Ставропольский государственный университет

Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2006 год, Том 3, выпуск 1), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника

Постановка биологического эксперимента требует наличия достаточного количества хорошо развитых, здоровых лабораторных животных.
Наиболее доступными, легко разводимыми и широко используемыми в экспериментальной работе в научно - исследовательских учреждениях, а также в учебных целях являются белые крысы.
Проведение полноценного эксперимента, а также сравнительного анализа полученных результатов предполагает непременное знание широкого спектра нормативных анатомических и физиологических показателей подопытных животных. Имеются сообщения (хотя и разноречивые) практически по всем гематологическим показателям, биохимии крови, сердечно-сосудистой системы, абсолютной и относительной массе и размерам внутренних органов и многим другим параметрам у белых крыс. Однако в свете существующей проблемы дисбактериоза живых систем, обостряется необходимость изучения закономерностей его развития и путей и методов коррекции нормофлоры на удобной биологической модели, в качестве которой с успехом могут быть использованы белые крысы.
В связи с этим на данном этапе работы нами проведены предварительные микробиологические исследования, направленные на выявление в кишечнике 15 половозрелых белых крыс в возрасте от 6 до 28 месяцев основных эубиотических, пробиотических, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, выделенных в норме у других млекопитающих и человека. Животные содержались в обычных условиях вивария, поение и кормление осуществляли традиционными кормами и пищевыми отходами. Однако в рационе подопытных животных на протяжении всей жизни преобладали растительные компоненты (крупы, различные овощи, хлеб, макаронные изделия), изредка в рацион вводили молочные продукты, творог, иногда - мясо. В течение 15 дней до исследования из рациона были исключены корма, вызывающие брожение, любые лекарственные, бактериальные препараты, консерванты. Для исследования отбирали условно здоровых крыс.
Для получения максимально точных результатов, биоматериал собирали с соблюдением стерильности. Животных декапитировали, вскрывали брюшную полость, а затем в изолированный с помощью лигатур отдел толстой кишки (3-4 см) вводили 1мл физраствора на 5-10 минут. Через кишку пальцами раздавливали кишечное содержимое до гомогенной консистенции. Затем вскрывали кишечник и отбирали содержимое с помощью шприца или стерильного шпателя. Полученный биоматериал помещали во флакон, взвешивали и разбавляли физраствором 1:10. Высевали последовательно на специальные питательные среды, согласно методическим указаниям по бактериологической диагностике кишечника (Баймуратова М.А., Воронина В.Э. и др. 2004).
Ни в одном из случаев не обнаружено патогенных микробов семейства кишечных, золотистого стафилококка. Дрожжеподобные грибы обнаружены в количестве 10 4 КОЕ только у двух животных старшего возраста. Не обнаружено и таких условно-патогенных микроорганизмов, как клебсиеллы и цитробактер.
В процессе исследований установлено, что у здоровых белых крыс в содержимом толстого кишечника число бифидобактерий колеблется в достаточно широких пределах, и составляет от 1011КОЕ/г – у молодых животных до 104 КОЕ/г – у крыс предстарческого периода.
Аналогичная картина наблюдается и при исследовании лактобактерий. Их количество составило более 1011КОЕ/г - в возрасте 6 месяцев и 105 КОЕ/г - к 24 месяцам жизни, сохраняясь в таком количестве до 28 месяцев.
Общее количество кишечной палочки с нормальной ферментативной активностью у животных до 1 года составило в среднем 5 х 105 (10 6) КОЕ/г. Из них – с нормальной ферментативной активностью - в пределах 106 - 105 КОЕ.
Не обнаружено энтерококков и гемолизирующей кишечной палочки.
Эпидермальный стафилококк присутствует в количестве 10 4- 103 КОЕ/г.
Таким образом, содержание нормофлоры кишечника условно здоровых белых крыс качественно практически не отличается от нормофлоры кишечника человека. Однако в количественном соотношении имеются различия. Так число бифидобактерий у крыс предстарческого в два раза ниже, чем у людей старше 60 лет. В процессе сукцессии кишечных микроорганизмов у молодых животных количество лакто- и бифидобактерий к наступлению половой зрелости практически одинаково, в то время как у здорового человека содержание бифидобактерий во все периоды онтогенеза превалирует над содержанием лактобацилл. У стареющих животных число лактобактерий в отдельных случаях выше, чем бифидобактерий и приблизительно в 100 раз ниже, чем у человека в любом возрасте.

Литература:
1.    Бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника: Методические указания. – Астана, 2004. - 40 с.