ООО «Лабдиагностика» (г. Пермь)

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2005 год, Том 2, выпуск 4), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

     Независимые  исследования, провиденные в клиниках разных стран, показали, что в 50-90% случаев нарушения репродуктивной функции человека вызваны смешанными инфекциями мочеполовых путей, среди которых наиболее часты негонококковые урогенитальные инфекции, в частности хламидийная и микоплазменная [1,2].                                                         
     Длительное бессимптомное течение и множественные клинические проявления значительно затрудняют симптоматическую диагностику этих заболеваний. Не всегда эффективны и традиционные иммунологические методы анализа, т.к. инфекции обычно протекают в латентной форме.
     Развитие биотехнологий привело к созданию высокочувствительных и специфических методов диагностики инфекций, основанных на уникальности генома возбудителей, в частности - полимеразной цепной реакции (ПЦР).
     Метод ПЦР сделал возможным выявление не только острых, но и вялотекущих инфекций, а также проведение достоверных эпидемиологических и статистических исследований распространенности различных возбудителей, их совместной встречаемости, сезонных колебаний в протекании заболевания и эффективности лечения [3] .
     Цель - определить частоту выявления основных возбудителей негонококковых урогенитальных инфекций методом ПЦР.
     Материалы и методы. С июля 2004г. по февраль 2005г. обследованы 478 пациентов (167 мужчин и 311 женщин) с различными воспалительными процессами в урогенитальном тракте. Материалом для исследования являлись эпителиальные клетки дистального участка уретры мужчин и цервикального канала женщин. Клинический материал забирали специальными зондами. Образцы помещали в транспортную среду и хранили при температуре -20°С до 1 месяца. В одной пробе одновременно определяли три возбудителя Сhlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealiticum.
     Подготовку клинических проб и реакцию амплификации проводили согласно методикам ПЦР-тест-систем «АмплиСенс-100-FRT Сhlamydia trachomatis», «АмплиСенсMycoplasma hominis-FRT(RG)», «АмплиСенс - Ureaplasma urealiticum -FRT(RG)»- предназначенных для амплификации участка ДНК данных возбудителей и детекции результатов путем измерения флюоресцентного сигнала. Измерения выполняли с помощью термоциклирующей системы «ROTOR-GENE», предназначенной для проведения ПЦР в режиме реального времени (реал-тайм) и  используемой для амплификации ДНК и гибридизации.
     Результаты исследования. В исследуемом материале обнаружены генетические маркеры уреаплазм в 18,6%, микоплазм -12,3 % и  хламидий в 8,7% случаев. Из них, у 46 обследованных уреаплазмы, микоплазмы и хламидии определяли в качестве возбудителей моноинфекций, у 66 человек - в различных сочетаниях (смешанная инфекция). У 78,5% обследованных не выявлен ни один из этих патогенов.
     Анализ результатов диагностики перечисленных урогенитальных инфекций показал, что у мужчин и женщин с одинаковой частотой выявляются уреаплазмы (90,7% и 92,0%) и хламидии (38,%1 и 39,0%) соответственно. В то же время микоплазмы в уретре  мужчин встречается реже (73,3%), чем в цервикальном канале женщин (78,1%). По-видимому, дистальный участок уретры мужчин не является оптимальным объектом для размножения Mycoplasma hominis.
Существенные различия обнаружены в удельном весе смешанных негонококковых урогенитальных инфекций у мужчин и женщин: Сhlamydia trachomatis и Mycoplasma hominis совместно встречаются в 1,5% и 6,5 %, Ureaplasma urealiticum и Mycoplasma hominis в 15,2% и 42,9%, Сhlamydia trachomatis и Ureaplasma urealiticum 7,5% и 13,6% случаев соответственно.
Все перечисленные возбудители обнаруживаются одновременно в 7% случаев у мужчин и в 10,6 % случаев у женщин. При этом можно предположить, что наименьшая встречаемость Mycoplasma hominis в уретре у мужчин в целом отразилась на частоте ее выявления в составе смешанных инфекций.
Также проведена оценка динамики выявляемости Сhlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealiticum  с июня 2004 г. по февраль 2005г. Наблюдается повышение частоты выявления уреаплазм и хламидий в осенние и зимние месяцы. Всплеск относительного количества положительных результатов по всем трем инфекциям отмечен в декабре. Возможно, это свидетельствует об обострении персистирующих латентных процессов  в неблагоприятное время года. В то время как в период летних отпусков за медицинской помощью обращаются, в основном, пациенты со «свежими» клинически выраженными формами. Процент обнаружения микоплазм в течение 9 месяцев практически не колебался.
   Таким образом, данные, полученные при обследовании 478 пациентов медицинского центра,  свидетельствуют о значительной доле смешанных урогенитальных инфекций. При этом уреаплазмы и микоплазмы совместно у женщин выявляются чаще, чем у мужчин. За период наблюдений отмечены сезонные колебания встречаемости Сhlamydia trachomatis и Ureaplasma urealiticum,  выражающиеся в снижении частоты их выявления в летний период.  В то же время распределение случаев детекции  Mycoplasma hominis отличалось заметным постоянством.
Высокая чувствительность и специфичность, хорошая воспроизводимость результатов дают основание рекомендовать данную диагностическую систему «ROTOR-GENE» для ПЦР к широкому использованию в клинической и лабораторной практике.

Список литературы
1.    Дмитриев Г.А.Урогенитальная хламидийная инфекция. Подходы к диагностике и терапии/Г.АДмитриев//Инфекции, передающиеся половым путем.-2002.-№ 2.-С.21-24.
2.    Анчупане И.С.Смешанные хламидийные инфекции и их иммунокоррекция/И.С Анчупане, А.П.Милтишыш//Вестник дерматологии и венерологии.-2000.-№1.-С.28-29.
3.    Киселев В.И. Полимеразная цепная реакция в качестве критерия излеченности                              урогенитального хламидиоза/В.И Киселев, М.Ф.  Латыпова, Г.А.Дмитриев//Вестник дерматологии и венерологии.-2001.-№ 4.-С.4-5.