Элиминация вируса и инфицированных клеток осуществляется за счет естественных клеток-киллеров, а также цитотоксических CD4+-, CD8+-лимфоцитов, вызывающих Fas/Fas-L опосредованный апоптоз инфицированных клеток и опосредованный антителами киллинг. Однако ВЭБ может противодействовать иммунитету макроорганизма, выживать в организме хозяина в течение всей его жизни. В связи с этим, изучение роли цитотоксических лимфоцитов в патогенезе ИМ имеет большую значимость для предупреждения индуцированных вирусом нарушений цитоповреждающего действия специализированных “клеток-убийц” и дальнейшей хронизации инфекционного процесса.

Целью настоящего исследования явилось оценка апоптотического потенциала цитотоксических лимфоцитов у детей с ИМ в период клинико-гематологической манифестации болезни и в фазу ранней реконвалесценции.

Обследовано 20 детей (12 мальчиков и 8 девочек) с ИМ в возрасте от 3 до 6 лет, находящихся на стационарном лечении в Детской инфекционной больнице им. Г.Е. Сибирцева. Больные были обследованы в фазу разгара заболевания (4-15-й день болезни) и в фазу ранней реконвалесценции (спустя 26-30 дней от начала заболевания). Группу сравнения составили 10 здоровых доноров с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту.

Материалом исследования служила венозная кровь. Забор крови осуществляли утром натощак в количестве 6 мл. Лимфоциты выделяли из цельной крови на градиенте плотности фиколл-урографина (ρ=1,077). Экспрессию CD-рецепторов оценивали методом поверхностной иммунофлуоресценции с использованием наборов моноклональных антител (Caltag Laboratories, Франция). Идентификацию annexin V-положительных лимфоцитов оценивали иммунофлуоресцентным методом с использованием набора Annexin V (Beckman coulter, Франция). Результаты исследования обрабатывали с использованием стандартного пакета программ «Statistica» (версия 6.0).

В острый период заболевания у детей, больных ИМ, отмечалось повышение относительного и абсолютного содержания CD95+-лимфоцитов по сравнению с нормой (в 2 и 4 раза соответственно, р<0,01). В период раннего выздоровления относительное содержание CD95+- лимфоцитов нормализовалось, а абсолютное их количество, несмотря на существенное его снижение по сравнению с предыдущим этапом исследования (р<0,05), по-прежнему превышало нормальные величины (табл. 1).

Вне зависимости от стадии заболевания отмечалось повышение CD95L-презентирующих лимфоцитов как в относительных (в 2 и 1,5 раза соответственно; р<0,01), так и в абсолютных значениях (в 10 раз, р<0,01). В период ранней реконвалесценции относительное содержание CD95L+-лимфоцитов снижалось относительно такового в острый период, но все еще сохранялось выше нормы (в 1,3 раза, р<0,05). При этом абсолютное количество CD95L+-клеток в период выздоровления не претерпевало значимых изменений по сравнению с предшествующим периодом исследования (табл. 1).

Количество annexin V-положительных клеток было также повышено по сравнению с нормой как в острый период заболевания, так и в период ранней реконвалесценции (в относительных значениях - в 1,7 и 1,9 раза соответственно, р<0,05, в абсолютных значениях – практически в 6 раз в оба периода заболевания, р<0,01) (табл. 1).

Таблица 1

Показатели апоптоза лимфоцитов периферической крови у здоровых детей

и у детей, больных инфекционным мононуклеозом, M±m

Примечание. * - р<0,05, ** - р<0,01

При изучении показателей, характеризующих степень выраженности программированной гибели лимфоцитов у детей, больных ИМ, в острый период заболевания и в фазу раннего выздоровления было зарегистрировано обогащение фракции лимфоцитов, подвергшихся спонтанному апоптозу (р<0,05 для относительных значений и р<0,01 для абсолютных значений). Это можно рассматривать как защитную реакцию организма, направленную на ограничение дальнейшего распространения вируса, но чрезмерная гибель клеток, осуществляющих реализацию противовирусного иммунитета, может обуславливать дефект Т-звена и неадекватность иммунного ответа, что позволяет вирусу длительно сохраняться в организме с формированием хронического инфекционного процесса.

Список литературы:

1.      Вирусы семейства герпеса и иммунитет / Ф. С. Харламова, Н. Ю. Егорова, Л. Н. Гусева и др. // Детские инфекции. – 2006. – Т. 5, № 3. – С. 3-10.

2.      Иммунопатогенез инфекционной болезни у детей / В. В. Иванова, Г. Ф. Железнякова, И. В. Шилова // Детские инфекции. – 2005. – Т. 4, № 1.– С. 6-11.

3.      Уразова, О. И. Мононуклеары крови при инфекционном мононуклеозе / О. И.       Уразова, В. В. Новицкий, А. П. Помогаева. – Томск : Изд-во ТГУ, 2003. – 166 с.