ГОУ ВПО СибГМУ Росздрава (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы VII конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2006. – 167 с.
Скачать сборник целиком
Несмотря на интенсивное развитие химиотерапии в последние годы, туберкулезная инфекция продолжает оставаться серьезной медицинской проблемой практически во всем мире. Развитие туберкулезного процесса зависит не только от изменения биологических свойств и длительности персистенции микобактерий в паренхиматозных органах, но и от реактивности макроорганизма и состояния его защитных сил.
Одним из наиболее значимых факторов нарушений иммунных процессов при туберкулезе являются структурно-функциональные нарушения в мембранах мононуклеарных лейкоцитов крови - клеток, играющих ведущую роль в противотуберкулезной защите организма [3].
В настоящее время неопровержимым считается тот факт, что нормальное функционирование плазматической мембраны зависит от ряда факторов, в частности, от ее липидного состава, изменения которого могут существенно влиять не только на «работоспособность» самой мембраны, но и на функционирование клетки в целом.
Однако данные относительно структурных изменений в липидном составе плазматических мембран мононуклеаров крови при инфекционной патологии, в том числе при туберкулезе легких (ТЛ), носят весьма фрагментарный и несистематизированный характер, что не позволяет однозначно оценить направленность и динамику патологических изменений мембраны клеток на фоне течения туберкулезного процесса.
В связи с этим целью настоящего исследования явилось изучение липидного спектра мембран мононуклеарных клеток крови при лекарственно-чувствительном варианте туберкулезного процесса в легких.
Материал и методы исследования. В процессе работы было обследовано 12 первичных больных (мужчин и женщин) в возрасте от 23 до 55 лет, страдающих распространенным деструктивным лекарственно-чувствительным ТЛ. Контрольную группу составили 11 здоровых мужчин и женщин аналогичного возраста.
Выделение мононуклеаров крови проводили на градиенте плотности фиколл-урографина (1,077 г/см3). Плазматические мембраны (ПМ) мононуклеаров крови получали путем разделения суспензии разрушенных клеток в двухфазной системе декстран Т-500/ПЭГ-6000 [4].
Разделение основных классов фосфолипидов (ФЛ) и нейтральных липидов проводили с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) [2]. Разделение проводили на пластинках для ТСХ "SORBFIL" (Россия). Хроматограммы проявляли с помощью 5% раствора фосфорно-молибденовой кислоты с последующим элюированием каждой фракции и определением неорганического фосфата по методу Боданского. Результаты выражали в ммоль фосфора/мг белка. Для характеристики структуры ПМ мононуклеарных лейкоцитов определяли отношение содержания холестерина (ХС) к общему количеству фосфолипидов (ФЛ). Статистический анализ данных осуществляли с помощью критериев Стьюдента и Манна-Уитни с использованием программы Statistica for Windows Version 6.0.
Результаты исследования и их обсуждение. Проведенный анализ показал, что в ПМ мо-нонуклеаров крови у больных лекарственно-чувствительным ТЛ содержание ХС в 1,4 раза (р < 0,05) превышало аналогичный показатель в контрольной группе. При этом содержание эфиров холестерина (ЭХ) и жирных кислот (ЖК) в мембранах моноцитов и лимфоцитов периферической крови у пациентов с ТЛ до начала лечения не претерпевало существенных изменений относительно нормальных величин. Содержание ФЛ в мембранах клеток так же не отличалось от содержания ФЛ в группе контроля. Отношение ХС/ФЛ в ПМ клеток увеличивалось на 23,1% по сравнению с аналогичным показателем в группе контроля.
Анализ полученных результатов позволяет полагать, что подобные изменения (повышение содержания ХС, увеличение ХС/ФЛ-отношения) в структуре ПМ иммуноцитов у больных ТЛ до начала специфической химиотерапии могут являться как следствием, так и причиной развития туберкулезного процесса. Одним из универсальных механизмов, вызывающих структурную перестройку биологических мембран при бактериальной инвазии, является интенсификация процессов перекисного окисления липидов, результатом которых может служить увеличение содержания холестерина [1]. Мы не исключаем также возможность того, что наличие установленных нарушений может быть проявлением структурных перестроек плазматической мембраны, приобретенных макроорганизмом до микобактериальной инвазии и являющихся одним из важных этапов в развитии туберкулезного процесса [5].
Заключение. У больных распространенным деструктивным туберкулезом легких до начала лечения отмечаются значимые изменения в липидном составе ПМ мононуклеаров крови.
Список литературы:
1. Владимиров Ю. А. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран / Ю.А. Владимиров, Г.Е. Добрецов. - М.: Наука, 1986. - 320 С.
2. Жухоров Л. С. Метод количественного определения липидов в лимфоцитах и нейтрофи-лах периферической крови / Л. С. Жухоров, С. А. Голованов // Лабораторное дело. - 1984. - №11. - С.683-685.
3. Маянский А. Н. Туберкулез // Иммунология. - 2001. - № 2. - С. 53-63.
4. Финдлей Дж., Эванс С. Биологические мембраны: Пер. с англ. - М., 1991.
5. Catfield John, Pieters Jean. Essential role for cholesterol in entry of mycobacteria into macrophages // Science. - 2000. - Vol.288, №5471. - P.1647-1650.
|