Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.

 

Скачать сборник (формат MS Word, 7,3 мб)

Посмотреть основную информацию о сборнике, обложку и т.д.

 

Актуальность: проблема заболеваний, переносчиками которых являются иксодовые клещи, в последнее десятилетие приобретает все большее значение для многих регионов России и в первую очередь для Западной Сибири. В Сибири отмечается резкое и устойчивое повышение уровня заболеваемости населения клещевым энцефалитом, иксодовым клещевым боррелиозом и клещевым риккетсиозом. Возрастанию интереса к этой группе инфекций способствует и появление «новых» и пока не изученных для России инфекций – гранулоцитарного анаплазмоза человека и моноцитарного эрлихиоза человека. У иксодовых клещей выявляются также вирус Западного Нила, бартонеллы и бабезии. Заболевания, вызываемые этими патогенами, а также микст-инфекции, при отсутствии надлежащего комплекса лабораторной диагностики могут ошибочно трактоваться как клинические проявления клещевого энцефалита [1]. Учитывая тот факт, что реальная роль вышеперечисленных клещевых патогенов в инфекционной патологии населения Западной Сибири изучена мало, сведения о степени распространенности различных возбудителей, а также их уточненный видовой состав в очагах клещевых инфекций на территории Российской Федерации имеют большое значение в научном и клиническом плане.  Эти данные представляют практическую ценность для развития и совершенствования дифференциальной диагностики переносимых клещами инфекций у лиц, пострадавших от укусов клещей.

Материалы и методы: в исследование было взято 432 иксодовых клеща, собранных в городских и пригородных биотопах г. Томска летом  2010 г. Отлов клещей проводился сотрудниками кафедры зоологии позвоночных и экологии ТГУ методами сбора «на флаг» и с прокормителей – мелких животных и птиц. В исследование также вошли образцы органов мелких млекопитающих (89 образцов) и птиц (41 образец) - биоптаты мозга, печени, селезенки, мочевого пузыря и хрящевой ткани. Отлов животных производился на территории двух городских биотопов – «Университетская роща» и «Южное кладбище» и двух пригородных – «ТНХК» и «с. Коларово». Отлов птиц производили на берегу р. Томь. Собранные образцы хранили при -70ºC  и далее гомогенизировали. Выделение нуклеиновых кислот производили с использованием наборов РИБОСорб (Интерлабсервис, Россия). Комплементарные ДНК синтезировали с использованием обратной транскриптазы Mo-MuLV (Медиген, Россия). Амплификацию осуществляли в 30 мкл смеси, содержащей 2 ед. Taq ДНК-полимеразы (Медиген, Россия). Продукты амплификации разделялись на 2 % агарозном геле в однократном буфере ТАЕ. Гель рассматривали на УФ трансиллюминаторе TCP-20 MC (Wilber Lourmat, Франция) и фотографировали с использованием системы видеодокументирования КРС-650 ВН (KT&C, Южная Корея)  Для выделения продуктов амплификации из агарозного геля использовали набор Wizard SV Gel (Promega, USA). Определение нуклеотидных последовательностей продуктов амплификации проводили с использованием автоматического секвенатора Beckman Coulter CEQ2000 XL. Обработка последовательностей проводилась с использованием специализированных программных пакетов MEGA 4 (PSU, США).

 

Результаты исследования представлены в таблице 1.

Таблица 1 Инфицированность исследуемых проб различными патогенами.

		Млекопитающие		Птицы		Клещи
Всего исследовано		21 особь		14 особей		432 особи
Из общего числа:		абс.  (n)	отн. (%)	абс. (n)	отн. (%)	абс. (n)	отн. (%)
Инфицированных:	- ВКЭ	4	19,1	3	20	19	4,4
	- ВЗН	1	4,8	-	-	13	3,1
	- боррелиями	9	42,9	7	46,7	83	19,7
	- риккетсиями	5	23,8	-	-	49	11,6
	- бартонеллами	3	14,3	3	20	12	2,8
	- анаплазмами	3	14,3	1	6,7	5	1,2
	- эрлихиями	2	9,5	-	-	21	4,9
	- бабезиями	2	9,5	-	-	18	4,3
Неинфицированных		5	23,8	4	28,6	249	57,3
Микст-инфекции
Инфицированные хотя бы одним патогеном		16	76,2	10	71,4	183	42,7
Инфицированные одновременно:	-2мя патогенами	2	9,5	2	14,3	28	6,5
	-3мя патогенами	4	19,1	-	-	6	1,4
	-4мя патогенами	-	-	-	-	1	0,2

 

Примечание: ВКЭ – вирус клещевого энцефалита; ВЗН – вирус Западного Нила.

Выводы: С помощью секвенирования фрагмента 5'-нетранслируемой области для вирусных инфекций  и генов рибосомальных РНК для бактериальных и протозойных инфекций была подтверждена принадлежность исследуемых патогенов к следующим генотипам: ВКЭ к изоляту Kolarovo-2008; боррелий к Borrelia recurrentis A1 и Borrelia burgdorferi № 40; бабезий к Babesia microti; эрлихий к Ehrlichia canis, риккетсий к  Rickettsia tarasevichiae.