Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Нитрозоглутатион является соединением глутатиона и оксида азота. В настоящее время считается, что нитрозоглутатион является основным депо оксида азота. Окись азота, в свою очередь, может расходоваться на запуск цГМФ-зависимого пути расслабления гладких мышц, депонирование в виде нитрозоглутатиона и образование пероксинитрита с запуском перекисного окисления липидов. На сегодняшний день точно не установлено: нитрозоглутатион действует непосредственно или опосредованно через высвобождение окиси азота. При различных патологиях, связанных с нарушением функции гладких мышц, соотношение путей метаболизма окиси азота изменяется, что может быть важным звеном патогенеза некоторых заболеваний (бронхиальной астмы, артериальной гипертензии, хронической обструктивной болезни легких) [3]. Нитрозоглутатион в качестве донора окиси азота в организме человека может играть неоднозначную роль при различных его концентрациях. Имеются данные о том, что в зависимости от дозы нитрозоглутатион может являться как цитопротектором, так и триггером апоптоза и окислительного стресса [2].
Целью данной работы являлось изучение влияния нитрозоглутатиона на запуск окислительных процессов в гладких мышцах Tenia Coli морских свинок. В ходе работы решались следующие задачи: изучить показатели перекисного окисления липидов (содержание малонового диальдегида, 3-нитротирозина), состояние антиоксидантной системы (активность супероксиддисмутазы, каталазы) в гомогенате гладкомышечных клеток Tenia Coli при воздействии различных концентраций нитрозоглутатиона [1].
В ходе эксперимента гладкую мышцу (Tenia Coli) помещали в трис-буфер рН 7,35 с добавлением нитрозоглутатиона, приготовленного ex tempore, в конечной концентрации 1 мкМ, 0,1 мкМ, 1 нМ и инкубировали 30 минут в темноте. Tenia Coli контрольной группы помещали в трис-буфер рН 7,35 без добавления нитрозоглутатиона и инкубировали 30 минут в темноте. После инкубации приготовляли гомогенат гладкой мышцы на холоду и определяли в нем содержание малонового диальдегида (МДА), 3-нитротирозина, активность супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы. Расчет изучаемых показателей проводили на мг белка, который определяли определяли микробиуретовым методом.
При воздействии нитрозоглутатиона в концентрациях 1 мкМ, 0,1 мкМ и 1 нМ содержание МДА увеличивалось в среднем в 1,8–2,3 раза по сравнению с контролем (р<0,05). Увеличение содержания 3-нитротирозина было более выраженным при действии тех же концентраций – в 3,5–4 раза по сравнению с контролем (р<0,05). В отличие от продуктов окислительных процессов, активность антиоксидантных ферментов снижалась при воздействии всех концентраций нитрозоглутатиона в течение 30 минут инкубации. Наблюдалось более выраженное снижение активности каталазы по сравнению с СОД. В снижении активности антиоксидантных ферментов наблюдался дозозависимый эффект: При воздействии 1 мкМ концентрации нитрозоглутатиона активность СОД снизилась на 40 %, 0,1 мкМ – на 20 %, 1 нм – снизилась незначимо по сравнению с контролем (р<0,05). Активность каталазы снизилась на 60 % при действии 1 мкМ концентрации нитрозоглутатиона, на 40 % – при 0,1 мкМ и при 1 нМ снижение активности незначимо по сравнению с контролем (р<0,05).
Таким образом, при воздействии всех концентраций нитрозоглутатиона получена модель нитрозилирующего стресса: увеличение содержания 3-нитротирозина, малонового диальдегида, снижение активности супероксиддисмутазы, каталазы. В зависимости от дозы по прошествии 30 минут степень нитрозилирующего стресса пропорциональна концентрации
нитрозоглутатиона, то есть максимально выражена при воздействии нитрозоглутатиона в концентрации 1 мкМ.


Список литературы:
1. Гаврилов, В. В. Спектрофотометрическое определение гидроперекисей в плазме крови / В. В. Гаврилов, М. И. Мишкорудная // Лаб. Дело. – 1983. – № 3. – С. 17–19.
2. Dweik, K. A. NO chemical events in the human airway during the immediate and late antigen – induced asthmatic response / К. А. Dweik, S. A. A. Comhair, N. T. Eissa, // Proc. Natl. Acad. Sci. – 2001 – Vol. 098 – N. 5 – P. 2622–2627.
3. Kharitonov, S. A. Nitric oxide, nitrotyrosin and nitric oxide in asthma and chronic obstructive pulmonary disease / S. A. Kharitonov, R. J. Barnes // Curr. Allergy Asthma Rep. – 2003 – № 2 (3). – P. 121–129.