНЕРАТИВНЫХ ОРГАНОВ VACCINIUM MYRTILLUS
Автор А.В. Ильиных
06.08.2009 г.
Новосибирский государственный медицинский университет, г. Новосибирск
Кафедра фармакогнозии с курсом ботаники
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 66-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2007 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
Vaccinium myrtillus многолетний полукустарничек семейства Vacciniacae, широко распространенный на территории России. Плоды черники рекомендуются в составе диет для больных железодефицитной анемией (ЖДА), что связывается с наличием в плодах полифенольных соединений и микроэлементов, влияющих на кроветворение. Учитывая, специфику синтеза биологически активных соединений (БАС) в растениях, можно ожидать, что в вегетативных органах концентрация БАС будет выше, чем в генеративных.
Целями данной работы являются сравнительное фармакогностическое исследование листьев, плодов и цветов черники обыкновенной и оценка перспективности их применения в фитотерапии ЖДА.
В качестве объектов исследования были выбраны листья, плоды и цветы черники обыкновенной, собранные в Республике Бурятия и Новосибирской области.
Анатомическое исследование проводилось с использованием микроскопа типа «Микмед» при увеличении до 600 раз. Товароведческий анализ проводился фармакопейными методами. Для определения фенолкарбоновых кислот использовались извлечения, полученные методом трехкратной последовательной экстракции 90 %, 80 %, 70 % спиртом. Полученные извлечения объединялись и наносились на хроматографическую бумагу «Ленинградская средняя» в 4 повторностях и проводили восходящую хроматографию в системе растворителей СН3СООН:Н2О (2:98). Одно нанесение использовали для проведения качественных реакций в сравнении с растворами свидетелей. Остальные вырезали, измельчали и элюировали 50 % спиртом. Для полученных элюатов снимали УФ-спектр на спектрофотометре СФ-56 и сравнивали с УФ-спектрами известных кислот. На основании проведенного анализа выбирали характерную фенолкарбоновую кислоту, в пересчете на которую определяли количественное содержание суммы фенолкарбоновых кислот. Количественное определение проводили с использованием калибровочных графиков по стандартным фенолкарбоновым кислотам.
Для определения флавоноидов использовали суммарное извлечение 70% этанолом в соотношении «сырье:экстрагент» 1:100. Затем в мерную колбу на 25 мл помещали 2 мл извлечения, добавляли 5 мл 2 % спиртового раствора алюминия хлорида и 0,1 мл 3 % кислоты уксусной и объем доводили до метки. Определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин проводили спектрофотометрически на приборе СФ-56 по поглощению УФ-света при λ=410 нм [2]. Количественное определение антоцианов проводили спектрофотометрически фармакопейным методом [1] в пересчете на цианидин-3,5-дигликозид по поглощению УФ-света при λ=510 нм для извлечения полученного с использованием в качестве экстрагента 1 % раствора хлористо-водородной кислоты. Арбутин определяли титриметрически, по известной фармакопейной методике титрованием 0,1 Н раствором йода. Микроэлементный состав сырья определяли методом масс-спектроскопии с индуктивно связанной плазмой.
При микроскопическом исследовании листа было установлено, что основные диагностические признаки сохраняются, независимо от места произрастания:
- извилистость клеточной стенки эпидермальных клеток нижней стороны и более прямые формы клеток верхней стороны листа,
- лист гипостоматический, устьица погруженные, тетрацитные,
- наличие кристаллической обкладки вдоль жилок листа и простых одноклеточных волосков вдоль главной жилки с нижней стороны листа,
- на жилках и по краю листовой пластинки располагаются многоклеточные булавовидные железки,
- в плодах присутствуют каменистые клетки.
В результате товароведческого анализа было выявлено, что такие показатели, как экстрактивные вещества и общая зола, в большей степени зависят от места произрастания в листьях по сравнению с плодами. Содержание экстрактивных веществ (экстрагент вода) в листьях варьирует от 33,0 до 40,0 % и в меньшей степени изменяется в плодах (62,0–65,0 %). В то же время было установлено более резкое снижение содержания экстрактивных веществ при увеличении концентрации этанола в водно-спиртовом экстрагенте в извлечении из плодов. Значения общей золы в листьях изменяются в пределах от 4,6 до 5,8 %, в плодах от 2,7 до 2,9 %.
Для извлечений, полученных из листьев и цветов черники, характерных максимумов поглощения для рутина (λ=410 нм) и антоцианов (λ=510 нм) обнаружено не было, что свидетельствует об отсутствии указанных соединений.
Количественное содержание фенолкарбоновых кислот в листьях определялось в пересчете на кофейную кислоту, в плодах, в пересчете на транс-коричную кислоту.
Таблица
Содержание
биологически-активных соединений и микроэлементов в органах черники
обыкновенной (в пересчете на абсолютно сухое сырье)
Параметры
Цветы
Плоды
Листья
Флавоноиды, %
-
0,37 ± 0,02
-
Антоцианы, %
-
1,2 ± 0,04
-
Фенолкарбоновые кислоты, %
-
1,48 ±0,05
4,45 ±0,09
Арбутин, %
-
1,2 ±0,08
3,1 ± 0,1
Микроэлементы, мкг/г
Si
423,0 ± 15,0
730,0 ±25,0
898,0 ±31,0
Ca
1522,0 ± 38,0
781,0 ±16,0
2677,0 ±64,0
Mg
1592,0 ± 40,0
1247,0 ±35,0
4683,0 ±100,0
K
15475,0 ± 230,0
7699,0 ±120,0
8666,0 ±135,0
Co
0,14 ±0,08
0,11 ±0,08
0,2 ±0,04
Ni
1,85 ±0,15
1,3 ±0,1
1,1 ±0,1
Cu
16,0 ±2,0
6,4 ±1,0
8,5 ±1,6
Fe
45,0 ±4,0
19,7 ±2,0
35,9 ±3,5
Mn
413,0 ±12,0
531,0 ±20,0
2439,0 ±55,0
По результатам микроэлементного исследования было установлено наибольшее содержание суммы микроэлементов в цветах. Вместе с тем массовая доля цветов от общей массы растения очень мала и их отдельное использование является неперспективным. Наибольший интерес в связи с этим представляют листья черники обыкновенной, в которых содержание как макроэлементов, так микроэлементов, влияющих на кроветворение, значительно превышает содержание таковых в плодах, чем, вероятнее всего, и объясняется большая зольность листьев по сравнению с плодами.
Выявленные различия в качественном составе и количественном содержании групп биологически активных соединений фенольной природы объясняют различия в специфической активности фитопрепаратов из генеративных и вегетативных частей черники.
Список литературы:
1. Государственная фармакопея СССР: Вып.2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. – 11-е изд. – М.: Медицина, 1989. – 400 с
2. Донника трава «ангро: ФСП 42-0330168301. – Курск, Курский гос. мед.унив., 2001. – 11 с.
Fatal error: require_once() [function.require]: Failed opening required '/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php' (include_path='.:/usr/local/zend-5.2/share/pear') in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 99