|
Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра иммунологии и аллергологии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 67-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2008 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (1,2 мб)
Актуальность
изучения иксодового клещевого боррелиоза (ИКБ) обусловлена повсеместной
распространенностью, высокой заболеваемостью, полиморфизмом клинических
проявлений, частотой (от 3% до 60%) формирования хронического течения с
последующей инвалидизацией. Общепризнано, что формирование хронического течения
боррелиозной инфекции связано с уровнем резистентности и реактивности
макроорганизма, который определяется балансом цитокинов с про- и
антивоспалительной активностью, как главных регуляторов межклеточных
взаимодействий в иммунной системе. Известно, что провоспалительные цитокины,
такие как IL-1, 2, 8, активируя местные механизмы защиты от боррелий,
одновременно могут способствовать их диссеминации из очага, повышая проницаемость
сосудистой стенки, а повышенное образование IL-6, в том числе астроцитами
головного мозга, приводит к несостоятельности гематоэнцефалического барьера и периваскулярным
изменениям. Высказывается мнение о преимуществе Th2-пути иммунного ответа при
ИКБ, тогда как доминирование ответа Th1-пути служит фактором хронизации
процесса [1].
Целью проведенного исследования явилась оценка
цитокинопродукции под влиянием боррелиозного антигена в культуре клеток
периферической крови больных иксодовым клещевым боррелиозом.
Материалы и методы. В исследование включены 20
больных ИКБ в возрасте от 20 до 50 лет, 10 с хронической и 10 с острой формой
заболевания (диагноз верифицирован на основании клинических проявлений и
значимого титра антител, выявленных методом ИФА). Контрольную группу составили
10 практически здоровых доноров сопоставимого возраста, у которых в анамнезе не
зафиксировано укуса клеща на протяжении всей жизни, на момент обследования
отсутствовали проявления острых заболеваний и обострения хронических
воспалительных процессов. Оценивались результаты исследования цитокинов (IL-2,
IL-4, INF-γ, TGF-β) методом твердофазного иммуноферментного анализа с
использованием наборов фирмы ООО “Протеиновый контур”. Для исследования
цитокинов использовался супернатант 3-х суточных культур клеток периферической
крови. Изучалась базальная цитокинопродукция в нестимулированных клеточных
культурах, а также стимулированных антигеном боррелий (лизат B. garinii был
любезно предоставлен отделом медико-биологических проблем ФГУП НПО “Микроген”
МЗ РФ НПО “Вирион”, руководитель к.м.н. О.В. Стронин). Статистическая обработка
результатов проводилась в программе SPSS 11.5 с использованием однофакторного
дисперсионного анализа (непараметрического критерия Манна-Уитни).
Результаты
и обсуждение. Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1.
Исследуя базальный уровень цитокинопродукции в клеточных, культурах мы выявили
достоверное снижение уровня IL-2, INF-γ в обеих клинических группах, что может
указывать на угнетение Th1-опосредованного пути на фоне боррелиозной инфекции
[2]. В то же время наблюдалось достоверное увеличение уровня IL-4 в пробах
больных, что свидетельствует об активации Th2-зависимого пути иммунного ответа.
Аналогичные результаты были получены другими авторами при изучении динамики
изменений уровня цитокинов у больных ИКБ [1, 4]. Сравнительная оценка спонтанной
продукции TGF-β в разных клинических группах выявила достоверное увеличение
данного цитокина у пациентов с острым течением ИКБ.
В
условиях антигенной стимуляции в обеих клинических группах наблюдалось более
чем 2-х кратное увеличение продукции TGF-β в сравнении с базальным уровнем, тогда
как концентрация IL-4 в супернатанте достоверно повышалась только у больных с
хроническим течением ИКБ. Не выявлено достоверно значимой стимуляции продукции IL-2
и INF-γ под влиянием боррелиозного антигена, тогда как в контрольной группе
было зарегистрировано 4-х кратное снижение уровня INF-γ.
Усиление
продукции супрессорных цитокинов (IL-4, TGF-β) в пробах с добавлением
боррелиозного антигена, возможно, обусловлено присутствием в клеточных
культурах Т- и В-лимфоцитов со специфическими рецепторами к антигенам боррелий.
Такие специализированные клоны, возможно, участвуют в наработке цитокинов (в
частности TGF-β, IL-4), супрессорная активность которых играет немаловажную
роль в патогенезе ИКБ [3]. Основными продуцентами TGF-β являются
CD4+CD25+Т-регуляторные клетки, роль которых в патогенезе различных заболеваний
активно обсуждается в настоящее время [2, 5].
Таблица 1.
Продукция цитокинов в культуре клеток
периферической крови больных ИКБ
и здоровых доноров (пкг/мл, М ± σ, n).
|
Цитокины
|
|
здоровые
доноры (n=10)
|
острый
ИКБ (n=10)
|
хронический
ИКБ (n=10)
|
|
IL-2
|
с
|
5,121±1,064
|
3,359±1,301*
|
4,881±1,296*
|
|
а
|
7,034±1,751
|
7,161±2,192
|
5,711±1,396
|
|
IL-4
|
с
|
12,841±3,035
|
28,582±5,621*
|
16,462±7,788*
|
|
а
|
11,067±3,723
|
34,811±6,513
|
20,221±10,211#
|
|
INF-γ
|
с
|
613,25±139,523
|
87,530±17,088*
|
59,000±20,093*
|
|
а
|
160,043±68,127#
|
82,12±19,928
|
85,64±26,698
|
|
TGF-β
|
с
|
43,806±16,011
|
51,561±15,862*
|
46,252±22,741
|
|
а
|
91,451±30,11
|
116,241±32,711#
|
115,59±64,779#
|
Примечание:
с- спонтанная цитокинопродукция;
а- антигенстимулированная цитокинопродукция;
* -достоверность различий с группой здоровых
доноров (р<0,05);
# -
достоверность различий со спонтанным уровнем (р<0,05).
Список литературы:
1. Васильева,
Ю. П. Клинико–иммунологические критерии хронизации иксодового клещевого
боррелиоза у детей : Автореф. дис. … канд. мед. наук / Ю. П. Васильева. – СПб.,
2003. – 16 с.
2. Николаев,
С. М. Сравнительная оценка уровней 17 цитокинов в сыворотке и цельной крови
здоровых доноров методом проточной цитометрии / С. М. Николаев // Цитокины и
воспаление. – 2005. – Т. 4, № 2. – С. 56-60.
3. Механизмы
регуляции воспаления и иммунитета в патогенезе болезни Лайма / Е. С. Фёдоров,
В. Г. Барскова, Л. П. Ананьева и др. // Клиническая медицина. – 1999. - № 6. –
С. 14-18.
4. Цитокиновый
профиль у больных с иксодовым клещевым боррелиозом / А. И. Симакова, Н. В.
Мандракова, Е. В. Маркелова и др. // Цитокины и воспаление. – 2004. - № 4. – С. 23-27.
5.
CD4+CD25+
T cells prevent arthritis associated with Borrelia vaccination and infection /
D. T. Nardlli, R. F. Scyell // Clin Diagn Lab Ivvunolog. – 2004. – P. 1075-84.
|
