Апоптоз является общебиологическим механизмом, ответственным за поддержание клеточного гомеостаза макроорганизма при вирусных инфекциях [1]. В связи с этим целью настоящего исследования явилась оценка реализации программы апоптоза лимфоцитов периферической крови у пациентов с хроническими вирусными заболеваниями.

Материал и методы. Было обследовано 53 пациента (36 мужчин и 17 женщин) в возрасте от 18 до 43 лет с длительной персистенцией вирусов гепатита В и С и клещевого энцефалита. Контрольную группу составили 19 относительно здоровых доноров с аналогичными характеристиками по полу и возрасту. Объектом исследования служили лимфоциты, выделенные из венозной крови центрифугированием на слое фиколл-верографин плотностью 1,077 и культивированные 24 часа в среде RPMI-1640, а также в полной культуральной среде без митогена, либо с добавлением 10 мкг/мл фитогемагглютинина (ФГА), или 10-6 моль/мл этопозида, или 10-4 моль/мл дексаметазона. Регистрацию апоптоза лимфоцитов крови осуществляли методом проточной лазерной цитометрии с использованием моноклональных антител к CD4+ и CD8+, меченных фикоэритрином и ФИТЦ-конъюгированного аннексина V [2]. Статистическую обработку результатов проводили с использованием критериев Манна-Уитни и Вилкоксона.

Результаты и обсуждение. У пациентов с хроническим гепатитом С (ХГ-С) было обнаружено достоверное (р<0,05) снижение уровня ФГА-стимулированного апоптоза лимфоцитарных клеток по сравнению со спонтанным. Сравнительный анализ показателей, характеризующих уровень гибели CD4+-клеток путём апоптоза у больных хроническим гепатитом В (ХГ-В), выявил достоверное (р<0,05) увеличение количества Т-хелперов в апоптозе по сравнению с аналогичными параметрами здоровых доноров. У пациентов с хроническим клещевым энцефалитом (КЭ) отмечалось достоверное (р<0,05) по сравнению со здоровыми донорами повышение уровня спонтанного апоптоза, в то время как при исследовании активационного апоптоза наблюдалось его угнетение. При инкубировании лимфоцитов с этопозидом количество апоптотических клеток у больных ХГ-С значительно превышало уровень спонтанного апоптоза (р<0,05), а также апоптоза лимфоцитов, культивированных в среде RPMI-1640 и с дексаметазоном. Вероятно, проапоптотический эффект этопозида, опосредованный ингиби-рованием топоизомеразы II, превосходит антиапоптотический потенциал вируса гепатита С, способного подавлять гибель иммуноцитов, вызванную другими индукторами апоптоза, такими как дексаметазон или отсутствие ростовых факторов.

Таким образом, стратегия выживания вируса гепатита С, вероятно, сводится к угнетению апоптоза лимфоцитов, являющихся дополнительным резервуаром инфекции, что, по-видимому, обусловливает формирование и поддержание хронической внутриклеточной перси-стенции. С другой стороны, при длительной персистенции вирусов гепатита В и клещевого энцефалита апоптоз лимфоцитарных клеток усиливается, что, вероятно, свидетельствует о других путях модуляции гибели клетки при данных инфекциях либо говорит об избыточной активности защитных механизмов макроорганизма, направленных на элиминацию инфекционного агента.