Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

НИИ фармакологии  СО РАМН, г. Томск

Лаборатория патологической физиологии и экспериментальной терапии

Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 71-й итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 14-16 мая 2012 г.), под ред. В. В. Новицкого, Н.В. Рязанцевой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2012. − 335 с. 

Скачать сборник (MS Word, 1 мб)

Скачать программу конференции

Актуальность. Исследования в области клеточных технологий за последние годы открыли новые возможности клеточной терапии - фармакологической стимуляции эндогенных стволовых клеток. В проведенных ранее в ФГБУ 'НИИ фармакологии' СО РАМН экспериментах выявлены гепатопротекторные эффекты иммобилизированной с помощью нанотехнологии электронно-лучевого синтеза гиалуронидазы (иммГД), основанные на активации мультипотентных стволовых клеток (СК) костного мозга, их мобилизации и хоуминга в орган-мишень с дальнейшей реализацией ростового потенциала. Известно, что система крови является динамичной структурой и определяет течение восстановительных процессов в органах и тканях при поражении последних патогенными факторами. В связи с этим, мобилизация СК из гемопоэтической ткани может сопровождаться дисбалансом компенсаторных реакций системы крови. Таким образом, при разработке средств для регенеративной медицины, стимулирующих мобилизацию СК из ткани-депо, важным представляется изучение их способности вызывать истощение ниш регенераторно-компетентных клеток и, как следствие, оказывать влияние на процесс кроветворения.

Цель. Изучить влияние иммобилизированной гиалуронидазы на формирование гематологических сдвигов в условиях моделирования хронического CCl4-гепатита (ХГ).

Материал и методы. Эксперименты выполнены на мышах линии C57Bl/6JY. ХГ вызывали введением внутрижелудочно 0,2 мл 20% тетрахлоруглерода (ТХУ) в течение 3-х недель 2 раза в неделю. Гиалуронидазу, иммобилизованную путем воздействия направленного потока ускоренных электронов с энергией электронов 2,5 МэВ, вводили per os дважды, начиная с 3-го дня после последнего введения ТХУ по 50 ЕД/кг в течение 2-х дней. Для пегиляции фермента использовали полиэтиленгликоль с молекулярной массой 1500 дальтон. Состояние системы крови оценивали на 3-е, 5-е, 8-е, 10-е сутки с помощью стандартных гематологических и культуральных методов. Для оценки полученных данных, их сравнения и выявления статистически значимых различий между группами были использованы электронные таблицы Excel 2007 и пакет прикладных программ STATISTICA 7.0.

Результаты. Введение ТХУ сопровождалось снижением уровня содержания предшественников эритро- и гранулоцитомонопоэза (КОЕ-Э, КОЕ-ГМ) в костном мозге в начальные сроки исследования, сменяющимся увеличением данного показателя к концу опыта. Отражением описанных изменений со стороны гемопоэтических прекурсоров явилось снижение уровня содержания незрелых нейтрофильных гранулоцитов (ННГ) в гемопоэтической ткани, следствием чего, являлось снижение числа нейтрофилов в периферической крови. При этом отмечалось возрастание количества эритрокариоцитов (ЭК) в костном мозге, связанное с повышением скорости созревания прекурсоров эритропоэза, а также циркулирующих ретикулоцитов и эритроцитов. Введение иммГД приводило к падению скорости созревания КОЕ-Э и КОЕ-ГМ практически во все сроки исследования и их накоплению в гемопоэтической ткани. Выявленное разобщение процессов пролиферации и дифференцировки КОЕ-ГМ приводило к уменьшению количества незрелых и зрелых нейтрофильных гранулоцитов в костном мозге, которое, сопровождаемое повышением числа палочко- и сегментоядерных нейтрофилов в периферической крови. Вероятно, выявленный феномен объяснялся стимуляцией выхода костномозгового резерва данных клеток. Со стороны эритроидного ростка кроветворения имело место увеличение числа ЭК в костном мозге к концу эксперимента, связанное с возрастанием интенсивности дифференцировки КОЕ-Э. Однако содержание клеток красной крови в сосудистом русле соответствовало таковому в контроле.

Выводы. Полученные результаты свидетельствуют об отсутствии выраженного негативного влияния иммГД на систему крови в условиях модели хронического гепатита, что предполагает целесообразность дальнейшей разработки гепатопротекторного средства на основе данного вещества.