Сибирский государственный медицинский университет (г. Томск)

Эта работа опубликована в сборнике "Науки  о  человеке":  материалы VI  конгресса  молодых  ученых  и  специалистов / Под  ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2005. – 120 с.

Скачать сборник целиком

Функциональное состояние иммунной системы оценивается с позиций структуры, метаболизма и функций её клеточных компонентов -иммуноцитов. К настоящему времени установлено, что цитоплазматическая мембрана является одной из наиболее чувствительных к повреждающему воздействию структур клетки [5]. Мембране отводится ключевая роль в детерминации нормального функционирования отдельных клеточных органелл и клетки в целом. Дезорганизация клеточных мембран вследствие инфекционного воздействия, а также побочного действия химиопрепаратов (особенно при длительном приеме) может приводить к нарушению внутриклеточных синтетических процессов, созревания клеток и выходу в кровь неполноценных клеточных элементов, неспособных к исполнению своих функций [1]. Ключевая роль в развитии всех процессов, происходящих в клетках, а именно в мембранах, принадлежит их текучести. Этот комплексный показатель отражает как структуру, так и диффузионные аспекты липидной составляющей мембран и легко реагирует на метаболические изменения и внешние воздействия [2].
В связи с этим целью настоящего исследования явилось изучение микровязкостных свойств мембран мононуклеаров периферической крови у больных туберкулезом легких до и на фоне противотуберкулезной терапии.

Материал и методы исследования. В процессе работы было обследовано 27 больных распространенным деструктивным туберкулезом легких в возрасте от 23 до 55 лет.
Исследование микровязкостных свойств цитоплазматической мембраны мононуклеарных клеток периферической крови (моноцитов и лимфоцитов) проводили в два этапа: до лечения и в конце интенсивной фазы противотуберкулезной терапии (через 2-3 месяца от начала лечения). Контрольную группу составили 25 здоровых мужчин и женщин аналогичного возраста. Выделение лимфоцитов и моноцитов крови проводили на градиенте плотности фиколл-урографина (1,077 г/см3 и 1,083 г/см3 соответственно). Исследование микровязкости плазматических мембран осуществляли с помощью флуоресцентного зондирования зондом пирен на спектрофлуориметре «Hitachi-MPF-4». Рассчитывали коэффициент эксимеризации пирена I470/390 при длинах волн возбуждающего света 285 и 340 нм и процент индуктивно-резонансного переноса энергии с триптофана на пирен (R, %).

Результаты исследования и их обсуждение. В ходе изучения параметров флуоресценции липотропного зонда пирен в мембранах моноцитов и лимфоцитов у больных туберкулезом легких как до, так и на фоне химиотерапии установлено отчетливое увеличение коэффициентов эксимеризации пирена I470/390 при длине волны возбуждающего света Хв=285 и Хв=340 нм по сравнению с аналогичными показателями у здоровых доноров. При этом процент индуктивно-резонансного переноса энергии с триптофана на пирен, позволяющий судить о белково-липидных взаимодействиях в мембране, у больных туберкулезом легких до и после курса интенсивной химиотерапии достоверно снижался относительно уровня контроля. Известно, что степень эксимеризации пирена зависит от вязкости микроокружения, а реакция образования эксимеров пирена лимитируется скоростью диффузии молекул этого зонда в области жирнокислотных цепей липидов. Соотношение интенсивности максимумов флуоресценции мономеров пирена определяется гидрофобным объемом, доступным для молекул пирена, и подвижностью углеводородных цепей липидов. Поскольку величина эксимеризации пирена обратно пропорциональна вязкости липидного компонента мембран, выявленное достоверное увеличение средних величин данных показателей указывает на понижение упорядоченности липидных молекул в мембранах мононуклеарных лейкоцитов, а, следовательно, на повышение текучести их мембран. Достоверное снижение индуктивно-резонансного переноса энергии позволяет судить о нарушении белково-липидных взаимодействий в мембране клеток [1].

Заключение. У больных распространенным деструктивным туберкулезом легких до и на фоне противотуберкулезной химиотерапии отмечается выраженное снижение микровязкостных свойств мембран мононуклеарных лейкоцитов периферической крови.

Литература:
1. Владимиров Ю. А. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран / Ю. А. Владимиров, Г. Е. Добрецов. - М.: Наука, 1986. - 320 с.
2. Геннис Р. Биомембраны: Молекулярная структура и функции / Р. Геннис - М.: Мир, 1997. - 624 с.
3. Кноринг В. Е и соавт. // Проблемы туберкулеза. - 1999. - № 4. - С. 31-35.
4. Маянский А. Н. // Иммунология. - 2001. - № 2. - С. 53-63.
5. Фрейдлин И. С. // Иммунология. - 1995. - № 3. - С. 17-23.