Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Вирусы гепатита В и С способны длительно персистировать в организме. Это связано со способностью вирусов модулировать процесс программированной клеточной гибели. Ключевой органеллой, участвующей в регуляции апоптоза, является митохондрия. Это обусловлено наличием в митохондриальном матриксе биологически активных веществ, способных регулировать процесс программируемой клеточной гибели [1]. Высвобождение из митохондрий апоптозиндуцирующих факторов возможно только после открытия специальных пор, что можно зарегистрировать как снижение трансмембранного потенциала митохондрий [2]. В связи с этим целью настоящего исследования стала оценка роли изменения трансмембранного потенциала митохондриий лимфоцитов периферической крови в механизмах дизрегуляции апоптоза при хронических гепатитах В и С.
Материалы и методы. В программу обследования было включено 12 больных хроническим гепатитом В (ХГ-В) (5 женщин и 7 мужчин) и 34 хроническим гепатитом С (ХГ -С) (24 женщины и 10 мужчин) умеренной и слабовыраженной степеней активности в возрасте от 18 до 50 лет. Верификация диагноза проводилась на основании комплекса данных клинико-эпидемиологического, инструментального, серологического, молекулярно-генетического методов исследования, результатов морфологического анализа биоптатов печени. Контрольную группу составили 19 относительно здоровых доноров с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту. Материалом исследования являлась венозная кровь обследованных лиц. Определяли количество лимфоцитов в апоптозе с помощью аннексинового теста, используя ФИТЦ-меченый аннексин V («Caltag», США) [3]. Определение величины мембранного потенциала проводилось на проточном цитофлуориметре Epics XL («Beckman Coulter», Франция) с использованием набора реагентов «BD Mitoscreen» («Becton Dickinson»). Статистическую обработку результатов проводили с использованием непараметрического критерия Манна – Уитни.
Результаты и их обсуждение. При оценке уровня апоптоза было обнаружено снижение апоптотических лимфоцитов у больных ХГ-С по сравнению со здоровыми донорами. При ХГ-В изменений выявлено не было. Полученные данные свидетельствуют о том, что при хроническом гепатите С, по всей видимости, возникает блокада программируемой клеточной гибели. Это может быть связано с вирусиндуцированным подавлением функции белка р53, инактивацей каспаз, а также с усилением экспрессии антиапоптозного белка Bcl-XL [4]. При оценке уровня трансмембранного потенциала митохондрий было установлено увеличение количества лимфоцитов с пониженным уровнем трансмембранного потенциала митохондрий у лиц с ХГ-В. При ХГ-С изменений уровня трансмембранного потенциала митохондрий выявлено не было. Полученные результаты свидетельствуют, что при хроническом гепатите В происходит активация митохондриального пути апоптоза, однако дальнейшая реализация программируемой клеточной гибели оказывается заблокирована. Возможно, это связано с несостоятельностью иммунокомпетентных клеток, поскольку вирус гепатита В способен интегрировать свой геном в геном клетки-хозяина, что приводит к нарушению адекватного антивирусного иммунного ответа. При хроническом гепатите С митохондриальный путь апоптоза не задействован, что может говорить об участии других сигналпередающих путей гибели клеток, например, по средством Fas/FasL-взаимодействия.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что длительное течение хронического гепатита В сопровождается нарушениями защитной апоптотической реакции митохондриального пути апоптоза. При хроническом гепатите С, вероятно, задействованы иные пути модуляции программируемой клеточной гибели.

Список литературы:
1. Бойчук, С. В. Ключевая роль митохондрий в апоптозе лимфоцитов / С. В. Бойчук, М. М. Миннебаев, И. Г. Мустафин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 2001. – Т. 132, № 12. – С. 644–647.
2. Владимирская, Е. Б. Механизмы апоптотической смерти клеток / Е. Б. Владимирская // Гематология и трансфузиология. – 2002. – Т. 47, № 2. – С. 35–40.
3. Van Engeland, M. Annexin V-affiniti assay: a review on an apoptosis detection system based on phosphatidylserine exposure / M. Van Engeland, L. J. W. Nieland, F.C.S. Ramaekers // Cytometry. – 1998. Vol. 31. – Р. 1–9.
4. Otsuka, M. Hepatitis C virus core protein inhibits apoptosis via enhanced Bcl-xL expression / M. Otsuka, N. Kato, H. Taniguchi // Virology. – 2002. – Vol. 296, № 1. – Р. 84–93.