|
ГУ ТНЦ СО РАМН НИИ Кардиологии, ОССХ (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы Х конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М.
Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2009. – 166 с.
Скачать сборник целиком
Цель работы: используя достижения тканевой инженерии, разработать собственные технологии, позволяющие выращивать новые кровеносные сосуды на основе естественных каркасов (матрикса) in vitro с использованием клеточных технологий для последующего их применения in vivo.
Для достижения поставленной цели поставлены следующие задачи:
1). получение матрикса для построения новых сосудов путем «отмывания» выделенных участков сосудов для определения более эффективного и щадящего способа получения соединительнотканного каркаса (с морфологическим контролем);
2). хирургическая имплантация полученных «новых» сосудов с оценкой их приживаемости, функциональной активности и морфологическим контролем их состояния in vivo.
Материалы и методы. На 1 этапе работы на материале грудного отдела аорты белых беспородных крыс (n=22), а также дистальных участков внутригрудной артерии человека, получаемых во время операции аортокоронарного шунтирования (n=14), отрабатывалась методика перфузионной де-целлюляризации растворами детергентов, ферментативными растворами различной тоничности. Эффективность децеллюляризации осуществляется морфологическим изучением матрикса.
На 2 этапе децеллюляризированный сосудистый каркас из внутригрудной артерии человека имплантировался в артериальное русло конечностей беспородных собак с оценкой кровотока (n=2).
Результаты. Наиболее эффективная децеллюляризация сосудов, с минимальным повреждением соединительнотканного каркаса, наблюдается при использовании раствора ЭДТА с трипсином с суммарным временем обработки не более 3 часов. Значительное (до 47%) и равномерное уменьшение количества клеточных элементов медии, 100% децеллюляризация адвентиции, полная отмывка эндотелия, с сохранением структуры сосудистой стенки, удается получить при воздействии на сосуд ги-потоничных растворов детергента и трипсина.
Оценены физические свойства кондуитов при имплантации децеллюляризированного сосудистого каркаса из внутригрудной артерии человека в артериальное русло соответствующего диаметра конечностей беспородных собак. Стенка кондуита позволяет накладывать сосудистый шов (нить Pro-lene 8/0), получаемые анастомозы герметичны, децеллюляризированный сосуд способен выдерживать гемодинамическую нагрузку артериального кровотока, бесклеточный сосудистый матрикс способен удерживать цельную кровь.
Выводы:
1) Отработанная перфузионная методика децеллюляризации позволяет достаточно эффективно получать матрикс цельного кровеносного сосуда;
2) Получаемый бесклеточный кондуит внутригрудной артерии человека по физическим свойствам пригоден в качестве сосудистого трансплантата в экспериментах на животных.
|
