Курский государственный медицинский университет
Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2007 год, Том 4, выпуск 3), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н.
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (13 мб)
Введение.
Несмотря на появление в последние десятилетия большого количества современных эффективных антисекреторных препаратов и разработку различных схем эрадикации Helicobacter pylori (НР), интерес к проблеме язвенной болезни (ЯБ) не ослабевает. Распространенность этой патологии среди взрослого населения остается довольно высокой и даже в индустриально развитых странах достигает 6-10%. В России каждый 10-й взрослый житель страдает, по данным регистрации, тем или иным заболеванием органов пищеварения [6]. В некоторых регионах их распространенность существенно превышает средние показатели по стране. Среди них значительную долю составляют так называемые кислотозависимые и хеликобактерзависимые заболевания (рефлюксная болезнь пищевода, язвенная болезнь, хронический активный гастродуоденит) [2].
Однако в настоящее время отсутствует единый подход к выявлению Helicobacter pylori, которой в настоящее время приписывают ведущую роль в этиологии и патогенезе заболеваний гастродуоденальной зоны [2, 3]. Сведения о частоте обнаружения НР при язвенной болезни носят разноречивый характер [1, 2, 3, 4, 9].
Решение вопроса диагностики НР-инфекции затруднено отсутствием приемлемого «золотого стандарта». Кроме того, неопределенность в диагностике обусловлена тем, что результативность методов обнаружения НР оценивалась при обследовании разных групп больных [1, 3, 5, 8].
Уничтожение инфекции Helicobacter pylori радикально изменяет течение ЯБ, позволяет существенно снизить затраты на лечение данной категории больных благодаря снижению частоты рецидивирования заболевания [2, 5], поэтому большое значение имеет поиск наиболее надежных, эффективных и в то же время экономически выгодных методов диагностики НР у больных ЯБ.
В этой связи оправдан интерес к использованию метода полимеразной цепной реакции для определения НР у больных ЯБ.
Цель исследования. Изучение чувствительности и информативности методов диагностики различных штаммов Helicobacter pylori (полимеразная цепная реакция, цитологический и гистологический методы, иммуноферментный анализ) у больных ЯБ.
Материалы и методы.
Обследованы 125 больных язвенной болезнью в возрасте от 15 до 68 лет (средний возраст 36,4±15,2 лет), из них - 81 мужчина и 44 женщины. Наблюдаемый контингент подразделялся на больных с локализацией язвенного дефекта в двенадцатиперстной кишке - 102 человека (81,6%) и с локализацией язвенного дефекта в желудке - 23 больных (18,4%).
Постановка диагноза ЯБ базировалась на традиционных клинических, инструментальных и морфологических методах обследования. Во время фиброгастродуоденоскопии проводилась визуальная оценка слизистой оболочки и прицельная биопсия (не менее 3-4-х биоптатов) из наиболее измененных участков слизистой оболочки антрального отдела желудка, луковицы двенадцатиперстной кишки, из эрозий, краев язвы.
Наличие НР в биоптатах определяли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), направленной на нахождение ДНК банального штамма НР, а также локуса ДНК токсигенного штамма, отвечающего за продукцию вакуолизирующего токсина (тест-наборы на банальный и токсигенный штамм НР фирмы «ДНК-технология»), гистологическим и цитологическим методами, а также, в сыворотке крови, взятой из вены, исследовали наличие антител к НР - иммуноглобулинов класса G - методом иммуноферментного анализа (набор «Анти-НР Ig G ИФА» фирмы «ДИА-плюс»).
Статистическая обработка результатов исследований проводилось с применением стандартного пакета прикладных программ Microsoft Excel и Statistica 6,0 for Windows.
Результаты исследования и их обсуждение.
Установлено, что частота инфицированности НР у больных язвенной болезнью с локализацией язвы в желудке (ЯБЖ), подтвержденная гистологически (56,5%), соответствует уже известным литературным данным [1, 2, 3, 4, 5]. Инфицированность этой группы больных оказалась достоверно ниже, чем при язвенной болезни с локализацией язвы в луковице двенадцатиперстной кишки (ЯБДПК) (74,5%, p<0,05).
При изучении частоты обнаружения НР цитологическим методом выявлена следующие изменения: хеликобактерная инфекция определена у 71,6% больных ЯБДПК и 43,5% пациентов с локализацией язвы в желудке, что также согласуется с данными литературы (2, 4, 5).
Анализируя сравнительную чувствительность различных методов диагностики НР-инфекции, обнаружена следующая статистическая закономерность: достоверно более высокая частота обнаружения НР (p<0,001) определена при использовании ПЦР (89,6%) по сравнению с гистологическим (71,2%) и цитологическим (66,4%) методами исследования.
По данным литературы [2, 5], антитела к НР обнаруживаются как при визуализации бактерий в слизистой оболочке, так и при их отсутствии, как отражение следового иммунитета. Поэтому, высокий процент обнаружения антител к НР методом ИФА у больных ЯБДПК (96,1%) и ЯБЖ (95,7%) может указывать не только на большую степень инфицированности этих больных НР, но и на выраженность иммунного ответа организма на данную инфекцию. Применение этого удобного и высокочувствительного метода диагностики инфекции НР оправдано как скрининговое исследование для выявления групп риска заболеваний гастродуоденальной зоны [2].
Как известно, именно токсигенный штамм НР вызывает тяжелые гистологические изменения слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки, тем самым, являясь причинным фактором язвообразования [2]. Гистологический и цитологический методы не позволяют отдифференцировать патогенность обнаруживаемого штамма, поэтому возникает необходимость использования ПЦР у больных ЯБ для определения токсигенного штамма НР. Результаты исследования показали, что при использовании ПЦР банальный штамм обнаружен у всех больных с положительными гистологическим и цитологическим исследованиями, токсигенный штамм – у 64 (51,1%) пациентов с ЯБ.
Выводы.
1. Наиболее чувствительным методом обнаружения Helicobacter pylori в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки является полимеразная цепная реакция, которая выявляет инфицированность банальным штаммом НР в 89,6% случаев язвенной болезни, токсигенным штаммом более, чем 50% случаев инфицирования НР.
2. Применение метода ПЦР позволяет определить токсигенный штамм НР, который является основным патогенным фактором в развитии язвенной болезни.
