Посмотреть титульный лист сборника

Скачать сборник целиком (8,5 мб)

Несмотря на то, что в настоящее время на рынке товаров для животных широко представлены различные промышленные корма, большинство владельцев продолжает отдавать предпочтение натуральному  кормлению, при этом морскую рыбу часто скармливают в сыром виде. Большая часть выловленной морской рыбы в той или иной степени заражена личинками анизакид.
Анизакидоз, вызванный личинками нематод  семейства Anisakidae, является опасным заболеванием. В связи с этим в замороженной рыбе и других гидробионтах допускается наличие только нежизнеспособных личинок гельминтов [2; 4]. Также установлено, что соматические и метаболические продукты многих паразитов оказывают цитопатическое и кариопатическое действие на клетки организма хозяина [3; 6]. Доказано, что соматический экстракт из личинок Anisakis simplex также способен вызывать патологию деления клеток красного костного мозга лабораторных мышей при внутрибрюшинном введении, активизируя при этом деление мегекариоцитов [5]. Целью данной работы стало установить влияние данного экстракта на содержание тромбоцитов в периферической крови.
Материалы и методы. Материалом для эксперимента служили нежизнеспособные личинки A. simplex, выделенные из замороженной путассу. Извлеченных личинок многократно промывали водопроводной водой, затем для предотвращения роста микрофлоры обрабатывали растворами антибиотиков (пенициллин, стрептомицин и нистатин), стерильным физиологическим раствором и замораживали. После многократного замораживания и оттаивания личинок измельчали ножницами, гомогенизировали, заливали стерильным забуференным физиологическим раствором (рН 7,2) и экстрагировали при температуре +4°С в течение 18 часов. После этого раствор сливали и процедуру повторяли.
Приготовленный белковый экстракт однократно внутрибрюшинно вводили самцам белых лабораторных мышей массой 18-20 г в дозе 100 мкг белка на животное. Контрольной группе внутрибрюшинно вводили 0,1 мл забуференного физиологического раствора. Убой мышей проводили через 1; 2; 3; 4; 5 и 6 суток после введения биоматериала. Периферическую кровь собирали в пробирки «Impromini» с ЭДТА-К2 и исследовали с помощью автоматического гематологического анализатора «Abaсus Junior Vet». Фактический материал, полученный при проведении исследований, обрабатывали методом вариационной статистики. Показатели считались достоверными при значениях p≤0,05 (по t-критерию Стьюдента).
Результаты. Общее состояние контрольных и опытных животных оставалось удовлетворительным на протяжении всего периода эксперимента. Использование для анализа периферической крови лабораторных мышей автоматического гематологического анализатора позволило проследить изменение таких показателей как PLT - количество тромбоцитов (109/л) и РСТ – тромбокрит (%), характеризующий долю объема крови, занимаемую тромбоцитами. Также оценивали MPV – средний объем тромбоцитов (фл-фемтолитр) и  PDW – показатель анизацитоза тромбоцитов (%).
 Исследование периферической крови контрольной группы позволило установить содержание тромбоцитов в пределах физиологической нормы (таблица). Изменения количества тромбоцитов у животных опытных групп значительно отличалось от контрольных показателей.
Уже через сутки после введения соматического экстракта из личинок анизакид количество тромбоцитарных пластинок в периферической крови лабораторных животных увеличилось вдвое и оставалось на высоком уровне на протяжении 5 суток. Максимальное значение показателя тромбоцитоза отмечали на 4 сутки эксперимента. К концу периода наблюдений исследуемые показатели снизились до уровней контрольного значения.
Тромбоциты, являясь безъядерными фрагментами цитоплазмы мегакариоцитов красного костного мозга, принимают участие в первичном гемостазе. Повышение уровня кровяных пластинок наблюдают при злокачественных образованиях, кровотечениях, на фоне лечения кортикостероидами, в результате физического перенапряжения и хронических воспалительных заболеваний [1]. Ранее увеличение количества многоядерных мегакариоцитов в красном костном мозге мышей мы наблюдали через 12 и 24 часа после однократного внутрибрюшинного введения соматического экстракта A. simplex [5].
Средний объем тромбоцитов лабораторных мышей после внутрибрюшинного введения соматического экстракта гельминтов отличался от аналогичного показателя контрольной группы незначительно – в пределах 1%. Значительное увеличение MPV наблюдают при гипертиреозе, атеросклерозе, а также миелопролиферативных заболеваниях [1]. Также во всех группах животных был выражен анизацитоз кровяных пластинок.
Таким образом, белковый экстракт из нежизнеспособных промороженных личинок анизакид усиливает активность тромбоцитарного ростка красного костного мозга мышей. Вследствие этого, в периферической крови лабораторных животных увеличивается количество тромбоцитов. Следовательно, белковые продукты личинок A. simplex могут оказывать отрицательное действие на микроциркуляцию крови, что может стать причиной развития различных патологий.

 

Показатель	Норма	Контроль	Группы мышей после введения антигена, сут.
			1	2	3	4	5	6
PLT*	200-450	308,6±69,6	610,0 ±104,4	588,0 ±97,0	573,4 ±88,2	781,2 ±49,7	608,6 ±56,4	358,0 ±32,2
PCT*	0,15-0,32	0,15±0,03	0,33 ±0,04	0,31 ±0,05	0,30 ±0,05	0,40 ±0,04	0,30 ±0,03	0,19 ±0,03
MPV	--	5,02±0,12	5,35 ±0,15	5,35 ±0,15	5,25 ±0,15	5,15 ±0,05	5,25 ±0,15	5,30 ±0,10
PDW	До 20	28,64±0,74	31,61 ±1,40	29,60 ±1,10	28,84 ±0,31	28,85 ±0,60	28,15 ±0,25	30,65 ±1,05

 

Литература.
1. Антонов В.С., Богомолова Н.В., Волков А.С. Автоматизация гематологического анализа. Интерпретация показателей гемограммы./ Изд-во Саратовского медицинского университета, 2008. – 194с.
2. Горохов, В.В. Анизакиоз – сложная экологическая проблема/ В.В. Горохов //Ветеринария. – 1999.- №5. – С.7-14.
3. Ильинских И.Н., Новицкий В.В., Ильинских Е.Н., Ильинских Н.Н., Ткаченко С.Б. Инфекционная кариопатология / Под ред. Н.Н.Ильинских. - Томск: Изд-во Том. ун-та, 2005.-168с.: ил.
4. Поздняковский, В.М. Экспертиза рыбы, рыбопродуктов и нерыбных объектов водного промысла. Качество и безопасность./ В.М. Поздняковский, О.А. Рязанова, Т.К. Каленик, В.М. Дацун. - Сибирское университетское издательство. – Новосибирск. – 2005. – 309с.
5. Сивкова Т.Н. Кариопатическое действие соматического экстракта из личинок анизакид на клетки красного костного мозга мышей. / Т.Н.Сивкова // Труды  VI Международной научно-практической конференции «Паразитарные болезни человека, животных и растений». - Витебск. – 2008. - С.220-222.
6. Herrera L.A., Ramirez T., Rodriguez U. et al. Possible association between Taenia solium cysticercosis and cancer: increased frequency of DNA damage in peripheral lymphocytes from neurocysticercosis patients//Trans.R.Soc.Trop.Med.Hyg. – 2000. – Vol.94, N1. – P. 61–65.